การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับจุลชีววิทยา กล่าวคือ การตรวจหาการปนเปื้อนในอาหาร วิธีการนี้รวมถึงการเตรียมเนื้อเปปโตนวุ้น เทลงในจานเพาะเชื้อ เก็บตัวอย่างจากผลิตภัณฑ์อาหาร การเตรียมสารแขวนลอยจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหาร การเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว การเพาะปลูกและการนับจำนวนโคโลนีตามสูตร: x = an × 10, n คืออัตราการเจือจาง ยิ่งไปกว่านั้น สำหรับการเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยทดสอบ จะใช้สารละลายเปปโตนเนื้อ 0.6-0.8% ในขณะที่การเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยทดสอบจะวางบนตัวกรองเมมเบรนที่อยู่บนพื้นผิวของวุ้นเนื้อเปปโตน ในจานเพาะเชื้อ วิธีการนี้เป็นแบบดั้งเดิมในโซลูชัน ใช้งานง่าย ให้ข้อมูล ให้ผลลัพธ์ที่น่าเชื่อถือทางสถิติ ช่วยให้คุณลดการบริโภคสารอาหาร เครื่องแก้วฆ่าเชื้อแบคทีเรีย และเวลาวิเคราะห์ได้อย่างมาก ช่วยให้คุณสามารถประเมินเนื้อหาของจุลินทรีย์ในเชิงปริมาณที่แท้จริงซึ่งทำให้เกิดการเติบโตที่ไหลมารวมกันและก่อตัวเป็นอาณานิคมที่เล็กมาก และยังช่วยให้คุณศึกษากระบวนการแทรกซ้อนของจุลินทรีย์ได้โดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง 1 dwg, 1 tbl

การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับสาขาการตรวจทางสัตวแพทย์และสุขาภิบาล สุขาภิบาลและจุลชีววิทยา กล่าวคือ การกำหนดสิ่งปนเปื้อนในอาหารและสภาวะสุขาภิบาลและสุขอนามัยของวัตถุสิ่งแวดล้อม

ใกล้เคียงที่สุดคือวิธีการกำหนดจำนวนจุลินทรีย์ในไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ในน้ำ วิธีการที่ทราบในการกำหนดปริมาณของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนแบบคณะใน 1 กรัมของผลิตภัณฑ์มีดังนี้: การเตรียมสารละลายสำหรับการเจือจางและวุ้นเนื้อเปปโตนสำหรับการฉีดวัคซีน การวิเคราะห์; การบัญชีผล 1. ข้อเสียของวิธีการที่มีอยู่คือ สารละลายที่ใช้สำหรับโซเดียมคลอไรด์ (0.85%) สำหรับการเจือจางตัวอย่างจะไม่ถูกบัฟเฟอร์และไอโซโทนิกสัมพันธ์กับเวลาเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมเท่านั้น นอกจากนี้วิธีนี้ไม่อนุญาตให้มีการประเมินปริมาณที่แท้จริงของจุลินทรีย์ที่ให้การเจริญเติบโตที่ไหลมารวมกันและก่อตัวเป็นอาณานิคมขนาดเล็กมาก (น้ำค้าง) (วิธีการของแบคทีเรียวิทยาทั่วไปแก้ไขโดย F. Gerhard et al. M.: "Mir ", 1983, p. 442-512)

วัตถุประสงค์ของการประดิษฐ์คือเพื่อลดปริมาณสารอาหารที่ใช้ เครื่องแก้วสำหรับแบคทีเรีย และต้นทุนของเวลาในการทำงาน โดยใช้สารละลาย MPA แบบกึ่งของเหลวทางสรีรวิทยาแทนสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% ตามด้วยหยอดสารแขวนลอยทดสอบเจือจาง บนพื้นผิวของแผ่นกรองเมมเบรน

การใช้วิธีนี้ขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่าสารละลายทางสรีรวิทยาของวุ้นเนื้อเปปโตนกึ่งของเหลว (0.6-0.8%) ใช้เป็นสารละลายน้ำเกลือสำหรับการเจือจางประกอบด้วยน้ำกลั่น 1 dm 3 เปปโทน 10 กรัม , โซเดียมคลอไรด์ 5 กรัม, KH 2 PO 4 ปราศจากน้ำ 0.3 กรัม, NaH 2 PO 4 ปราศจากน้ำ 0.6 กรัม และวุ้นวุ้น 0.6-0.8 กรัม pH ของตัวกลางอยู่ที่ 7.0-7.2 ซึ่งหยดลงบนพื้นผิวของตัวกรองเมมเบรน

ใช้เป็นสารละลายเจือจาง (0.6-0.8% วุ้นกึ่งของเหลวเนื้อเปปโทน) ตามด้วยการหว่านหยดของสารแขวนลอยทดสอบที่เจือจางบนตัวกรองเมมเบรนเป็นสารละลายดั้งเดิม ใช้งานง่าย ให้ข้อมูล และให้ผลลัพธ์ที่น่าเชื่อถือทางสถิติ ช่วยลดการบริโภคสารอาหาร เครื่องแก้วฆ่าเชื้อแบคทีเรีย และเวลาวิเคราะห์ได้อย่างมาก ช่วยให้คุณประเมินปริมาณจุลินทรีย์จริงในเชิงปริมาณที่ให้การเจริญเติบโตที่ไหลมารวมกันและก่อตัวเป็นอาณานิคมขนาดเล็กมาก (น้ำค้าง) และยังช่วยให้คุณศึกษากระบวนการแทรกซึมของจุลินทรีย์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง

สำหรับการวิเคราะห์ตัวอย่างอาหารจะถูกนำมาตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 18963-73. น้ำดื่ม วิธีการวิเคราะห์สุขาภิบาลและแบคทีเรีย M. , 1986; GOST 9958-81 ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982; GOST 7702.2 .1-95 เนื้อสัตว์ปีก, เครื่องในสัตว์ปีกและผลิตภัณฑ์กึ่งสำเร็จรูป M. , 1994)

