I 1 prøve lett upasteurisert øl ble det funnet BGKP;
- i 1 prøve av fisk x\c - overskudd av QMAFAnM;
- i 3 luftprøver fra kjølekammeret - det ble funnet et overskudd av mugg-CFU - den sanitære vurderingen er "dårlig";
- i 4 prøver av tørket fisk ble det funnet et overskudd av mugg-CFU;
- i 4 prøver av tørket fisk ble det funnet et overskudd av QMAFAnM;
- i 5 prøver drikker vann(Artesisk vann tappes gjennom et nettverk av salgsautomater for tapping av vann i forbrukerbeholdere) - overskrider TMC.

Bestemmelse av antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer (QMAFAnM eller total microbial number, TMC) refererer til vurderingen av antallet av en gruppe sanitærindikerende mikroorganismer. QMAFAnM inkluderer ulike taksonomiske grupper av mikroorganismer - bakterier, gjær, muggsopp. Deres totale antall indikerer den sanitære og hygieniske tilstanden til produktet, graden av dets forurensning med mikroflora. Optimal temperatur for vekst av QMAFAnM 35-37оС (under aerobe forhold); temperaturgrensen for deres vekst er innenfor 20-45oC. Mesofile mikroorganismer lever i kroppen til varmblodige dyr, og overlever også i jord, vann og luft. QMAFAnM-indikatoren karakteriserer det totale innholdet av mikroorganismer i produktet. Dens kontroll på alle teknologiske stadier gjør det mulig å spore hvor "rent" råvaren går til produksjon, hvordan graden av "renhet" endres etter varmebehandling, og om produktet gjennomgår rekontaminering etter varmebehandling, under pakking og Oppbevaring. QMAFAnM-indikatoren er estimert ved antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer som har vokst i form av synlige kolonier på et tett næringsmedium etter inkubering ved 37°C i 24-48 timer.

QMAFAnM er den mest brukte mikrobielle sikkerhetstesten. Denne indikatoren brukes overalt for å vurdere kvaliteten på produktene, med unntak av de i produksjonen som det brukes spesielle mikrobielle kulturer (for eksempel øl, kvass, meieriprodukter etc.). Verdien av QMAFAnM-indikatoren avhenger av mange faktorer. De viktigste er modusen for varmebehandling av produktet, temperaturregime under transport, lagring og salg, produktfuktighet og relativ luftfuktighet, tilstedeværelse av oksygen, surhet av produktet, etc. En økning i QMAFAnM indikerer multiplikasjon av mikroorganismer, som kan inkludere patogener og mikroorganismer som forårsaker ødeleggelse av produktet (for eksempel muggsopp).

Selv om det totale antallet QMAFAnM-bakterier ikke direkte kan indikere tilstedeværelse eller fravær av patogene bakterier i matvarer, denne indikatoren er ganske mye brukt, for eksempel i meieriindustrien. Indikatoren QMAFAnM (OMCH) karakteriserer de sanitære og hygieniske regimene for produksjon og lagringsforhold for meieriprodukter. Produkter som inneholder et stort nummer av bakterier, selv ikke-patogene og endrer dem ikke organoleptiske indikatorer kan ikke anses komplett. Et betydelig innhold av levedyktige bakterieceller i matvarer (med unntak av de i produksjonen som surdeig brukes) indikerer enten en utilstrekkelig effektiv varmebehandling råvarer, eller om dårlig vask av utstyr, eller om utilfredsstillende lagringsforhold for produktet. Økt bakteriell forurensning av produktet indikerer også dets mulige forringelse.

For forbrukeren karakteriserer QMAFAnM (OMCH)-indikatoren kvaliteten, ferskheten og sikkerheten til matvarer. Samtidig har det en rekke ulemper å vurdere kvaliteten på et produkt bare ved denne indikatoren. For det første er dette kun en generell, kvantitativ vurdering av mikroorganismer, siden studien ikke tar hensyn til patogene, betinget patogene, psykrofile og termofile mikroorganismer. For det andre er metoden uakseptabel for produkter som inneholder teknologisk og spesifikk mikroflora.

