ใน 1 ตัวอย่างเบียร์ไม่พาสเจอร์ไรส์เบา ๆ - พบ BGKP;
- ใน 1 ตัวอย่างปลา x \ k - ส่วนเกินของ QMAFAnM;
- ในตัวอย่างอากาศ 3 ตัวอย่างจากห้องเย็น - พบ CFU ของเชื้อรามากเกินไป - คะแนนด้านสุขอนามัย "ไม่ดี"
- ในปลาแห้ง 4 ตัวอย่าง พบ CFU ของรามากเกินไป
- ในปลาแห้ง 4 ตัวอย่าง พบ QMAFAnM มากเกินไป
- ใน 5 ตัวอย่าง น้ำดื่ม(น้ำบาดาลไหลผ่านเครือข่ายเครื่องจักรอัตโนมัติสำหรับบรรจุน้ำลงในภาชนะอุปโภคบริโภค) - ส่วนเกินของ TMP

การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนเชิงคณะ (QMAFAnM หรือจำนวนจุลินทรีย์ทั้งหมด TMC) หมายถึงการประเมินจำนวนจุลินทรีย์ที่บ่งบอกถึงสุขอนามัย KMAFAnM ประกอบด้วยกลุ่มจุลินทรีย์ต่างๆ ที่จัดหมวดหมู่ตามอนุกรมวิธาน - แบคทีเรีย ยีสต์ รา จำนวนทั้งหมดเป็นเครื่องยืนยันถึงสถานะสุขอนามัยและสุขอนามัยของผลิตภัณฑ์ ระดับของการปนเปื้อนด้วยจุลินทรีย์ อุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับการเติบโตของ KMAFAnM 35-37оС (ภายใต้สภาวะแอโรบิก); ขีด จำกัด อุณหภูมิของการเจริญเติบโตอยู่ในช่วง20-45ºС จุลินทรีย์ในกลุ่ม Mesophilic อาศัยอยู่ในร่างกายของสัตว์เลือดอุ่น และยังอยู่รอดได้ในดิน น้ำ ในอากาศ ตัวบ่งชี้ QMAFAnM ระบุลักษณะเนื้อหาทั้งหมดของจุลินทรีย์ในผลิตภัณฑ์ การควบคุมในทุกขั้นตอนทางเทคโนโลยีทำให้สามารถติดตามว่าวัตถุดิบที่ "สะอาด" ไปสู่การผลิตได้อย่างไร ระดับของ "ความบริสุทธิ์" เปลี่ยนไปอย่างไรหลังการอบชุบด้วยความร้อน และผลิตภัณฑ์ผ่านการปนเปื้อนซ้ำหลังจากการอบชุบด้วยความร้อน ระหว่างการบรรจุและการเก็บรักษาหรือไม่ ดัชนี QMAFAnM ได้รับการประเมินโดยจำนวนของจุลินทรีย์ mesophilic aerobic และ aerobic microorganisms ที่เติบโตในรูปแบบของโคโลนีที่มองเห็นได้บนสารอาหารที่เป็นของแข็งหลังจากการฟักไข่ที่37оСเป็นเวลา 24-48 ชั่วโมง

QMAFanM คือการทดสอบความปลอดภัยของจุลินทรีย์ที่พบบ่อยที่สุด ตัวบ่งชี้นี้ใช้ทุกที่เพื่อประเมินคุณภาพของผลิตภัณฑ์ ยกเว้นผลิตภัณฑ์ที่ใช้การเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์พิเศษ (เช่น เบียร์ kvass ผลิตภัณฑ์นมเป็นต้น) ค่าของตัวบ่งชี้ QMAFAnM ขึ้นอยู่กับหลายปัจจัย ที่สำคัญที่สุดคือการรักษาความร้อนของผลิตภัณฑ์ ระบอบอุณหภูมิในระหว่างการขนส่ง การจัดเก็บและการขาย ปริมาณความชื้นของผลิตภัณฑ์และความชื้นสัมพัทธ์ของอากาศ การมีอยู่ของออกซิเจน ความเป็นกรดของผลิตภัณฑ์ ฯลฯ การเพิ่มขึ้นของ QMAFAnM บ่งชี้ถึงการเพิ่มจำนวนของจุลินทรีย์ รวมถึงเชื้อโรคและจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดการเน่าเสียของผลิตภัณฑ์ (เช่น เชื้อรา)

แม้ว่าจำนวนแบคทีเรีย QMAFAnM ทั้งหมดจะไม่สามารถระบุได้โดยตรงว่ามีหรือไม่มีแบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรคใน ผลิตภัณฑ์อาหารตัวบ่งชี้นี้ใช้กันอย่างแพร่หลาย ตัวอย่างเช่น ในอุตสาหกรรมนม ตัวบ่งชี้ KMAFAnM (OMP) ระบุลักษณะเฉพาะของโหมดการผลิตและการเก็บรักษาผลิตภัณฑ์นมที่ถูกสุขลักษณะและถูกสุขลักษณะ ผลิตภัณฑ์ที่มี จำนวนมากของแบคทีเรียแม้ไม่ก่อให้เกิดโรคและไม่เปลี่ยนแปลง ลักษณะทางประสาทสัมผัสไม่ถือว่าสมบูรณ์ เนื้อหาที่มีนัยสำคัญของเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตในอาหาร (ยกเว้นเซลล์ในการผลิตที่ใช้เชื้อจุลินทรีย์เริ่มต้น) บ่งชี้ว่ามีประสิทธิภาพไม่เพียงพอ การรักษาความร้อนวัตถุดิบหรืออุปกรณ์ทำความสะอาดไม่ดีหรือสภาพการจัดเก็บที่ไม่น่าพอใจของผลิตภัณฑ์ การปนเปื้อนของแบคทีเรียที่เพิ่มขึ้นของผลิตภัณฑ์ยังบ่งชี้ถึงการเน่าเสียที่อาจเกิดขึ้นได้