ในการเตรียมสารแขวนลอย ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์อาหารจะถูกวางในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% ในปริมาณสี่เท่า การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันจะดำเนินการในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุจะถูกบดให้เป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15,000-20,000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที อนุญาตให้เตรียมสารแขวนลอยทดสอบในครกพอร์ซเลนที่ปราศจากเชื้อได้หากไม่มีโฮโมจีไนเซอร์โดยบดผลิตภัณฑ์ 20 กรัมด้วยทรายปลอดเชื้อ 2-3 กรัม ค่อยๆ เติมน้ำเกลือปลอดเชื้อ 80 ซม. สำหรับการฉีดวัคซีนบนอาหารเลี้ยงเชื้อ สารแขวนลอยจะถูกถ่ายด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาที่ผ่านการฆ่าเชื้อหลังจากผ่านไป 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม

วุ้นเนื้อเปปโตนเทลงในแก้วหรือจานเพาะเชื้อพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) และหลังจากที่วุ้นเย็นตัวลงแล้วตัวกรองเมมเบรน 5-6 ตัวจะถูกวางไว้บนพื้นผิวด้วยแหนบที่ปลอดเชื้อ แผนภาพแสดงขั้นตอนหลักของการกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ mesophilic แบบไม่ใช้ออกซิเจนโดยวิธีการที่เสนอ

0.6-0.8% สารละลายน้ำเกลือของ MPA กึ่งของเหลว เทลงในหลอดทดลองที่ปราศจากเชื้อที่ 9 ซม. 3 จากนั้นในสารละลายน้ำเกลือ MPA กึ่งของเหลว 9 ซม. 3 เตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบ สำหรับสิ่งนี้ สารแขวนลอยภายใต้การศึกษาขนาด 1 ซม. 3 ถูกแนะนำในหลอดทดลองแรกด้วยวุ้นกึ่งของเหลว 9 ซม. 3 จากหลอดแรก หลังจากผสมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 อย่างทั่วถึง ถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง ฯลฯ . วัฒนธรรมที่เจือจาง 0.1 มล. (1 หยด) ถูกนำไปใช้กับตัวกรองเมมเบรนที่อยู่บน MPA ในจาน สามารถใส่วุ้น 5-6 หยดที่มีการเจือจางวัฒนธรรมต่างกันในจานเดียว หยดวุ้นที่มีวัฒนธรรมเจือจางแล้วแข็งตัวหลังจากผ่านไป 10-15 นาที หลังจากนั้น จานเพาะเชื้อจะถูกฟักกลับหัวในอุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่ทำงานได้ อาณานิคมจะถูกนับในวุ้นหยด

ในการกำหนดจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และแบบไม่ใช้ออกซิเจนแบบปัญญา จำนวนของโคโลนีที่ปลูกจะถูกคูณด้วยระดับของการเจือจางวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n คือระดับการเจือจาง

เพื่อประเมินปริมาณจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดการเจริญเติบโตที่ไหลมารวมกันและก่อตัวเป็นโคโลนีที่มีขนาดเล็กมาก (น้ำค้าง) ตลอดจนศึกษากระบวนการแทรกซึมของจุลินทรีย์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง อาณานิคมที่ปลูกบนตัวกรองเมมเบรนจะถูกตรึงในไอระเหยของกลูตาราลดีไฮด์ 25% เป็นเวลา 30-40 นาที จากนั้นแผ่นกรองเมมเบรนจะถูกวางลงบนพื้นผิวของสไลด์แก้วและหยดโพรพิลีนออกไซด์สองสามหยดลงไป แผ่นกรองเมมเบรนจะโปร่งใส และสามารถอ่านโคโลนีที่เล็กมาก (น้ำค้าง) ได้ผ่านกล้องจุลทรรศน์หรือแว่นขยาย และหากจำเป็น ให้ใช้ไมโครโฟโต้

วิธีการนี้แสดงให้เห็นในตัวอย่างการใช้งานเฉพาะต่อไปนี้ (ดูตาราง)

ตำนาน: วิธีที่ 1 - อะนาล็อกที่ใกล้เคียงที่สุด

วิธีที่ 2 - แนะนำ

ตัวอย่างที่ 1 การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic ในไส้กรอกต้ม การกำหนดปริมาณของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative ไม่ใช้ออกซิเจนในสองวิธี: วิธีที่ 1 (ต้นแบบ) - สำหรับการวิเคราะห์ วุ้นเนื้อเปปโตนเทลงในแก้วหรือจานเพาะเชื้อพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) การสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารดำเนินการตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982) เพื่อเตรียมสารแขวนลอย ส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์อาหารถูกใส่ลงในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์ และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% สี่เท่า ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุถูกบดให้เป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15,000-20,000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที สำหรับการฉีดเชื้อบนอาหารเลี้ยงเชื้อ สารแขวนลอยถูกถ่ายด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว หลังจากได้รับเชื้อ 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม เตรียมการเจือจางของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว 3 ครั้งในสารละลายทางสรีรวิทยาของโซเดียมคลอไรด์: สารละลายเกลือของโซเดียมคลอไรด์ 9 ซม. 3 เทลงในหลอดทดลองที่ปลอดเชื้อ จากนั้นในสารละลายโซเดียมคลอไรด์ทางสรีรวิทยา 9 ซม. 3 จะเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยทดสอบ เมื่อต้องการทำเช่นนี้ สารแขวนลอยภายใต้การศึกษาขนาด 1 ซม. 3 จะถูกแนะนำในหลอดทดลองแรกที่มีโซเดียมคลอไรด์ 9 ซม. 3 จากหลอดแรก หลังจากผสมสารแขวนลอยที่ตรวจสอบอย่างละเอียด 1 ซม. 3 แล้ว จะถูกถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง เป็นต้น จากนั้นนำ 0.1 มล. มาใส่ในจานเพาะเชื้อจากการเจือจางแต่ละครั้ง (ทั้งหมด 3 จาน) จากนั้นจึงนำจานเพาะเชื้อกลับหัวกลับหางในอุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่ดำรงชีวิต อาณานิคมถูกนับในวุ้นวุ้น เพื่อหาจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิกแบบมีโซฟิลิกและแบบไม่ใช้ออกซิเจนแบบคณะ จำนวนโคโลนีที่โตแล้วคูณด้วยระดับการเจือจางวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n - ระดับการเจือจาง

วิธีที่ 2 (เสนอ) รวมถึงการเตรียมสารละลายเจือจาง (MPA กึ่งของเหลวน้ำเกลือ 0.6-0.8%, MPA กึ่งของเหลวน้ำเกลือ 0.6-0.8%) และวุ้นเนื้อเปปโทนสำหรับฉีดวัคซีน การวิเคราะห์; การบัญชีผล