QMAFAnM-indikatoren gjør det også mulig å vurdere nivået av sanitære og hygieniske forhold i den sosiale sfæren på jobben, den lar deg identifisere brudd på lagring og transport av produktet.

Av indikator QMAFAnM

Men kvalitetsvurderingen av denne indikatoren har en rekke ulemper:

Anaerobe mikroorganismer er ikke tatt i betraktning;

Psykrofile og termofile mikroorganismer tas ikke i betraktning;

Kvantifiserer bare mikrobiotaen;

Tar ikke hensyn til patogene mikroorganismer;

Ikke aktuelt for produkter som inneholder prosessmikrobiota.

2. Sanitærindikerende mikroorganismer:

Bakterier fra familien Enterobacteriaceae;

Enterokokker.

Påvisningen av sanitære indikative mikroorganismer i ethvert objekt indikerer dets forurensning med sekreter fra mennesker eller dyr og mulig tilstedeværelse av patogene mikroorganismer som er epidemiologisk assosiert med den tilsvarende ekskreten.

Påvisning av bakterier i gruppen Escherichia coli (BCG). Deres tilstedeværelse indikerer fekal forurensning av objektet. De kvantitative verdiene til denne indikatoren karakteriserer graden av denne forurensningen. CGB kan komme inn i matvarer med vann, støv, gjennom skitne hender, og bli båret av insekter.

Standardene inkluderer bakterier fra familien Enterobacteriaceae som sanitærindikerende mikroorganismer. Denne familien inkluderer mange typer ikke-patogene, opportunistiske og patogene mikroorganismer, derfor indikerer påvisning av mer enn 10 2 CFU av enterobakterier som ikke er patogene arter i 1 g (cm 3) av produktet dets potensielle epidemiologiske fare.

Tilstedeværelsen av enterokokker, og spesielt E. faecalis, i miljøet og maten tyder på fersk avføringskontaminering. De finnes vanligvis i ferdige produkter snakker om brudd på de teknologiske produksjonsregimene.

3. Betinget patogene mikroorganismer:

Escherichia coli;

Staphylococcus aureus;

Bakterier av slekten Proteus;

Bacillus cereus;

Sulfittreduserende clostridia;

Vibrio parahaemolyticus.

E. coli (Escherichia coli) har en dobbel betydning som en sanitær indikativ og opportunistisk mikroorganisme.

Koagulasepositiv Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) er identifisert som en potensielt farlig mikroorganisme i produkter som har passert varmebehandling. En økt mengde av det i matvarer er et tegn på sekundær forurensning av sistnevnte. Mikroorganismen kommer inn i produktene fra forurenset utstyr, inventar, fra huden, fra nasofarynxen til personell, så vel som fra syke dyr. Stafylokokker er resistente mot uønskede faktorer miljø, de formerer seg intensivt ved en temperatur på 18÷20ºС, sakte - ved 5÷6ºС. Kan formere seg i konsentrerte sukkerløsninger (opptil 60%) og bordsalt(opptil 12÷14%). Forbli levedyktig i 6 måneder når den er tørket. Reproduksjon av Staphylococcus aureus i matvarer fra 10 6 til 10 9 CFU / g (cm 3), uavhengig av den første forurensningen, fører til akkumulering av enterotoksin.

Av bakterier av slekten Proteus er to arter P. vulgaris og P. mirabilis forårsakende agenser for toksikoinfeksjoner.

Vokspinnen (Vacillus cereus) er ekstremt utbredt i naturen, dens hovedhabitat er jordsmonnet. Det finnes også i vannet i åpne reservoarer (opptil 10 3 ÷10 4 CFU / cm 3), i springvann og i luften. Disse gjenstandene tjener som en kilde til forurensning av utstyr og utstyr til bedrifter. Mat industri og Catering og forurensning av en rekke matvarer. Hvis B. cereus påvises i en mengde på mer enn 10 3 CFU / g (cm 3) og det ikke er noen patogen mikrobiota, kan denne mikroorganismen betraktes som årsaken til matforgiftning.