สำหรับผู้บริโภค ตัวบ่งชี้ KMAFAnM (OMP) แสดงถึงคุณภาพ ความสด และความปลอดภัยของอาหาร ในขณะเดียวกัน การประเมินคุณภาพของผลิตภัณฑ์ตามตัวบ่งชี้นี้เพียงอย่างเดียวก็มีข้อเสียหลายประการ ประการแรก นี่เป็นเพียงการประเมินจุลินทรีย์ทั่วไปในเชิงปริมาณ เนื่องจากการศึกษาไม่ได้คำนึงถึงจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค ประการที่สอง วิธีการนี้ไม่เป็นที่ยอมรับสำหรับผลิตภัณฑ์ที่มีจุลินทรีย์เฉพาะทางเทคโนโลยี

ตัวบ่งชี้ KMAFAnM ยังช่วยให้สามารถประเมินระดับของสภาวะด้านสุขอนามัยและสุขอนามัยในขอบเขตทางสังคมในการผลิต ซึ่งช่วยตรวจจับการละเมิดระบบการจัดเก็บและการขนส่งของผลิตภัณฑ์

โดย ตัวบ่งชี้ QMAFANM

แต่การประเมินคุณภาพสำหรับตัวบ่งชี้นี้มีข้อเสียหลายประการ:

ไม่รวมจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจน

จุลินทรีย์ที่ออกฤทธิ์ต่อจิตและความร้อนจะไม่ถูกนำมาพิจารณา

หาปริมาณจุลินทรีย์เท่านั้น

ไม่รวมถึงจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค

ไม่สามารถใช้ได้กับผลิตภัณฑ์ที่มีจุลินทรีย์ทางเทคโนโลยี

2. จุลินทรีย์บ่งชี้สุขาภิบาล:

แบคทีเรียในตระกูล Enterobacteriaceae;

เอนเทอโรคอคซี

การตรวจหาจุลินทรีย์ที่บ่งบอกถึงสุขอนามัยในวัตถุใดๆ บ่งชี้ว่ามีการปนเปื้อนกับสิ่งขับถ่ายของมนุษย์หรือสัตว์ และอาจมีจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคซึ่งสัมพันธ์กับของเสียที่เกี่ยวข้องทางระบาดวิทยา

การตรวจหาแบคทีเรียในกลุ่ม Escherichia coli (BGKP) การปรากฏตัวของพวกเขาบ่งบอกถึงการปนเปื้อนของอุจจาระของวัตถุ ค่าเชิงปริมาณของตัวบ่งชี้นี้แสดงถึงระดับของมลพิษนี้ BGKP สามารถเข้าไปในผลิตภัณฑ์อาหารได้ด้วยน้ำ ฝุ่น ผ่านมือที่สกปรก และแมลงพาไปได้

แบคทีเรียในตระกูล Enterobacteriaceae รวมอยู่ในจำนวนของจุลินทรีย์ที่บ่งบอกถึงสุขอนามัย ครอบครัวนี้ประกอบด้วยจุลินทรีย์ที่ไม่ก่อให้เกิดโรค ฉวยโอกาส และก่อโรคหลายชนิด ดังนั้น การตรวจหา enterobacteria มากกว่า 10 2 CFU ซึ่งไม่ใช่สายพันธุ์ที่ทำให้เกิดโรค ใน 1 กรัม (ซม. 3) ของผลิตภัณฑ์บ่งชี้ถึงอันตรายทางระบาดวิทยาที่อาจเกิดขึ้น

การมีอยู่ในสภาพแวดล้อมและอาหารของ enterococci และโดยเฉพาะอย่างยิ่ง E. faecalis บ่งบอกถึงการปนเปื้อนของอุจจาระสด มักพบใน ผลิตภัณฑ์สำเร็จรูปพูดถึงการละเมิดรูปแบบเทคโนโลยีของการผลิต

3.จุลินทรีย์ก่อโรคตามเงื่อนไข:

เอสเชอริเชีย โคไล;

Staphylococcus aureus;

แบคทีเรียในสกุล Proteus;

บาซิลลัสซีเรียส;

คลอสตริเดียลดซัลไฟต์;

วิบริโอ พาราฮีโมไลติคัส

E. coli (Escherichia coli) มีความหมายสองประการในฐานะจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคตามเงื่อนไขและถูกสุขอนามัย

Coagulase-positive Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) ถูกกำหนดให้เป็นจุลินทรีย์ที่อาจเป็นอันตรายในอาหารที่ผ่าน การรักษาความร้อน... ปริมาณที่เพิ่มขึ้นในอาหารเป็นสัญญาณของการปนเปื้อนรองของหลัง จุลินทรีย์เข้าไปในผลิตภัณฑ์จากอุปกรณ์ที่ปนเปื้อน สินค้าคงคลัง จากผิวหนัง จากช่องจมูกของบุคลากร เช่นเดียวกับจากสัตว์ป่วย Staphylococci มีลักษณะต้านทานต่อปัจจัยที่ไม่พึงประสงค์ สิ่งแวดล้อมพวกมันทวีคูณอย่างเข้มข้นที่อุณหภูมิ 18 ÷ 20 ºСช้า - ที่ 5 ÷ 6 ºС พวกเขาสามารถทวีคูณในสารละลายน้ำตาลเข้มข้น (มากถึง 60%) และ เกลือแกง(มากถึง 12 ÷ 14%) พวกเขายังคงทำงานได้เป็นเวลา 6 เดือนในสภาพแห้ง การสืบพันธุ์ของ Staphylococcus aureus ในอาหารตั้งแต่ 10 6 ถึง 10 9 CFU / g (ซม. 3) โดยไม่คำนึงถึงการเพาะครั้งแรกจะนำไปสู่การสะสมของ enterotoxin