สำหรับการวิเคราะห์ วุ้นเนื้อเปปโตนจะถูกเทลงในจานเพาะเชื้อแก้วหรือพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) หลังจากที่วุ้นเย็นตัวลงแล้ว ตัวกรองเมมเบรนถึง 6 ชิ้นจะถูกวางบนพื้นผิวด้วยแหนบที่ปลอดเชื้อ การสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารดำเนินการตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982) เพื่อเตรียมสารแขวนลอย ส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์อาหารถูกใส่ลงในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์ และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% สี่เท่า ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุถูกบดเป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15,000-20,000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที สำหรับการฉีดเชื้อบนอาหารเลี้ยงเชื้อ สารแขวนลอยถูกถ่ายด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาหลังจากได้รับเชื้อเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม เตรียมการเจือจางของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว 3 ครั้งในสารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA: 0.6-0.8% สารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลวเท 9 ซม. 3 ลงในหลอดทดลองที่ปลอดเชื้อ จากนั้นเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบใน 9 ซม. 3 ของสารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลว เมื่อต้องการทำเช่นนี้ ให้ใส่สารแขวนลอยทดสอบขนาด 1 ซม. 3 ลงในหลอดทดลองแรกโดยใช้วุ้นกึ่งเหลวขนาด 9 ซม. 3 จากหลอดแรก หลังจากผสมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 อย่างทั่วถึง ถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง ฯลฯ . และจากการเจือจางแต่ละครั้ง 0.1 มล. ถูกนำไปใช้กับพื้นผิวของตัวกรองเมมเบรนที่อยู่บน MPA ในจานเพาะเชื้อ ยิ่งไปกว่านั้น มีการเจือจาง 3 ครั้งในจานเพาะเชื้อหนึ่งจาน จากนั้นจึงนำจานเพาะเชื้อกลับหัวกลับหางในอุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตอยู่ อาณานิคมถูกนับในวุ้นวุ้น เพื่อหาจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิกแบบมีโซฟิลิกและแบบไม่ใช้ออกซิเจนแบบคณะ จำนวนโคโลนีที่โตแล้วคูณด้วยระดับการเจือจางวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n คือระดับการเจือจาง

จำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic กำหนดโดยวิธีที่ 1 - (9 × 10 2) และวิธีที่ 2 - (10 × 10 2) ไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ

ตัวอย่างที่ 2 การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic ในเนื้อสัตว์ การกำหนดปริมาณของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative ไม่ใช้ออกซิเจนในสองวิธี: วิธีที่ 1 (ต้นแบบ) - สำหรับการวิเคราะห์ วุ้นเนื้อเปปโตนเทลงในแก้วหรือจานเพาะเชื้อพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) การสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารดำเนินการตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982) เพื่อเตรียมสารแขวนลอย ส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์อาหารถูกใส่ลงในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์ และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% สี่เท่า ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุถูกบดเป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15,000-20,000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที สำหรับการฉีดเชื้อบนอาหารเลี้ยงเชื้อ สารแขวนลอยถูกถ่ายด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาหลังจากได้รับเชื้อเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม เตรียมการเจือจางของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบแล้ว 6 ครั้งในสารละลายทางสรีรวิทยาของโซเดียมคลอไรด์: สารละลายเกลือของโซเดียมคลอไรด์ 9 ซม. 3 เทลงในหลอดทดลองที่ปราศจากเชื้อ จากนั้นในสารละลายโซเดียมคลอไรด์ทางสรีรวิทยา 9 ซม. 3 จะเตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยทดสอบ เมื่อต้องการทำเช่นนี้ สารแขวนลอยภายใต้การศึกษาขนาด 1 ซม. 3 จะถูกแนะนำในหลอดทดลองแรกที่มีโซเดียมคลอไรด์ 9 ซม. 3 จากหลอดแรก หลังจากผสมสารแขวนลอยที่ตรวจสอบอย่างละเอียด 1 ซม. 3 แล้ว จะถูกถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง เป็นต้น จากนั้นนำ 0.1 มล. มาใส่ในจานเพาะเชื้อจากการเจือจางแต่ละครั้ง (ทั้งหมด 6 จาน) จากนั้นจึงนำจานเพาะเชื้อกลับหัวกลับหางในอุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตอยู่ อาณานิคมถูกนับในวุ้นวุ้น เพื่อหาจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิกแบบมีโซฟิลิกและแบบไม่ใช้ออกซิเจนแบบคณะ จำนวนโคโลนีที่โตแล้วคูณด้วยระดับการเจือจางวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n คือระดับการเจือจาง

วิธีที่ 2 (เสนอ) รวมถึงการเตรียมสารละลายสำหรับการเจือจาง (MPA กึ่งของเหลวน้ำเกลือ 0.6-0.8% และ MPA กึ่งของเหลวน้ำเกลือ 0.6-0.8%) และวุ้นเนื้อเปปโทนสำหรับฉีดวัคซีน การวิเคราะห์; การบัญชีผล