Sulfittreduserende clostridier er sporedannende anaerobe bakterier, hovedsakelig representert av C. perfringens og C. sporogenes. C. perfringens er konstant tilstede i tarmene til mennesker og dyr og er en indikator på fekal forurensning. Tilstedeværelsen av sulfittreduserende clostridium i produktene i en mengde på mer enn 10 2 CFU / g (cm 3) indikerer et brudd på det sanitære og hygieniske regimet på jobben, spesielt dårlig forberedelse av utstyr, inntrenging av jord, skittent vann, etc., og i tillegg på mulig trussel tilstedeværelsen av C. botulinum.

I jorda finnes innendørs støv C. perfringens i nesten 100 % av de undersøkte prøvene, i luften i serveringssteder i 10÷12 % av tilfellene, på utstyret til serveringsenheten – i nesten 30 % av tilfellene, og på sanitærklærne til cateringarbeidere - i 11÷19% av tilfellene . På matvarer finnes C. perfringens spesielt ofte på kjøtt og kjøttprodukter, som er mest involvert i utbrudd av matbårne sykdommer. I tillegg til intravital kontaminering av vev og organer hos dyr, kan forurensning forekomme ved slakting av kadaver, maling av kjøtt, tilsetning av panering og krydder, ofte med høy grad av forurensning. I prosessen matlaging sporer av C. perfringens overlever og kan spire og formere seg opp til enorme mengder i stand til å forårsake matforgiftning. Sporer av C. perfringens kan også inneholde urteprodukter. Det kritiske nivået for kontaminering av matvarer med sporer av C. perfringens anses å være ≥ 10 5 CFU / g (cm 3).

Parahemolytiske eller halofile vibrioer (Vibrio parahaemolyticus) er vidt utbredt i det ytre miljøet, først og fremst i kystnære havvann, sjøfisk og sjømat, i marine bunnsedimenter. En av representantene for slekten Vibrio, som inkluderer rundt 45 arter, V. Parahaemolyticus har vært årsaken til en rekke utbrudd av gastroenteritt forbundet med bruk av forurenset sjømat - frossen, saltet, røkt fisk, skalldyr. Sirkulasjonen til denne mikroorganismen ble etablert i henhold til ordningen sjøvann- fisk - mann - avløpsvann- sjøvann.

4. Patogene mikroorganismer:

Salmonella;

Listeria monocytogenes;

Bakterier av slekten Yersinia.

Bakterier av slekten Salmonella er i dag anerkjent som indikatorer for hele gruppen patogene tarmbakterier. Dette skyldes for det første tilstedeværelsen effektive metoder deres påvisning og for det andre det faktum at påvisningen av Salmonella til en viss grad tilsvarer påvisningen av Shigella i samme objekt, som er mye vanskeligere å isolere metodisk enn Salmonella.

For tiden standardiserer regulatoriske dokumenter mengden produkt i g (cm 3), der tilstedeværelsen av bakterier av Salmonella-slekten er uakseptabel.

Bakterier av slekten Yersinia, og spesielt Y. enterocolitica, er årsakene til infeksjonssykdommer med en rekke kliniske manifestasjoner. Yersiniose blir ofte feildiagnostisert som enterokolitt, matforgiftning, skarlagensfeber, røde hunder, hepatitt, blindtarmbetennelse, revmatisme, akutt Luftveissykdom og så videre.

Evnen til å formere seg ved en temperatur på 0÷5ºС in kjølerom, grønnsaksbutikker, etc., fører til en økning i antallet på forurensede produkter. Yersinia er ikke krevende for miljøforhold og reproduserer aktivt i jord og vann. De viktigste bærerne av disse mikroorganismene er ville gnagere og fugler. Hovedveien for menneskelig infeksjon er fordøyelsessystemet. Infeksjonen overføres gjennom forurensede matvarer, oftere med jord- og vannforurensning, sjeldnere med dyresekret. Oftest oppstår enkeltsykdommer og gruppeutbrudd fra bruk av infiserte meieriprodukter og grønnsaker - kål, gulrøtter, løk, etc.