แบคทีเรียในสกุล Proteus มีสองสายพันธุ์ P. vulgaris และ P. mirabilis เป็นสาเหตุของการติดเชื้อที่เป็นพิษ

บาซิลลัสคล้ายขี้ผึ้ง (Bacillus cereus) เป็นที่แพร่หลายในธรรมชาติที่อยู่อาศัยหลักของมันคือดิน นอกจากนี้ยังพบในน้ำของอ่างเก็บน้ำเปิด (สูงถึง 10 3 ÷ 10 4 CFU / cm 3) ใน น้ำประปาและในอากาศ วัตถุเหล่านี้เป็นแหล่งของการปนเปื้อนของอุปกรณ์และอุปกรณ์ขององค์กร อุตสาหกรรมอาหารและ จัดเลี้ยงและเพาะพันธุ์อาหารต่างๆ หากตรวจพบ B. cereus ในปริมาณมากกว่า 10 3 CFU / g (ซม. 3) และไม่มีจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค จุลินทรีย์ชนิดนี้ถือได้ว่าเป็นสาเหตุของอาหารเป็นพิษ

คลอสตริเดียที่ลดซัลไฟต์เป็นแบคทีเรียที่ก่อให้เกิดสปอร์ซึ่งส่วนใหญ่แสดงโดย C. perfringens และ C. sporogenes C. perfringens มักมีอยู่ในลำไส้ของมนุษย์และสัตว์ และบ่งชี้ถึงการปนเปื้อนของอุจจาระ การปรากฏตัวของคลอสตริเดียที่ลดซัลไฟต์ในผลิตภัณฑ์ในปริมาณมากกว่า 10 2 CFU / g (ซม. 3) บ่งชี้ว่ามีการละเมิดระบบสุขอนามัยและสุขอนามัยในที่ทำงานโดยเฉพาะอย่างยิ่งการเตรียมอุปกรณ์ไม่ดีการซึมของดินน้ำสกปรก , ฯลฯ, และนอกจากนี้ บน ภัยคุกคามที่เป็นไปได้การปรากฏตัวของ C. botulinum

ในดิน ฝุ่นของสถานที่ C. perfringens พบได้ในเกือบ 100% ของตัวอย่างที่ศึกษา ในอากาศของสถานประกอบการจัดเลี้ยงใน 10-12% ของกรณีบนอุปกรณ์ของหน่วยจัดเลี้ยง - ในเกือบ 30% ของ คดีและบนผ้าอนามัยของพนักงานของหน่วยแปรรูปอาหาร - 11-19% ของคดี ... สำหรับอาหาร C. perfringens มักพบในเนื้อสัตว์และ ผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์เกี่ยวข้องกับการระบาดของอาหารมากที่สุด นอกจากการปนเปื้อนภายในเนื้อเยื่อและอวัยวะของสัตว์แล้ว การปนเปื้อนอาจเกิดขึ้นได้ในระหว่างการฆ่าสัตว์ การสับเนื้อ การใส่ขนมปังและเครื่องเทศ ซึ่งมักมีการปนเปื้อนในระดับสูง ในระหว่าง การแปรรูปอาหารสปอร์ของ C. perfringens อยู่รอดและสามารถงอกและขยายพันธุ์ได้ถึง จำนวนมากสามารถก่อให้เกิด อาหารเป็นพิษ... C. สปอร์เพอร์ฟรินเจนส์อาจมีและ ผลิตภัณฑ์สมุนไพร... ระดับวิกฤตของการปนเปื้อนของอาหารด้วยสปอร์ C. perfringens ถือเป็น ≥10 5 CFU / g (ซม. 3)

Parahemolytic หรือ halophilic vibrios (Vibrio parahaemolyticus) เป็นที่แพร่หลายในสภาพแวดล้อมภายนอกโดยเฉพาะในน่านน้ำทะเลชายฝั่ง ปลาทะเลและอาหารทะเลในตะกอนด้านล่าง หนึ่งในตัวแทนของสกุล Vibrio ซึ่งรวมถึงประมาณ 45 สายพันธุ์ V. Parahaemolyticus เป็นสาเหตุของการระบาดของโรคกระเพาะและลำไส้อักเสบจำนวนมากที่เกี่ยวข้องกับการบริโภคอาหารทะเลที่ปนเปื้อน - แช่แข็ง, เค็ม, ปลารมควัน,หอย. การไหลเวียนของจุลินทรีย์นี้ถูกสร้างขึ้นตามโครงการ น้ำทะเล- ปลา - คน - น้ำเสีย- น้ำทะเล.

4. จุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค:

ซัลโมเนลลา;

Listeria monocytogenes;

แบคทีเรียในสกุล Yersinia

ปัจจุบันแบคทีเรียในสกุล Salmonella ได้รับการยอมรับว่าเป็นตัวบ่งชี้สำหรับกลุ่มแบคทีเรียในลำไส้ที่ทำให้เกิดโรคทั้งหมด นี่เป็นเพราะประการแรกคือการมีอยู่ วิธีที่มีประสิทธิภาพการตรวจจับและประการที่สอง การตรวจพบเชื้อซัลโมเนลลาในระดับหนึ่งนั้นสอดคล้องกับการตรวจพบชิเกลลาในวัตถุเดียวกัน ซึ่งเป็นวิธีแยกแยะได้ยากกว่าซาลโมเนลลามาก

ปัจจุบัน เอกสารข้อบังคับกำหนดมาตรฐานปริมาณของผลิตภัณฑ์ในหน่วยกรัม (ซม. 3) ซึ่งการมีอยู่ของแบคทีเรียในสกุล Salmonella ไม่เป็นที่ยอมรับ

แบคทีเรียในสกุล Yersinia และโดยเฉพาะอย่างยิ่ง Y. enterocolitica เป็นสาเหตุของโรคติดเชื้อต่างๆ อาการทางคลินิก... Yersiniosis มักจะ misdiagnosed เป็น enterocolitis, toxicoinfections ที่เกิดจากอาหาร, ไข้อีดำอีแดง, หัดเยอรมัน, ตับอักเสบ, ไส้ติ่งอักเสบ, โรคไขข้อ, เฉียบพลัน โรคระบบทางเดินหายใจและอื่น ๆ.

ความสามารถในการสืบพันธุ์ที่อุณหภูมิ 0 ÷ 5 ° C in ห้องเย็นร้านขายผัก ฯลฯ ทำให้จำนวนสินค้าปนเปื้อนเพิ่มขึ้น Yersinia ไม่ต้องการสภาพแวดล้อมและขยายพันธุ์อย่างแข็งขันในดินและน้ำ ตัวพาหลักของจุลินทรีย์เหล่านี้คือหนูและนกป่า วิธีหลักของการติดเชื้อในมนุษย์คือทางเดินอาหาร การติดเชื้อติดต่อผ่านอาหารที่ปนเปื้อน มักเกิดจากมลพิษในดินและน้ำ มักเกิดจากสารคัดหลั่งจากสัตว์ บ่อยครั้งที่โรคเดี่ยวและการระบาดแบบกลุ่มเกิดขึ้นจากการบริโภคผลิตภัณฑ์นมและผักที่ติดเชื้อ เช่น กะหล่ำปลี แครอท หัวหอม เป็นต้น

Listeria monocytogenes เป็นสาเหตุของโรคติดเชื้อที่เป็นอันตรายซึ่งมีลักษณะเป็นสัตว์สู่คนได้โดยมีการแพร่กระจายจากอาหารเป็นส่วนใหญ่ ลิสเตอเรียที่ทำให้เกิดโรคนั้นแพร่หลายในธรรมชาติและสามารถปนเปื้อนผลิตภัณฑ์ได้หลากหลาย เช่น นม เนื้อสัตว์ ปลา ไข่ อาหารทะเล วัตถุดิบจากผัก ฯลฯ เอกสารกำกับดูแลระบุมวลหรือปริมาตรของผลิตภัณฑ์ซึ่งแบคทีเรียเหล่านี้ควรหายไป

5. จุลินทรีย์ที่เน่าเสีย ได้แก่ :

เชื้อรารา;

แบคทีเรียกรดแลคติก

เอกสารเชิงบรรทัดฐานกำหนดเกณฑ์เชิงปริมาณสำหรับเนื้อหาในผลิตภัณฑ์อาหารบางกลุ่ม อย่างไรก็ตาม รายชื่อจุลินทรีย์กลุ่มนี้ยังไม่ครบถ้วน ดังนั้นจึงแสดงให้เห็นความสำคัญของแบคทีเรียเน่าเสียในสกุล Pseudomonas ในฐานะตัวแทนสาเหตุของการเน่าเสีย เสถียรภาพทางจุลชีววิทยาของผลิตภัณฑ์อาหารในระหว่างการเก็บรักษาจะต้องได้รับการประเมินโดยตัวชี้วัดเช่น KMAFanM, จุลินทรีย์ที่ชอบความร้อน และ ไซโครฟิลิก รวมทั้งจุลินทรีย์ชนิดพิเศษ (หรือจำพวก) ซึ่งเป็นเชื้อก่อโรคทั่วไปของการเน่าเสีย ตัวอย่างเช่น ในผลิตภัณฑ์ที่มีไว้สำหรับการจัดเก็บที่อุณหภูมิสูงกว่า 30 ° C ± 5 ° C จะกำหนดจำนวนเทอร์โมไฟล์ สำหรับการจัดเก็บที่อุณหภูมิ 20 ° C ± 5 ° C - KMAFAnM; สำหรับการจัดเก็บที่อุณหภูมิต่ำ - จำนวนโรคจิตเภท

6. จุลินทรีย์ของจุลินทรีย์เริ่มต้นและจุลินทรีย์โปรไบโอติก:

แบคทีเรียกรดแลคติกและกรดโพรพิโอนิก

ไบฟิโดแบคทีเรีย;

จำนวนของตัวชี้วัดเชิงบรรทัดฐานรวมถึงจุลินทรีย์ของจุลินทรีย์เริ่มต้นและจุลินทรีย์โปรไบโอติก (สำหรับผลิตภัณฑ์ที่มีระดับมาตรฐานของจุลินทรีย์เทคโนโลยีชีวภาพ) ตัวชี้วัดเหล่านี้รวมถึงตัวบ่งชี้ของเนื้อหาเชิงปริมาณของกรดแลคติก แบคทีเรียกรดโพรพิโอนิก ยีสต์ ไบฟิโดแบคทีเรีย และอื่นๆ ค่าของตัวบ่งชี้เหล่านี้ถูกกำหนดโดยข้อมูลเฉพาะของการผลิตผลิตภัณฑ์เฉพาะและวัตถุประสงค์ของผลิตภัณฑ์

คำถามควบคุม:

1. เอกสารใดบ้างที่ควบคุมเกณฑ์และวิธีการด้านความปลอดภัยของอาหารในการพิจารณา

2. หลักการสำคัญของระบบการควบคุมคุณภาพ HACCP คืออะไร?