สำหรับการวิเคราะห์ วุ้นเนื้อเปปโตนจะถูกเทลงในจานเพาะเชื้อแก้วหรือพลาสติก (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) และหลังจากที่วุ้นเย็นตัวลงแล้ว ตัวกรองเมมเบรน 5-6 ตัวจะถูกวางบนพื้นผิวด้วยแหนบที่ปลอดเชื้อ การสุ่มตัวอย่างผลิตภัณฑ์อาหารดำเนินการตามเอกสารกำกับดูแลปัจจุบัน (GOST 9958-81. ผลิตภัณฑ์ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ M. , 1982) เพื่อเตรียมสารแขวนลอย ส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์อาหารถูกใส่ลงในขวดปลอดเชื้อ (แก้ว) ของโฮโมจีไนเซอร์ และเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.85% สี่เท่า ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในเครื่องผสมไฟฟ้า ขั้นแรก วัสดุถูกบดให้เป็นชิ้นเล็กชิ้นน้อยด้วยความเร็วรอบของมีดหมุนช้า จากนั้นที่ 15,000-20,000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2.5 นาที สำหรับการฉีดเชื้อบนอาหารเลี้ยงเชื้อ สารแขวนลอยถูกถ่ายด้วยปิเปตที่สำเร็จการศึกษาที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว หลังจากได้รับเชื้อ 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง สารแขวนลอย 1 มล. มีผลิตภัณฑ์ 0.2 กรัม เตรียม 6 เจือจางของสารแขวนลอยตรวจสอบในสารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA: 0.6-0.8% สารละลายทางสรีรวิทยาของ MPA กึ่งของเหลวเท 9 ซม. 3 ในหลอดทดลองที่ปราศจากเชื้อ จากนั้นในสารละลายน้ำเกลือ MPA กึ่งของเหลว 9 ซม. 3 เตรียมการเจือจางทศนิยมของสารแขวนลอยที่ตรวจสอบ สำหรับสิ่งนี้ สารแขวนลอยภายใต้การศึกษาขนาด 1 ซม. 3 ถูกแนะนำในหลอดทดลองแรกด้วยวุ้นกึ่งของเหลว 9 ซม. 3 จากหลอดแรก หลังจากผสมสารแขวนลอยทดสอบ 1 ซม. 3 อย่างทั่วถึง ถ่ายโอนไปยังหลอดที่สอง ฯลฯ . และจากการเจือจางแต่ละครั้ง 0.1 มล. ถูกนำไปใช้กับพื้นผิวของตัวกรองเมมเบรนที่อยู่บน MPA ในจานเพาะเชื้อ นอกจากนี้ มีการเจือจาง 6 ครั้งในจานเพาะเชื้อสองจาน จากนั้นจึงนำจานเพาะเชื้อกลับหัวกลับหางในอุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์แบคทีเรียที่ดำรงชีวิต อาณานิคมถูกนับในวุ้นวุ้น เพื่อหาจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิกแบบมีโซฟิลิกและแบบไม่ใช้ออกซิเจนแบบคณะ จำนวนโคโลนีที่โตแล้วคูณด้วยระดับการเจือจางวัฒนธรรมตามสูตร:

โดยที่ x คือจำนวนของจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative

a - จำนวนอาณานิคมที่โตแล้ว

n คือระดับการเจือจาง

หลังจากปลูกในจานเพาะเชื้อที่อุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง จำนวนจุลินทรีย์แอโรบิกแบบมีโซฟิลิกและแบบไม่ใช้ออกซิเจนเชิงคณะ กำหนดโดยวิธีที่ 1 - (8 × 10 5) และวิธีที่ 2 - (7 × 10 5) ไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ

จะเห็นได้จากตัวอย่างที่ระบุว่าในการประเมินเปรียบเทียบของทั้งสองวิธี หมายเลข CFU ที่กำหนดโดยวิธีการที่เสนอไม่แตกต่างอย่างมีนัยสำคัญจากจำนวนที่พิจารณาโดยวิธีที่ยอมรับโดยทั่วไป ในขณะเดียวกัน วิธีการที่พัฒนาขึ้นก็มีข้อดีหลายประการ ดังนั้นเพื่อกำหนดจำนวนเซลล์ที่มีชีวิตสำหรับตัวอย่างห้าประเภทคือ: ตามที่มีอยู่ - 98 นาที; ตามวิธีการที่เสนอ - 48 นาที ค่าใช้จ่ายของสารอาหารเป็นไปตามต้นแบบ - 420 มล. ตามวิธีการที่เสนอ - 135 มล. จำนวนจานเพาะเชื้อเป็นไปตามต้นแบบ - 28 ชิ้น; ตามวิธีการที่เสนอ - 9 ชิ้น

จำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic (KMAFAnM)

การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนเชิงคณะ (QMAFAnM หรือจำนวนจุลินทรีย์ทั้งหมด TMC) หมายถึงการประเมินจำนวนจุลินทรีย์ที่บ่งบอกถึงสุขอนามัย KMAFAnM ประกอบด้วยกลุ่มจุลินทรีย์ต่างๆ ที่จัดหมวดหมู่ตามอนุกรมวิธาน - แบคทีเรีย ยีสต์ รา จำนวนรวมของพวกเขาเป็นเครื่องยืนยันถึงสถานะสุขอนามัยและสุขอนามัยของผลิตภัณฑ์ ระดับของการปนเปื้อนด้วยจุลินทรีย์ อุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับการเจริญเติบโตของ QMAFAnM คือ 35-37 ® C (ภายใต้สภาวะแอโรบิก) ขีด จำกัด อุณหภูมิของการเจริญเติบโตของพวกเขาคือภายใน 20-45 o C จุลินทรีย์ Mesophilic อาศัยอยู่ในร่างกายของสัตว์เลือดอุ่น และยังอยู่รอดในดิน น้ำ อากาศ

ดัชนี QMAFAnM ระบุลักษณะเนื้อหาทั้งหมดของจุลินทรีย์ในผลิตภัณฑ์ การควบคุมในทุกขั้นตอนทางเทคโนโลยีทำให้สามารถติดตามว่าวัตถุดิบที่ "สะอาด" ไปสู่การผลิตได้อย่างไร ระดับของ "ความบริสุทธิ์" เปลี่ยนไปอย่างไรหลังการอบชุบด้วยความร้อน และผลิตภัณฑ์ผ่านการปนเปื้อนซ้ำหลังจากการอบชุบด้วยความร้อน ระหว่างการบรรจุและการเก็บรักษาหรือไม่ ดัชนี QMAFAnM ประเมินโดยจำนวนของจุลินทรีย์ mesophilic aerobic และ aerobic microorganisms ที่เติบโตในรูปแบบของโคโลนีที่มองเห็นได้บนอาหารที่เป็นของแข็งหลังจากการฟักไข่ที่ 37 ° C เป็นเวลา 24-48 ชั่วโมง

QMAFanM คือการทดสอบความปลอดภัยของจุลินทรีย์ที่พบบ่อยที่สุด ตัวบ่งชี้นี้ใช้ทุกที่ในการประเมินคุณภาพของผลิตภัณฑ์ ยกเว้นผลิตภัณฑ์ที่ใช้การเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์พิเศษ (เช่น เบียร์ kvass ผลิตภัณฑ์นมหมัก ฯลฯ) ค่าของตัวบ่งชี้ QMAFAnM ขึ้นอยู่กับหลายปัจจัย สิ่งที่สำคัญที่สุดคือโหมดการรักษาความร้อนของผลิตภัณฑ์, ระบอบอุณหภูมิในระหว่างการขนส่ง, การจัดเก็บและการขาย, ความชื้นของผลิตภัณฑ์และความชื้นสัมพัทธ์ของอากาศ, การปรากฏตัวของออกซิเจน, ความเป็นกรดของ สินค้า ฯลฯ การเพิ่มขึ้นของ QMAFAnM บ่งชี้ถึงการเพิ่มจำนวนของจุลินทรีย์ รวมถึงเชื้อโรคและจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดการเน่าเสียของผลิตภัณฑ์ (เช่น เชื้อรา)