Listeria monocytogenes er årsaken til en farlig infeksjonssykdom av zoonotisk karakter med en hovedsakelig matbåren smittevei. Patogen listeria er utbredt i naturen og er i stand til å forurense en rekke produkter - meieri, kjøtt, fisk, egg, sjømat, vegetabilske råvarer, etc. Reguleringsdokumenter fastslår massen eller volumet av produktet der disse bakteriene skal være fraværende.

5. Ødelagte mikroorganismer inkluderer:

forme sopp;

Melkesyrebakterier.

Reguleringsdokumenter fastsetter kvantitative kriterier for innholdet i visse grupper av matvarer. Imidlertid er listen over denne gruppen av mikroorganismer ufullstendig. Dermed vises betydningen av forråtningsbakterier av slekten Pseudomonas som forårsakende midler for ødeleggelse. Den mikrobiologiske stabiliteten til matvarer under lagring må også vurderes av slike indikatorer som QMAFAnM, termofile og psykrofile mikroorganismer, samt spesielle typer (eller slekter) av mikroorganismer - typiske ødeleggende midler. For eksempel, i produkter beregnet for lagring ved temperaturer over 30ºС ± 5ºС, bestemmes antall termofile; for lagring ved en uregulert temperatur på 20ºС ± 5ºС - KMAFAnM; for lagring ved lav temperatur - antall psykrofiler.

6. Mikroorganismer av startmikrobiota og probiotiske mikroorganismer:

Melkesyre- og propionsyrebakterier;

bifidobakterier;

Standardindikatorene inkluderer mikroorganismer fra startmikrobiota og probiotiske mikroorganismer (for produkter med et normalisert nivå av bioteknologisk mikrobiota). Disse indikatorene inkluderer indikatorer for det kvantitative innholdet av melkesyre, propionsyrebakterier, gjær, bifidobakterier og andre. Verdiene til disse indikatorene bestemmes av spesifikasjonene for produksjonen av et bestemt produkt og dets formål.

Testspørsmål:

1. Hvilket dokument regulerer kriterier for mattrygghet og metoder for fastsettelse av dem?

2. Hva er det grunnleggende prinsippet i HACCP kvalitetskontrollsystemet?

3. List opp hovedbestemmelsene til HACCP-kontrollsystemet.

4. Hovedprinsippet i det internasjonale systemet for vurdering av produksjonskvalitet i henhold til ISO-standarder?

5. Hvilke farer er inkludert i listen tatt i betraktning i uten feil? Hvor er de oppført?

Oppfinnelsen angår mikrobiologi, nemlig bestemmelse av matforurensning. Metoden inkluderer tilberedning av kjøtt-pepton-agar, helling av den i petriskåler, prøvetaking fra matvarer, tilberedning av en suspensjon fra en prøve av matprodukter, fremstilling av desimalfortynninger av testsuspensjonen og plassering av desimalfortynninger av testsuspensjonen i petriskåler, dyrking og telling av antall kolonier i henhold til formelen: x=a n ×10, n er fortynningsgraden. Dessuten, for å tilberede desimalfortynninger av testsuspensjonen, brukes en 0,6-0,8 % løsning av kjøttpeptonagar, mens desimalfortynninger av testsuspensjonen plasseres på membranfiltre plassert på overflaten av kjøttpeptonagaren i en Petri. rett. Metoden er original i løsning, enkel å implementere, informativ, gir statistisk signifikante resultater; lar deg redusere forbruket av næringsmedier, sterile bakteriologiske retter og analysetidspunktet betydelig; gjør det mulig å gi en reell kvantitativ vurdering av innholdet av mikroorganismer som gir konfluent vekst og danner svært små kolonier, og gjør det også mulig å studere intrapopulasjonsprosesser ved hjelp av lysmikroskopi. 1 ill., 1 tab.