3. ทำรายการข้อกำหนดหลักของระบบควบคุม HACCP

4. หลักการสำคัญของระบบสากลในการประเมินคุณภาพการผลิตตามมาตรฐาน ISO?

5. อันตรายใดบ้างที่รวมอยู่ในรายชื่อที่พิจารณาใน บังคับ? พวกเขาอยู่ที่ไหน?

การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับจุลชีววิทยา กล่าวคือ การกำหนดสิ่งปนเปื้อนในอาหาร วิธีการนี้รวมถึงการเตรียมเนื้อเปปโตนวุ้นเนื้อ เทลงในจานเพาะเชื้อ การเก็บตัวอย่างจากผลิตภัณฑ์อาหาร การเตรียมสารแขวนลอยจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหาร การเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยภายใต้การศึกษา การวางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้วในจานเพาะเชื้อ การเพาะปลูกและการนับจำนวนโคโลนีตามสูตร: x = an × 10, n คืออัตราการเจือจาง ยิ่งไปกว่านั้น สำหรับการเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยทดสอบ จะใช้สารละลายเปปโตนเนื้อ 0.6-0.8% ในขณะที่การเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยทดสอบจะวางบนตัวกรองเมมเบรนที่อยู่บนพื้นผิวของวุ้นเนื้อเปปโตน ในจานเพาะเชื้อ วิธีการนี้เป็นแบบดั้งเดิมในการแก้ปัญหา ใช้งานง่าย ให้ข้อมูล ให้ผลลัพธ์ที่น่าเชื่อถือทางสถิติ ช่วยให้คุณลดการบริโภคสารอาหาร เครื่องแก้วฆ่าเชื้อแบคทีเรีย และเวลาวิเคราะห์ได้อย่างมาก ช่วยให้คุณสามารถประเมินเนื้อหาของจุลินทรีย์ในเชิงปริมาณที่แท้จริงซึ่งทำให้เกิดการเติบโตที่ไหลมารวมกันและก่อตัวเป็นอาณานิคมที่เล็กมาก และยังช่วยให้คุณศึกษากระบวนการแทรกซ้อนของจุลินทรีย์ได้โดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง 1 dwg, 1 tbl

การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับสาขาการตรวจทางสัตวแพทย์และสุขาภิบาล การสุขาภิบาลและจุลชีววิทยา กล่าวคือ การกำหนดสิ่งปนเปื้อนในอาหารและสภาวะสุขาภิบาลและสุขอนามัยของวัตถุสิ่งแวดล้อม

ที่ใกล้ที่สุดคือวิธีการกำหนดจำนวนจุลินทรีย์ใน ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ในน้ำ วิธีที่รู้จักการกำหนดปริมาณของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนใน 1 กรัมของผลิตภัณฑ์มีดังนี้: การเตรียมสารละลายสำหรับการเจือจางและวุ้นเนื้อเปปโตนสำหรับการฉีดวัคซีน การวิเคราะห์; การบัญชีผล 1. ข้อเสีย วิธีที่มีอยู่คือสารละลายโซเดียมคลอไรด์ที่ใช้ (0.85%) สำหรับการเจือจางตัวอย่างไม่ถูกบัฟเฟอร์และไอโซโทนิกเฉพาะที่สัมพันธ์กับเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม และใช้อาหารเลี้ยงเชื้อ จานฆ่าเชื้อแบคทีเรีย และเวลาแรงงานจำนวนมากสำหรับการวิเคราะห์ นอกจากนี้ วิธีนี้ไม่อนุญาตให้มีการประเมินปริมาณที่แท้จริงของจุลินทรีย์ที่ให้การเจริญเติบโตที่ไหลมารวมกันและก่อตัวเป็นโคโลนีขนาดเล็กมาก (น้ำค้าง) (วิธีการของแบคทีเรียวิทยาทั่วไป แก้ไขโดย F. Gerhard et al. M.: "Mir ", 1983, หน้า 442-512).

วัตถุประสงค์ของการประดิษฐ์คือเพื่อลดปริมาณสารอาหารที่ใช้ เครื่องแก้วสำหรับแบคทีเรีย และต้นทุนของเวลาในการทำงาน โดยใช้สารละลาย MPA ทางสรีรวิทยาแทนสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% ตามด้วยการทดสอบเจือจางหยดหนึ่งหยด ระงับบนพื้นผิวของตัวกรองเมมเบรน

แอปพลิเคชัน วิธีนี้ขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่าน้ำเกลือของวุ้นเนื้อเปปโทนกึ่งของเหลว (0.6-0.8%) ใช้เป็นน้ำเกลือสำหรับการเจือจางประกอบด้วยน้ำกลั่น 1 dm 3, เปปโทน 10 กรัม, โซเดียมคลอไรด์ 5 กรัม, 0.3 กรัมของปราศจากน้ำ KH 2 PO 4, 0.6 กรัมของปราศจากน้ำ NaH 2 PO 4 และ 0.6-0.8 กรัมของวุ้น-วุ้น; pH ของตัวกลางอยู่ที่ 7.0-7.2 ซึ่งหยดลงบนพื้นผิวของตัวกรองเมมเบรน