แม้ว่าจำนวนแบคทีเรีย QMAFAnM ทั้งหมดจะไม่สามารถระบุได้โดยตรงว่ามีหรือไม่มีแบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรคในอาหาร แต่ตัวบ่งชี้นี้ค่อนข้างใช้กันอย่างแพร่หลาย ตัวอย่างเช่น ในอุตสาหกรรมนม ตัวบ่งชี้ KMAFAnM (OMP) ระบุลักษณะสภาวะการผลิตและการเก็บรักษาผลิตภัณฑ์นมที่ถูกสุขลักษณะและถูกสุขลักษณะ ผลิตภัณฑ์ที่มีแบคทีเรียจำนวนมาก แม้จะไม่ทำให้เกิดโรคและไม่เปลี่ยนแปลงลักษณะทางประสาทสัมผัสของพวกมัน ก็ถือว่าไม่ครบถ้วนสมบูรณ์ เนื้อหาที่มีนัยสำคัญของเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตในผลิตภัณฑ์อาหาร (ยกเว้นเซลล์ในการผลิตที่ใช้สตาร์ตเตอร์) บ่งชี้ว่ากระบวนการทางความร้อนของวัตถุดิบมีประสิทธิภาพไม่เพียงพอ หรือการทำความสะอาดอุปกรณ์ไม่ดี หรือสภาพการเก็บรักษาที่ไม่น่าพอใจของผลิตภัณฑ์ การปนเปื้อนของแบคทีเรียที่เพิ่มขึ้นของผลิตภัณฑ์ยังบ่งชี้ถึงการเน่าเสียที่อาจเกิดขึ้นได้

สำหรับผู้บริโภค ตัวบ่งชี้ QMAFAnM (OMP) แสดงถึงคุณภาพ ความสด และความปลอดภัยของผลิตภัณฑ์อาหาร ในขณะเดียวกัน การประเมินคุณภาพของผลิตภัณฑ์ตามตัวบ่งชี้นี้เพียงอย่างเดียวก็มีข้อเสียหลายประการ ประการแรก นี่เป็นเพียงการประเมินจุลินทรีย์ทั่วไปในเชิงปริมาณ เนื่องจากการศึกษาไม่ได้คำนึงถึงจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค ประการที่สอง วิธีการนี้ไม่เป็นที่ยอมรับสำหรับผลิตภัณฑ์ที่มีจุลินทรีย์เฉพาะทางเทคโนโลยี

ตัวบ่งชี้ KMAFAnM ยังช่วยให้สามารถประเมินระดับของเงื่อนไขด้านสุขอนามัยและสุขอนามัยในด้านสังคมในการผลิต ซึ่งช่วยให้ตรวจพบการละเมิดระบบการจัดเก็บและการขนส่งของผลิตภัณฑ์

วิธีการตรวจจับ

วิธีคลาสสิค

วิธีการกำหนด QMAFAnM โดยการเพาะเชื้อในอาหารเลี้ยงเชื้อวุ้นจะขึ้นอยู่กับการเพาะเชื้อของผลิตภัณฑ์หรือการเจือจางของผลิตภัณฑ์ในอาหารเลี้ยงเชื้อ การฟักตัวของพืชผล และการนับโคโลนีที่ปลูกทั้งหมด

นอกจากนี้ยังมีวิธีการกำหนด NHF (จำนวนที่น่าจะเป็นไปได้มากที่สุด) QMAFAnM มันขึ้นอยู่กับการหว่านผลิตภัณฑ์และ / หรือการเจือจางของส่วนที่ชั่งน้ำหนักของผลิตภัณฑ์ลงในอาหารที่เป็นของเหลว, ฟักพืชผล, โดยคำนึงถึงสัญญาณที่มองเห็นได้ของการเติบโตของจุลินทรีย์, แทนที่ (ถ้าจำเป็น) ของเหลวเพาะเลี้ยงบนอาหารเลี้ยงเชื้อวุ้น เพื่อยืนยันการเติบโตของจุลินทรีย์ และการนับจำนวนจุลินทรีย์โดยใช้ตาราง NSP

วิธีทางเลือก (แบบเร่ง)

สำหรับการกำหนดอย่างรวดเร็วของ QMAFAnM ในตัวอย่างทดสอบ ขอแนะนำให้ใช้ 3M TM Petrifilm Aerobic Count Plate (AC) Petrifilm 3M TM Petrifilm Aerobic Count Plate (AC) ประกอบด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อสำเร็จรูป เจล (แข็งตัวที่อุณหภูมิห้อง) และตัวบ่งชี้ tetrazolium ซึ่งอำนวยความสะดวกในการนับโคโลนีบน Petrifilm

ข้อบังคับ

อาหารโคเด็กซ์ อาหารที่ถูกสุขลักษณะ. ข้อความพื้นฐาน กฎและข้อบังคับทางเทคนิคระหว่างประเทศที่แนะนำ หลักการทั่วไปของสุขอนามัยอาหาร 2546.