Oppfinnelsen angår området veterinær- og sanitærundersøkelser, sanitet og mikrobiologi, nemlig bestemmelse av matforurensning og den sanitære og hygieniske tilstanden til miljøobjekter.

Den nærmeste er metoden for å bestemme antall mikroorganismer i pølser og kjøttprodukter i vann. Kjent måte bestemmelse av antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer i 1 g av produktet er som følger: forberedelse av en fortynningsløsning og kjøtt-peptonagar for inokulering; analyse; regnskapsresultater. 1. Ulempe eksisterende metode er at natriumkloridløsningen (0,85 %) som brukes til prøvefortynning er ikke-bufret og isotonisk kun med hensyn til pattedyrceller, og en stor mengde næringsmedium, bakteriologiske retter og arbeidskostnader brukes til analyse. I tillegg tillater ikke denne metoden en reell kvantitativ vurdering av innholdet av mikroorganismer som gir konfluent vekst og danner svært små (dugg)kolonier (Methods of General Bacteriology. Redigert av F. Gerhard et al. M .: "Mir", 1983, s. 442-512).

Formålet med oppfinnelsen er å redusere mengden næringsmedium som brukes, bakteriologiske retter og kostnadene ved arbeidstid ved å bruke en fysiologisk løsning av halvflytende MPA i stedet for en 0,85 % natriumkloridløsning, etterfulgt av inokulering av en dråpe fortynnet testsuspensjon på overflaten av membranfilteret.

applikasjon denne metoden er basert på det faktum at en fysiologisk løsning av halvflytende kjøttpeptonagar (0,6-0,8%) brukes som en fysiologisk løsning for fortynning, bestående av 1 dm 3 destillert vann, 10 g pepton, 5 g natrium klorid, 0,3 g vannfri KH2P04, 0,6 g vannfri NaH2P04 og 0,6-0,8 g agar-agar; Mediets pH er 7,0-7,2, hvorav dråper påføres overflaten av membranfiltre.

Bruken som løsning for fortynning (0,6-0,8 % kjøtt-pepton halvflytende agar) etterfulgt av inokulering av en dråpe fortynnet testsuspensjon på et membranfilter er original i løsning, lett å implementere, informativ, gir statistisk signifikante resultater; lar deg redusere forbruket av næringsmedier, sterile bakteriologiske retter og analysetidspunktet betydelig; lar deg gi en reell kvantitativ vurdering av innholdet av mikroorganismer som gir konfluent vekst og danner svært små (dugg)kolonier, og lar deg også studere intrapopulasjonsprosesser ved hjelp av lysmikroskopi.

For analyse tas matprøver i samsvar med gjeldende forskriftsdokumenter (GOST 18963-73. Drikkevann. Metoder for sanitær og bakteriologisk analyse. M., 1986; GOST 9958-81. Pølseprodukter og kjøttprodukter. M., 1982; GOST 7702.2 .1-95 Fjærfekjøtt, fjærfeinnmat og halvfabrikata, Moskva, 1994).

For å tilberede en suspensjon plasseres en veid porsjon matprodukter i en steril kolbe (glass) av en homogenisator og en 0,85% natriumkloridløsning tilsettes i en firedobbel mengde. Homogenisering utføres i en elektrisk mikser. Først knuses materialet i stykker med lav rotasjonshastighet for knivene, deretter ved 15000-20000 rpm i 2,5 minutter. Det er tillatt, i fravær av en homogenisator, å forberede testsuspensjonen i en steril porselensmørtel ved å male 20 g av produktet med 2-3 g steril sand, gradvis tilsette 80 cm 3 sterilt saltvann. For inokulering på næringsmedier tas en suspensjon med en steril gradert pipette etter 15 minutters eksponering kl. romtemperatur. 1 ml suspensjon inneholder 0,2 g av produktet.

Kjøtt-pepton-agar helles i petriskåler av glass eller plast (9 cm i diameter), og etter at agaren er avkjølt, plasseres 5-6 membranfiltre på overflaten med en steril pinsett. Diagrammet viser hovedtrinnene for å bestemme antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer ved den foreslåtte metoden.