ใช้เป็นสารละลายเจือจาง (0.6-0.8% วุ้นกึ่งของเหลวเนื้อเปปโทน) ตามด้วยการหว่านหยดของสารแขวนลอยทดสอบที่เจือจางบนตัวกรองเมมเบรนเป็นสารละลายดั้งเดิม ใช้งานง่าย ให้ข้อมูล และให้ผลลัพธ์ที่น่าเชื่อถือทางสถิติ ช่วยให้คุณลดการบริโภคสารอาหาร เครื่องแก้วฆ่าเชื้อแบคทีเรีย และเวลาวิเคราะห์ได้อย่างมาก ช่วยให้คุณสามารถประเมินปริมาณจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดการเจริญเติบโตที่ไหลมารวมกันและก่อตัวเป็นโคโลนีขนาดเล็กมาก (น้ำค้าง) และยังช่วยให้คุณศึกษากระบวนการแทรกซึมของจุลินทรีย์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง

สำหรับการวิเคราะห์ ตัวอย่างอาหารจะถูกนำมาตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 18963-73. น้ำดื่ม วิธีการวิเคราะห์สุขาภิบาลและแบคทีเรีย M. , 1986; GOST 9958-81 ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982; GOST 7702.2 .1-95 เนื้อสัตว์ปีก, เครื่องในสัตว์ปีกและผลิตภัณฑ์กึ่งสำเร็จรูป M. , 1994)

ในการเตรียมสารแขวนลอย ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์อาหารจะถูกวางในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% ในปริมาณสี่เท่า การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันจะดำเนินการในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุจะถูกบดให้เป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15,000-20,000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที อนุญาตให้เตรียมสารแขวนลอยทดสอบในครกพอร์ซเลนที่ปราศจากเชื้อได้หากไม่มีโฮโมจีไนเซอร์โดยบดผลิตภัณฑ์ 20 กรัมด้วยทรายปลอดเชื้อ 2-3 กรัม ค่อยๆ เติมน้ำเกลือปลอดเชื้อ 80 ซม. สำหรับการฉีดวัคซีนบนอาหารเลี้ยงเชื้อ สารแขวนลอยจะถูกถ่ายด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วหลังจากสัมผัสที่ . 15 นาที อุณหภูมิห้อง... สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม

วุ้นเนื้อเปปโตนเทลงในแก้วหรือจานเพาะเชื้อพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) และหลังจากที่วุ้นเย็นตัวลงแล้วตัวกรองเมมเบรน 5-6 ตัวจะถูกวางบนพื้นผิวด้วยแหนบที่ปลอดเชื้อ แผนภาพแสดงขั้นตอนหลักในการกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนตามวิธีการที่เสนอ

0.6-0.8% สารละลายน้ำเกลือของ MPA กึ่งของเหลวเทลงในหลอดทดลองที่ปราศจากเชื้อที่ 9 ซม. 3 จากนั้นในสารละลายทางสรีรวิทยา 9 ซม. 3 ของ MPA กึ่งของเหลวเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบ เมื่อต้องการทำเช่นนี้ ให้ใส่สารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 ลงในหลอดทดลองแรกโดยใช้วุ้นกึ่งของเหลว 9 ซม. 3 จากหลอดแรก หลังจากผสมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 อย่างทั่วถึง ถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง ฯลฯ . วัฒนธรรมที่เจือจาง 0.1 มล. (1 หยด) ถูกนำไปใช้กับตัวกรองเมมเบรนที่อยู่บน MPA ในจาน สามารถใส่วุ้น 5-6 หยดที่มีการเจือจางวัฒนธรรมต่างกันในจานเดียว หยดวุ้นที่มีวัฒนธรรมเจือจางแล้วแข็งตัวหลังจากผ่านไป 10-15 นาที หลังจากนั้น จานเพาะเชื้อจะถูกฟักกลับหัวในอุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตอยู่ อาณานิคมจะถูกนับในวุ้นหยด

เพื่อกำหนดจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative แอนแอโรบิกจำนวนโคโลนีที่ปลูกจะถูกคูณด้วยระดับของการเจือจางวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n คือระดับการเจือจาง

ในการหาปริมาณจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดการเจริญเติบโตที่ไหลมารวมกันและก่อตัวเป็นโคโลนีที่เล็กมาก (น้ำค้าง) ตลอดจนศึกษากระบวนการแทรกซึมของจุลินทรีย์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง อาณานิคมที่ปลูกบนตัวกรองเมมเบรนจะจับจ้องในไอระเหยของกลูตาราลดีไฮด์ 25% เป็นเวลา 30-40 นาที จากนั้นแผ่นกรองเมมเบรนจะถูกวางลงบนพื้นผิวของสไลด์แก้วและหยดโพรพิลีนออกไซด์สองสามหยดลงไป แผ่นกรองเมมเบรนจะโปร่งใส และสามารถอ่านโคโลนีที่เล็ก (น้ำค้าง) ได้โดยใช้กล้องจุลทรรศน์หรือแว่นขยาย และหากจำเป็น ให้ถ่ายภาพขนาดเล็ก

อธิบายวิธีการดังต่อไปนี้ ตัวอย่างเฉพาะการดำเนินการ (ดูตาราง)