ลักษณะทั่วไปของผลิตภัณฑ์อาหารตาม QMAFAnM

ตัวชี้วัดทางจุลชีววิทยาที่บ่งบอกถึงผลิตภัณฑ์บางชนิด

จำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และ facultative anaerobic (KMAFAnM) การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนเชิงคณะ (QMAFAnM หรือจำนวนจุลินทรีย์ทั้งหมด TMC) หมายถึงการประเมินจำนวนจุลินทรีย์ที่บ่งบอกถึงสุขอนามัย KMAFAnM ประกอบด้วยกลุ่มจุลินทรีย์ต่างๆ ที่จัดหมวดหมู่ตามอนุกรมวิธาน - แบคทีเรีย ยีสต์ รา จำนวนรวมของพวกเขาเป็นเครื่องยืนยันถึงสถานะสุขอนามัยและสุขอนามัยของผลิตภัณฑ์ ระดับของการปนเปื้อนด้วยจุลินทรีย์ อุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับการเจริญเติบโตของ QMAFAnM คือ 35-37оС (ภายใต้สภาวะแอโรบิก); ขีด จำกัด อุณหภูมิของการเจริญเติบโตอยู่ในช่วง20-45ºС จุลินทรีย์ในกลุ่ม Mesophilic อาศัยอยู่ในร่างกายของสัตว์เลือดอุ่น และยังอยู่รอดได้ในดิน น้ำ ในอากาศ ดัชนี QMAFAnM ระบุลักษณะเนื้อหาทั้งหมดของจุลินทรีย์ในผลิตภัณฑ์ การควบคุมในทุกขั้นตอนทางเทคโนโลยีทำให้สามารถติดตามว่าวัตถุดิบที่ "สะอาด" ไปสู่การผลิตได้อย่างไร ระดับของ "ความบริสุทธิ์" เปลี่ยนไปอย่างไรหลังการอบชุบด้วยความร้อน และผลิตภัณฑ์ผ่านการปนเปื้อนซ้ำหลังจากการอบชุบด้วยความร้อน ระหว่างการบรรจุและการเก็บรักษาหรือไม่ ดัชนี QMAFAnM ได้รับการประเมินโดยจำนวนของจุลินทรีย์ mesophilic aerobic และ aerobic microorganisms ที่เติบโตในรูปแบบของอาณานิคมที่มองเห็นได้บนสารอาหารที่เป็นของแข็งหลังจากการฟักไข่ที่37оСเป็นเวลา 24-48 ชั่วโมง แม้ว่าจำนวนแบคทีเรีย QMAFAnM ทั้งหมดจะไม่สามารถระบุได้โดยตรงว่ามีหรือไม่มีแบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรคในอาหาร แต่ตัวบ่งชี้นี้ค่อนข้างใช้กันอย่างแพร่หลาย ตัวอย่างเช่น ในอุตสาหกรรมนม ตัวบ่งชี้ KMAFAnM (OMP) ระบุลักษณะสภาวะการผลิตและการเก็บรักษาผลิตภัณฑ์นมที่ถูกสุขลักษณะและถูกสุขลักษณะ ผลิตภัณฑ์ที่มีแบคทีเรียจำนวนมาก แม้จะไม่ทำให้เกิดโรคและไม่เปลี่ยนแปลงลักษณะทางประสาทสัมผัสของพวกมัน ก็ถือว่าไม่ครบถ้วนสมบูรณ์ เนื้อหาที่มีนัยสำคัญของเซลล์แบคทีเรียที่มีชีวิตในผลิตภัณฑ์อาหาร (ยกเว้นเซลล์ในการผลิตที่ใช้สตาร์ตเตอร์) บ่งชี้ว่ากระบวนการทางความร้อนของวัตถุดิบมีประสิทธิภาพไม่เพียงพอ หรือการทำความสะอาดอุปกรณ์ไม่ดี หรือสภาพการเก็บรักษาที่ไม่น่าพอใจของผลิตภัณฑ์ การปนเปื้อนของแบคทีเรียที่เพิ่มขึ้นของผลิตภัณฑ์ยังบ่งชี้ถึงการเน่าเสียที่อาจเกิดขึ้นได้ ตัวบ่งชี้นี้ไม่ได้ถูกตรวจสอบสำหรับครีมและผลิตภัณฑ์เปรี้ยว คอทเทจชีสและผลิตภัณฑ์ นมเปรี้ยวเหลว โยเกิร์ต

การกำหนดจำนวนแบคทีเรียทั้งหมด

ตัวอย่างการเตรียมการวิจัย... การเจือจางสิบเท่าจัดทำขึ้นจากนมและผลิตภัณฑ์นมอื่น ๆ (ตามวิธีการที่ยอมรับโดยทั่วไป) จำนวนการเจือจางสำหรับผลิตภัณฑ์แต่ละประเภทจัดทำขึ้นโดยคำนึงถึงการปนเปื้อนของจุลินทรีย์ที่เป็นไปได้มากที่สุด (ตารางที่ 56)

ตารางที่ 56. การเจือจางของนมและผลิตภัณฑ์จากนม

บันทึก. ในการกำหนดจำนวนแบคทีเรียทั้งหมด คุณควรเลือกการเจือจางเหล่านั้น เมื่อฉีดวัคซีน อาณานิคมอย่างน้อย 50 และไม่เกิน 300 เติบโตบนจาน

หว่าน... 1 มล. ของการเจือจางแต่ละครั้งจะถูกเพิ่มลงในจานเพาะเชื้อ 2-3 ชิ้นที่ปราศจากเชื้อและ 12-15 มล. ของวุ้นสารอาหารละลายและทำให้เย็นลงถึง 45 ° C ถ้วยมีการติดฉลากไว้ล่วงหน้า ทันทีหลังจากเท เนื้อหาของจานจะถูกผสม (โดยการโยกเบาๆ) เพื่อกระจายวัสดุที่ฉีดวัคซีนอย่างสม่ำเสมอ พืชผลจะถูกวางไว้ในเทอร์โมสตัทที่ 37 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง

เมื่อสิ้นสุดระยะฟักตัว เพลตจะถูกลบออกและนับจำนวนโคโลนีโดยใช้ตัวนับ จำนวนโคโลนีที่ปลูกในแต่ละจานจะคูณด้วยการเจือจางที่เหมาะสม ผลลัพธ์ที่ได้จากอาหารแต่ละจานจะถูกเพิ่มเข้าไป หารด้วยจำนวนจานและได้ค่าเฉลี่ยเลขคณิต ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้จำนวนแบคทีเรียทั้งหมดใน 1 กรัม (มล.)

GOST ที่เกี่ยวข้องจะควบคุมคุณภาพของผลิตภัณฑ์ซึ่งกำหนดขึ้นตามตัวบ่งชี้ที่อนุญาต: จำนวนจุลินทรีย์ทั้งหมดและไตเตรท ตัวอย่างผลิตภัณฑ์สองประเภทแสดงในตาราง 57.