0,6-0,8 % fysiologisk løsning av halvflytende MPA helles i 9 cm 3 i sterile reagensrør. Deretter, i 9 cm 3 fysiologisk løsning av halvflytende MPA, fremstilles desimalfortynninger av den studerte suspensjonen. For å gjøre dette tilsettes 1 cm 3 av testsuspensjonen til det første røret med 9 cm 3 halvflytende agar, 1 cm 3 av testsuspensjonen blandes grundig fra det første røret, overføres til det andre osv. 0,1 ml (1 dråpe) av den fortynnede kulturen påføres et membranfilter plassert på MPA i en kopp. I en kopp kan du legge 5-6 dråper agar med forskjellige kulturfortynninger. Dråper agar med en fortynnet kultur stivner på 10-15 minutter. Deretter dyrkes petriskåler opp ned i en termostat ved 37°C i 48 timer. For å bestemme antall levedyktige bakterieceller telles kolonier i dråper agar.

For å bestemme antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer, multipliseres antall dyrkede kolonier med graden av fortynning av kulturen i henhold til formelen:

hvor x er antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer,

a - antall voksne kolonier,

n er graden av fortynning.

For å kvantifisere innholdet av mikroorganismer som gir konfluent vekst og danner svært små (dugg)kolonier, samt for å studere intrapopulasjonsprosesser ved hjelp av lysmikroskopi, fikseres kolonier dyrket på membranfiltre i damper av 25 % glutaraldehyd i 30-40 minutter. Deretter plasseres membranfilteret på overflaten av et glassglass og påføres noen dråper propylenoksid. Membranfilteret blir gjennomsiktig og selv svært små (dugg)kolonier kan leses i mikroskop eller forstørrelsesglass og om nødvendig kan det tas mikrofotografering.

Metoden er forklart i det følgende konkrete eksempler implementering (se tabell).

Symboler: metode 1 - den nærmeste analogen

metode 2 - foreslått

Eksempel 1. Bestemmelse av antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer i kokt pølse. Bestemmelse av antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer ble utført på to måter: metode 1 (prototype) - For analyse helles kjøtt-pepton-agar i petriskåler av glass eller plast (diameter 9 cm). Prøvetaking av matvarer ble utført i samsvar med gjeldende forskriftsdokumenter (GOST 9958-81. Pølseprodukter og kjøttprodukter. M., 1982). For å fremstille en suspensjon ble en prøve av matprodukter plassert i en steril kolbe (glass) av en homogenisator og en 0,85% natriumkloridløsning ble tilsatt i en firedobbel mengde. Homogenisering ble utført i en elektrisk blander. Først ble materialet knust i stykker med lav rotasjonshastighet for knivene, deretter ved 15000-20000 rpm i 2,5 minutter. For inokulering på næringsmedier ble en suspensjon tatt med en steril gradert pipette etter 15 minutters eksponering ved romtemperatur. 1 ml suspensjon inneholder 0,2 g av produktet. Fremstilte 3 fortynninger av den undersøkte suspensjonen i fysiologisk natriumkloridløsning: fysiologisk natriumkloridløsning helles i 9 cm 3 i sterile reagensrør. Deretter, i 9 cm 3 fysiologisk natriumkloridløsning, fremstilles desimalfortynninger av den studerte suspensjonen. For å gjøre dette tilsettes 1 cm 3 av testsuspensjonen til det første røret med 9 cm 3 natriumklorid, fra det første røret, etter grundig blanding av 1 cm 3 av testsuspensjonen, overført til det andre, etc. og deretter fra hver fortynning ble 0,1 ml påført en petriskål (totalt 3 skåler). Etter det ble petriskåler dyrket opp ned i en termostat ved 37°C i 48 timer. For å bestemme antall levedyktige bakterieceller ble kolonier talt i agardråper. For å bestemme antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer, ble antallet dyrkede kolonier multiplisert med graden av fortynning av kulturen i henhold til formelen:

hvor x er antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer,

a - antall voksne kolonier,

n - fortynningsgrad,

Metode 2 (foreslått) inkluderer fremstilling av en fortynningsløsning (0,6-0,8% fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA 0,6-0,8% fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA) og kjøtt-peptonagar for såing; analyse; regnskapsresultater.