ตำนาน: วิธีที่ 1 - อะนาล็อกที่ใกล้เคียงที่สุด

วิธีที่ 2 - แนะนำ

ตัวอย่างที่ 1 การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic ในไส้กรอกต้ม การกำหนดปริมาณของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative ไม่ใช้ออกซิเจนในสองวิธี: วิธีที่ 1 (ต้นแบบ) - สำหรับการวิเคราะห์ วุ้นเนื้อเปปโตนเทลงในแก้วหรือจานเพาะเชื้อพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) การสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารดำเนินการตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982) เพื่อเตรียมสารแขวนลอย ส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์อาหารถูกใส่ลงในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% สี่เท่า ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุถูกบดให้เป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15,000-20,000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที สำหรับการฉีดเชื้อบนอาหารเลี้ยงเชื้อ ให้ถ่ายสารแขวนลอยด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วหลังจากสัมผัสอุณหภูมิห้องเป็นเวลา 15 นาที สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม เตรียมการเจือจางของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว 3 ครั้งในสารละลายทางสรีรวิทยาของโซเดียมคลอไรด์: สารละลายเกลือของโซเดียมคลอไรด์ 9 ซม. 3 เทลงในหลอดทดลองที่ปลอดเชื้อ จากนั้นในสารละลายโซเดียมคลอไรด์ทางสรีรวิทยา 9 ซม. 3 จะเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว เมื่อต้องการทำเช่นนี้ สารแขวนลอยภายใต้การศึกษาขนาด 1 ซม. 3 จะถูกแนะนำในหลอดทดลองแรกที่มีโซเดียมคลอไรด์ 9 ซม. 3 จากหลอดแรก หลังจากผสมสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว 1 ซม. 3 อย่างทั่วถึง จะถูกถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง ฯลฯ จากนั้นนำ 0.1 มล. มาใส่ในจานเพาะเชื้อจากการเจือจางแต่ละครั้ง (ทั้งหมด 3 จาน) จากนั้นจึงนำจานเพาะเชื้อกลับหัวกลับหางในอุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตอยู่ อาณานิคมถูกนับในวุ้นวุ้น เพื่อกำหนดจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic จำนวนของโคโลนีที่ปลูกจะถูกคูณด้วยระดับของการเจือจางวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n - ระดับการเจือจาง

วิธีที่ 2 (เสนอ) รวมถึงการเตรียมสารละลายเจือจาง (MPA กึ่งของเหลวน้ำเกลือ 0.6-0.8%, MPA กึ่งของเหลวน้ำเกลือ 0.6-0.8%) และวุ้นเนื้อเปปโทนสำหรับฉีดวัคซีน การวิเคราะห์; การบัญชีผล

สำหรับการวิเคราะห์ วุ้นเนื้อเปปโตนเทลงในจานเพาะเชื้อแก้วหรือพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) หลังจากที่วุ้นเย็นตัวลงแล้ว จะมีแผ่นกรองเมมเบรนถึง 6 ชิ้นวางบนพื้นผิวด้วยแหนบที่ปลอดเชื้อ การสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารดำเนินการตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982) เพื่อเตรียมสารแขวนลอย ส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์อาหารถูกใส่ลงในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% สี่เท่า ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุถูกบดให้เป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15,000-20,000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที สำหรับการฉีดเชื้อบนอาหารเลี้ยงเชื้อ ให้ถ่ายสารแขวนลอยด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วหลังจากสัมผัสอุณหภูมิห้องเป็นเวลา 15 นาที สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม เตรียมการเจือจางของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว 3 ครั้งในสารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA: 0.6-0.8% สารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลวเท 9 ซม. 3 ลงในหลอดทดลองที่ปลอดเชื้อ จากนั้นเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบใน 9 ซม. 3 ของสารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลว เมื่อต้องการทำเช่นนี้ ให้ใส่สารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 ลงในหลอดทดลองแรกโดยใช้วุ้นกึ่งของเหลว 9 ซม. 3 จากหลอดแรก หลังจากผสมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 อย่างทั่วถึง ถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง ฯลฯ . และจากการเจือจางแต่ละครั้ง 0.1 มล. ถูกนำไปใช้กับพื้นผิวของตัวกรองเมมเบรนที่อยู่บน MPA ในจานเพาะเชื้อ นอกจากนี้ มีการเจือจาง 3 ครั้งในจานเพาะเชื้อหนึ่งจาน จากนั้นจึงนำจานเพาะเชื้อกลับหัวกลับหางในอุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตอยู่ อาณานิคมถูกนับในวุ้นวุ้น เพื่อกำหนดจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic จำนวนของโคโลนีที่ปลูกจะถูกคูณด้วยระดับของการเจือจางวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n คือระดับการเจือจาง

จำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic กำหนดโดยวิธีที่ 1 - (9 × 10 2) และวิธีที่ 2 - (10 × 10 2) ไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ

ตัวอย่างที่ 2 การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic ในเนื้อสัตว์ การกำหนดปริมาณของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative ไม่ใช้ออกซิเจนในสองวิธี: วิธีที่ 1 (ต้นแบบ) - สำหรับการวิเคราะห์ วุ้นเนื้อเปปโตนเทลงในแก้วหรือจานเพาะเชื้อพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) การสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารดำเนินการตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982) เพื่อเตรียมสารแขวนลอย ส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์อาหารถูกใส่ลงในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% สี่เท่า ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุถูกบดให้เป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15,000-20,000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที สำหรับการฉีดเชื้อบนอาหารเลี้ยงเชื้อ ให้ถ่ายสารแขวนลอยด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วหลังจากสัมผัสอุณหภูมิห้องเป็นเวลา 15 นาที สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม เตรียมการเจือจางของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว 6 ครั้งในสารละลายทางสรีรวิทยาของโซเดียมคลอไรด์: เทสารละลายเกลือของโซเดียมคลอไรด์ 9 ซม. 3 ลงในหลอดทดลองที่ปลอดเชื้อ จากนั้นในสารละลายโซเดียมคลอไรด์ทางสรีรวิทยา 9 ซม. 3 จะเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว เมื่อต้องการทำเช่นนี้ สารแขวนลอยภายใต้การศึกษาขนาด 1 ซม. 3 จะถูกแนะนำในหลอดทดลองแรกที่มีโซเดียมคลอไรด์ 9 ซม. 3 จากหลอดแรก หลังจากผสมสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว 1 ซม. 3 อย่างทั่วถึง จะถูกถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง ฯลฯ จากนั้นนำ 0.1 มล. มาใส่ในจานเพาะเชื้อจากการเจือจางแต่ละครั้ง (ทั้งหมด 6 จาน) จากนั้นจึงนำจานเพาะเชื้อกลับหัวกลับหางในอุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตอยู่ อาณานิคมถูกนับในวุ้นวุ้น เพื่อกำหนดจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic จำนวนของโคโลนีที่ปลูกจะถูกคูณด้วยระดับของการเจือจางวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n คือระดับการเจือจาง

วิธีที่ 2 (เสนอ) รวมถึงการเตรียมสารละลายสำหรับการเจือจาง (MPA กึ่งของเหลวน้ำเกลือ 0.6-0.8% และ MPA กึ่งของเหลวน้ำเกลือ 0.6-0.8%) และวุ้นเนื้อเปปโทนสำหรับฉีดวัคซีน การวิเคราะห์; การบัญชีผล

สำหรับการวิเคราะห์ วุ้นเนื้อเปปโตนเทลงในจานเพาะเชื้อแก้วหรือพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) และหลังจากที่วุ้นเย็นตัวลงแล้ว ตัวกรองเมมเบรน 5-6 ตัวจะถูกวางบนพื้นผิวด้วยแหนบที่ปลอดเชื้อ การสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารดำเนินการตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982) เพื่อเตรียมสารแขวนลอย ส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์อาหารถูกใส่ลงในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% สี่เท่า ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุถูกบดให้เป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15,000-20,000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที สำหรับการฉีดเชื้อบนอาหารเลี้ยงเชื้อ ให้ถ่ายสารแขวนลอยด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วหลังจากสัมผัสอุณหภูมิห้องเป็นเวลา 15 นาที สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม เตรียม 6 เจือจางของสารแขวนลอยตรวจสอบในสารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA: 0.6-0.8% สารละลายน้ำเกลือของ MPA กึ่งของเหลวเท 9 ซม. 3 ในหลอดทดลองที่ปราศจากเชื้อ จากนั้นในสารละลายทางสรีรวิทยา 9 ซม. 3 ของ MPA กึ่งของเหลวเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบ เมื่อต้องการทำเช่นนี้ ให้ใส่สารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 ลงในหลอดทดลองแรกโดยใช้วุ้นกึ่งของเหลว 9 ซม. 3 จากหลอดแรก หลังจากผสมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 อย่างทั่วถึง ถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง ฯลฯ . และจากการเจือจางแต่ละครั้ง 0.1 มล. ถูกนำไปใช้กับพื้นผิวของตัวกรองเมมเบรนที่อยู่บน MPA ในจานเพาะเชื้อ นอกจากนี้ มีการเจือจาง 6 ครั้งในจานเพาะเชื้อสองจาน จากนั้นจึงนำจานเพาะเชื้อกลับหัวกลับหางในอุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตอยู่ อาณานิคมถูกนับในวุ้นวุ้น เพื่อกำหนดจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic จำนวนของโคโลนีที่ปลูกจะถูกคูณด้วยระดับของการเจือจางวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n คือระดับการเจือจาง

หลังจากปลูกในจานเพาะเชื้อที่อุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง จำนวนจุลินทรีย์แอโรบิกแบบแอโรบิกและเมโซฟิลิกแบบไม่ใช้ออกซิเจนที่กำหนดโดยวิธีที่ 1 - (8 × 10 5) และวิธีที่ 2 - (7 × 10 5) ไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ

จากตัวอย่างข้างต้น จะเห็นได้ว่าในการประเมินเปรียบเทียบของทั้งสองวิธี หมายเลข CFU ที่กำหนดโดยวิธีการที่เสนอไม่แตกต่างอย่างมีนัยสำคัญจากจำนวนที่พิจารณาโดยวิธีการที่ยอมรับโดยทั่วไป ในขณะเดียวกัน วิธีการที่พัฒนาขึ้นก็มีข้อดีหลายประการ ดังนั้นเพื่อกำหนดจำนวนเซลล์ที่มีชีวิตสำหรับตัวอย่างห้าประเภทคือ: ตามที่มีอยู่ - 98 นาที; ตามวิธีการที่เสนอ - 48 นาที ค่าใช้จ่ายของสารอาหารเป็นไปตามต้นแบบ - 420 มล. ตามวิธีการที่เสนอ - 135 มล. จำนวนจานเพาะเชื้อเป็นไปตามต้นแบบ - 28 ชิ้น; ตามวิธีที่เสนอ - 9 ชิ้น