ตารางที่ 57. ตัวชี้วัดจำนวนแบคทีเรียและโคไลไทเตอร์ทั้งหมดในนม

บันทึก. สำหรับผลิตภัณฑ์นมอื่น ๆ ยังมี GOST ที่ระบุปริมาณจุลินทรีย์ที่อนุญาตใน 1 มล. (g) ของผลิตภัณฑ์ ตัวอักษร A และ B แสดงถึงหมวดหมู่ผลิตภัณฑ์

ในผลิตภัณฑ์นมหมัก (kefir, โยเกิร์ต, คอทเทจชีส, ครีม ฯลฯ ) ที่มีจุลินทรีย์จำเพาะจำนวนมาก ไม่ได้กำหนดจำนวนแบคทีเรียทั้งหมด แต่ควบคุมองค์ประกอบของจุลินทรีย์ ด้วยเหตุนี้การเตรียมการจากผลิตภัณฑ์นมหมักและทาด้วยเมทิลีนบลู เฉพาะจุลินทรีย์เฉพาะสำหรับผลิตภัณฑ์นี้เท่านั้นที่ควรอยู่ในมุมมองของยา ตัวอย่างเช่นสำหรับนมเปรี้ยว - กรดแลคติคสเตรปโทคอกคัสและแท่ง; สำหรับ kefir - กรดแลคติกสเตรปโทคอกคัสและแท่งยีสต์เดี่ยว กล้องจุลทรรศน์ช่วยให้คุณตรวจจับจุลินทรีย์ที่เน่าเสียได้ (เชื้อราและยีสต์จำนวนมาก)

นมและผลิตภัณฑ์จากนมเป็นอาหารสัตว์ที่มีคุณค่า อย่างไรก็ตาม ควรจำไว้ว่านมที่ได้จากสัตว์ป่วยอาจเป็นสาเหตุของการติดเชื้อในมนุษย์ด้วยโรคจากสัตว์สู่คน (พบได้บ่อยในมนุษย์และสัตว์) นอกจากนี้ หากละเมิดกฎอนามัยและเทคโนโลยีในการได้มาซึ่ง การแปรรูป และการเก็บรักษา นมอาจทำให้เกิด อาหารเป็นพิษและการติดเชื้อที่เป็นพิษ ...

แหล่งที่มาของการปนเปื้อนเบื้องต้นของผลิตภัณฑ์นมโดยจุลินทรีย์คือนม - วัตถุดิบ จุลินทรีย์เข้าสู่น้ำนมจากสภาพแวดล้อมภายนอกผ่านทางท่อขับถ่าย ถังเก็บน้ำนม และช่องจุกนม จุลินทรีย์ที่ไม่จำเพาะเจาะจงของนมประกอบด้วยแบคทีเรีย ยีสต์ และรา การหว่านของนมที่มีจุลินทรีย์เกิดขึ้นแล้วในระหว่างการรีดนมและความเข้มข้นขึ้นอยู่กับระดับของสุขอนามัยในฟาร์ม คุณภาพของการล้างและการฆ่าเชื้อของอุปกรณ์รีดนม พบจุลินทรีย์จำนวนมากบนผิวหนังของสัตว์ จุลินทรีย์บนผิวหนังมาจากอาหาร เครื่องนอน มูลสัตว์ อากาศ

สภาพการเก็บน้ำนมไม่ดีมีส่วนทำให้เกิดการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ในนม นมสด นมสดฆ่าเชื้อแบคทีเรีย กล่าวคือ ความสามารถในการชะลอการเพิ่มจำนวนของแบคทีเรียที่เข้าสู่น้ำนมและแม้กระทั่งฆ่าพวกมัน เพื่อรักษาคุณสมบัติในการฆ่าเชื้อแบคทีเรียของนมสด ให้เย็นลง ที่อุณหภูมิ +30 ° C กิจกรรมฆ่าเชื้อแบคทีเรียเป็นเวลา 3 ชั่วโมง ที่ +15 ° C - ประมาณ 8 ชั่วโมง ที่ +10 ° C - ประมาณ 24 ชั่วโมง นมจะเย็นลงทันทีหลังจากการรีดนมและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ +2 ถึง +6 ° C จนกว่าจะส่ง ในระหว่างการเก็บรักษาคุณสมบัติต้านจุลชีพของนมจะหายไปและหากไม่ปฏิบัติตามกฎการเก็บรักษาจะมีการสร้างเงื่อนไขสำหรับการพัฒนาจุลินทรีย์ที่ไม่ต้องการซึ่งเป็นผลมาจากการที่ผลิตภัณฑ์เสื่อมสภาพ

จุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคสามารถป้อนนมได้ในระหว่างการผลิตและการขนส่งจากสิ่งแวดล้อม หรือสามารถบรรจุในนมของสัตว์ป่วยได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งจุลินทรีย์หลายชนิดที่พบในนมของสัตว์ที่เป็นโรคเต้านมอักเสบ (staphylococci, streptococci เป็นต้น) จุลินทรีย์สามารถป้อนนมผ่านอากาศและผ่านการสัมผัสของสัตว์ป่วยที่เป็นวัณโรค เชื้อ Salmonellosis ฯลฯ ดังนั้น นอกจากโปรตีน ไขมัน และความเป็นกรดแล้ว เมล็ดแบคทีเรีย (หรือ KMAFAnM) จึงเป็นหนึ่งในตัวชี้วัดที่สำคัญที่สุดของคุณภาพและความปลอดภัยของนม

นมที่ดีมีปริมาณแบคทีเรียต่ำตามลำดับ อย่างไรก็ตาม ต้องจำไว้ว่าน้ำนมดิบไม่สามารถผลิตเมล็ดพันธุ์เป็นศูนย์ได้ นมเป็นผลิตภัณฑ์ที่มีชีวิตซึ่งได้มาจากสัตว์ และแบคทีเรียเป็นส่วนประกอบสำคัญของสิ่งมีชีวิตใดๆ และด้วยเหตุนี้ ผลิตภัณฑ์จากกิจกรรมที่สำคัญของมัน นมที่มีแบคทีเรียจำนวนมาก แม้จะไม่ทำให้เกิดโรคและไม่เปลี่ยนแปลงลักษณะทางประสาทสัมผัส ก็ถือว่าสมบูรณ์ไม่ได้ การปนเปื้อนของแบคทีเรียที่เพิ่มขึ้นของผลิตภัณฑ์บ่งชี้ถึงการเพิ่มจำนวนของจุลินทรีย์ รวมถึงจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคที่ทำให้ผลิตภัณฑ์เน่าเสีย จุลินทรีย์ในระดับสูงอาจทำให้เกิดอาหารเป็นพิษโดยมีอาการท้องร่วงและกระเพาะและลำไส้อักเสบ