For analyse helles kjøtt-peptonagar i petriskåler av glass eller plast (9 cm i diameter), etter at agaren er avkjølt, plasseres opptil 6 membranfiltre på overflaten med en steril pinsett. Prøvetaking av matvarer ble utført i samsvar med gjeldende forskriftsdokumenter (GOST 9958-81. Pølseprodukter og kjøttprodukter. M., 1982). For å fremstille en suspensjon ble en prøve av matprodukter plassert i en steril kolbe (glass) av en homogenisator og en 0,85% natriumkloridløsning ble tilsatt i en firedobbel mengde. Homogenisering ble utført i en elektrisk blander. Først ble materialet knust i stykker med lav rotasjonshastighet for knivene, deretter ved 15000-20000 rpm i 2,5 minutter. For inokulering på næringsmedier ble en suspensjon tatt med en steril gradert pipette etter 15 minutters eksponering ved romtemperatur. 1 ml suspensjon inneholder 0,2 g av produktet. Fremstilte 3 fortynninger av den undersøkte suspensjonen i en fysiologisk løsning av MPA: 0,6-0,8 % fysiologisk løsning av halvflytende MPA helles i 9 cm 3 i sterile reagensrør. Deretter, i 9 cm 3 av en fysiologisk løsning av halvflytende MPA, fremstilles desimalfortynninger av den studerte suspensjonen. For å gjøre dette tilsettes 1 cm 3 av testsuspensjonen til det første røret med 9 cm 3 halvflytende agar, 1 cm 3 av testsuspensjonen blandes grundig fra det første røret, overføres til det andre osv. og deretter fra hver fortynning ble 0,1 ml påført overflaten av membranfilteret plassert på MPA i en petriskål. Dessuten ble 3 fortynninger plassert i en petriskål. Etter det ble petriskåler dyrket opp ned i en termostat ved 37°C i 48 timer. For å bestemme antall levedyktige bakterieceller ble kolonier talt i agardråper. For å bestemme antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer, ble antallet dyrkede kolonier multiplisert med graden av fortynning av kulturen i henhold til formelen:

hvor x er antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer,

a - antall voksne kolonier,

n er graden av fortynning.

Antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer, bestemt ved metode 1 - (9×10 2) og ved metode 2 - (10×10 2), var ikke signifikant forskjellig.

Eksempel 2. Bestemmelse av antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer i kjøtt. Bestemmelse av antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer ble utført på to måter: metode 1 (prototype) - For analyse helles kjøtt-pepton-agar i petriskåler av glass eller plast (diameter 9 cm). Prøvetaking av matvarer ble utført i samsvar med gjeldende forskriftsdokumenter (GOST 9958-81. Pølseprodukter og kjøttprodukter. M., 1982). For å fremstille en suspensjon ble en prøve av matprodukter plassert i en steril kolbe (glass) av en homogenisator og en 0,85% natriumkloridløsning ble tilsatt i en firedobbel mengde. Homogenisering ble utført i en elektrisk blander. Først ble materialet knust i stykker med lav rotasjonshastighet for knivene, deretter ved 15000-20000 rpm i 2,5 minutter. For inokulering på næringsmedier ble en suspensjon tatt med en steril gradert pipette etter 15 minutters eksponering ved romtemperatur. 1 ml suspensjon inneholder 0,2 g av produktet. Fremstilte 6 fortynninger av den undersøkte suspensjonen i fysiologisk natriumkloridløsning: fysiologisk natriumkloridløsning helles i 9 cm 3 sterile reagensrør. Deretter, i 9 cm 3 fysiologisk natriumkloridløsning, fremstilles desimalfortynninger av den studerte suspensjonen. For å gjøre dette tilsettes 1 cm 3 av testsuspensjonen til det første røret med 9 cm 3 natriumklorid, fra det første røret, etter grundig blanding av 1 cm 3 av testsuspensjonen, overført til det andre, etc. og deretter fra hver fortynning ble 0,1 ml påført en petriskål (totalt 6 skåler). Etter det ble petriskåler dyrket opp ned i en termostat ved 37°C i 48 timer. For å bestemme antall levedyktige bakterieceller ble kolonier talt i agardråper. For å bestemme antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer, ble antallet dyrkede kolonier multiplisert med graden av fortynning av kulturen i henhold til formelen:

hvor x er antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer,

a - antall voksne kolonier,

n er graden av fortynning.

Metode 2 (foreslått), inkludert fremstilling av en fortynningsløsning (0,6-0,8% fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA og 0,6-0,8% fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA) og kjøttpeptonagar for såing; analyse; regnskapsresultater.

For analyse helles kjøtt-pepton-agar i petriskåler av glass eller plast (9 cm i diameter), og etter at agaren er avkjølt, plasseres 5-6 membranfiltre på overflaten med en steril pinsett. Prøvetaking av matvarer ble utført i samsvar med gjeldende forskriftsdokumenter (GOST 9958-81. Pølseprodukter og kjøttprodukter. M., 1982). For å fremstille en suspensjon ble en prøve av matprodukter plassert i en steril kolbe (glass) av en homogenisator og en 0,85% natriumkloridløsning ble tilsatt i en firedobbel mengde. Homogenisering ble utført i en elektrisk blander. Først ble materialet knust i stykker med lav rotasjonshastighet for knivene, deretter ved 15000-20000 rpm i 2,5 minutter. For inokulering på næringsmedier ble en suspensjon tatt med en steril gradert pipette etter 15 minutters eksponering ved romtemperatur. 1 ml suspensjon inneholder 0,2 g av produktet. Fremstilte 6 fortynninger av den undersøkte suspensjonen i en fysiologisk løsning av MPA: 0,6-0,8 % fysiologisk løsning av halvflytende MPA helles i 9 cm 3 i sterile reagensrør. Deretter, i 9 cm 3 fysiologisk løsning av halvflytende MPA, fremstilles desimalfortynninger av den studerte suspensjonen. For å gjøre dette tilsettes 1 cm 3 av testsuspensjonen til det første røret med 9 cm 3 halvflytende agar, 1 cm 3 av testsuspensjonen blandes grundig fra det første røret, overføres til det andre osv. og deretter fra hver fortynning ble 0,1 ml påført overflaten av membranfilteret plassert på MPA i en petriskål. Dessuten ble 6 fortynninger plassert i to petriskåler. Etter det ble petriskåler dyrket opp ned i en termostat ved 37°C i 48 timer. For å bestemme antall levedyktige bakterieceller ble kolonier talt i agardråper. For å bestemme antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer, ble antallet dyrkede kolonier multiplisert med graden av fortynning av kulturen i henhold til formelen:

hvor x er antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer,

a - antall voksne kolonier,

n er graden av fortynning.

Etter dyrking i petriskåler ved 37°C i 48 timer, skilte ikke antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer bestemt ved metode 1 - (8×10 5) og ved metode 2 - (7×10 5) seg signifikant.

Fra eksemplene ovenfor kan det ses at når man sammenligner de to metodene, skilte ikke antallet CFU bestemt ved den foreslåtte metoden seg vesentlig fra det når det ble bestemt ved den allment aksepterte metoden. Samtidig har den utviklede metoden en rekke fordeler. Så, for å bestemme antall levedyktige celler for fem typer prøver var: i henhold til den eksisterende - 98 minutter; i henhold til den foreslåtte metoden - 48 min. Kostnaden for næringsmediet utgjorde prototypen - 420 ml; i henhold til den foreslåtte metoden - 135 ml. Antall petriskåler var i henhold til prototypen - 28 stykker; i henhold til den foreslåtte metoden - 9 stykker.