ข้อกำหนดสำหรับน้ำนมดิบในแง่ของการปนเปื้อนของแบคทีเรียนั้นกำหนดโดยเอกสารกำกับดูแลของสหพันธรัฐรัสเซียและกฎระเบียบทางเทคนิคของสหภาพศุลกากร ปริมาณแบคทีเรียในเมล็ดของนมคือเนื้อหาเชิงปริมาณของแบคทีเรียในน้ำนมดิบ 1 ซม.³ ตัวชี้วัดทางจุลชีววิทยาของนมโดย TMC (จำนวนจุลินทรีย์ทั้งหมด) หรือ KMAFAnM (จำนวนจุลินทรีย์แอโรบิก mesophilic และจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจนทางปัญญา) ต้องเป็นไปตามข้อกำหนดของกฎระเบียบทางเทคนิคของสหภาพศุลกากร "เกี่ยวกับความปลอดภัยของนมและผลิตภัณฑ์นม" (TR TS 033/2013) ลงวันที่ 09.10.2013 และไม่เกิน 5.0 × 10 5 (500,000) CFU / cm³

การปนเปื้อนของแบคทีเรียในนมที่เก็บเกี่ยวถูกกำหนดโดยใช้การทดสอบรีดักเตส วิธีการนี้ขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่าเอนไซม์รีดักเตสที่หลั่งโดยจุลินทรีย์ในน้ำนมจะเปลี่ยนสีย้อมเมทิลีนบลู มีการสร้างความสัมพันธ์ระหว่างปริมาณจุลินทรีย์และอัตราการเปลี่ยนสีของนมที่เติมเมทิลีนบลู ยิ่งอัตราการเปลี่ยนสีสูงเท่าใด จำนวนจุลินทรีย์ในน้ำนมก็จะยิ่งมากขึ้นเท่านั้น คุณภาพของนมก็จะยิ่งแย่ลง

ในห้องปฏิบัติการทดสอบตาม GOST 32901-2014“ นมและผลิตภัณฑ์จากนม วิธีการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา " เพื่อตรวจสอบการปนเปื้อนแบคทีเรียของน้ำนมดิบเป็นวิธีการอนุญาโตตุลาการ ใช้วิธีการจานมาตรฐานของการฉีดวัคซีนการเจือจางของนมดั้งเดิมบนอาหารที่เป็นของแข็งตามด้วยการเพาะเลี้ยง 72 ชั่วโมงที่ 30 ± 1 ° C และการนับโคโลนีของหน่วยองค์ประกอบ mesophilic (CFU) จุลินทรีย์แอโรบิกและจุลินทรีย์แบบไม่ใช้ออกซิเจน (KMAFAnM)

ดังนั้น การกำหนด QMAFAnM ในนมจึงบ่งบอกถึงสถานะสุขอนามัยและสุขอนามัยของผลิตภัณฑ์ ระดับของการปนเปื้อนด้วยจุลินทรีย์ ทำให้สามารถตัดสินสุขภาพของสัตว์ สภาพของเต้านม ประสิทธิผลของการทำความสะอาดและการฆ่าเชื้ออุปกรณ์ การปฏิบัติตามเงื่อนไขการผลิตที่ถูกสุขลักษณะและสุขอนามัยส่วนบุคคลของคนงาน เกี่ยวกับ เงื่อนไขการจัดเก็บ การขนส่งผลิตภัณฑ์สำเร็จรูป ดังนั้น ตัวบ่งชี้นี้จึงเป็นมาตรฐานสำหรับผลิตภัณฑ์นมทั้งหมด ยกเว้นผลิตภัณฑ์ที่ผลิตโดยใช้จุลินทรีย์ที่มีประโยชน์ทางเทคนิค (จุลินทรีย์ในการเพาะเลี้ยงเชื้อเริ่มต้น)

เซลล์โซมาติกเป็นองค์ประกอบถาวรของนมและแสดงโดย: เซลล์เยื่อบุผิวของเยื่อเมือกของต่อมน้ำนม ถุงลม และท่อน้ำนมขนาดเล็ก ซึ่งเป็นเซลล์กลมขนาดใหญ่ (ขนาดตั้งแต่ 12 ถึง 100 ไมครอนขึ้นไป) มักจะอยู่ในรูปแบบ ของกลุ่มหรือชั้น มักจะอยู่ในรูปของเซลล์เดียว; เซลล์เยื่อบุผิวเสื่อมรูปร่างไม่แน่นอนของโครงสร้างที่ถูกทำลาย เซลล์เม็ดเลือด: เม็ดเลือดขาว (ส่วนใหญ่เป็นลิมโฟไซต์ นิวโทรฟิล อีโอซิโนฟิล ฯลฯ) และเม็ดเลือดแดง เป็นที่ทราบกันดีอยู่แล้วว่าโซมาติกเซลล์ในนมที่รีดนมไม่เพิ่มจำนวน (ต่างจากแบคทีเรีย)

องค์ประกอบทางสัณฐานวิทยาและเซลล์วิทยาและเนื้อหาเชิงปริมาณของเซลล์โซมาติกในนมของสัตว์แต่ละตัวนั้นแตกต่างกันไปตามปัจจัยต่างๆ: อายุของสัตว์ (ในนมของโคสาวลูกแรกมีเซลล์โซมาติกน้อยกว่าโคที่มีจำนวนมาก ของการให้นม) ระยะเวลาการให้นม (ในนมของวัวที่มีสุขภาพดีจำนวนเซลล์โซมาติกขั้นต่ำคือเซลล์จะถูกสังเกตเป็นเวลา 2 - 6 เดือนการให้นมและเพิ่มขึ้น - ในช่วงน้ำนมเหลืองเมื่อสิ้นสุดการให้นมบุตรและในช่วงเริ่มต้น ระยะเวลาขึ้น) สายพันธุ์และลักษณะเฉพาะของสัตว์ตลอดจนสถานะสุขภาพของสัตว์ (โดยเฉพาะจากสถานะของเต้านม) ระดับและรูปแบบการให้อาหาร ฯลฯ ...

เนื้อหาของเซลล์โซมาติกเป็นตัวบ่งชี้ที่สำคัญของความปลอดภัยของนมและแสดงความเหมาะสมสำหรับการประมวลผล การปรากฏตัวของเซลล์โซมาติกจำนวนมากในนมทำให้ตัวบ่งชี้คุณภาพลดลงอย่างมาก: สูญเสียประโยชน์ทางชีวภาพและคุณสมบัติทางเทคโนโลยีลดลงระหว่างการประมวลผล นอกจากนี้ความเป็นกรดของนมลดลงมีการสูญเสียไขมันเคซีนแลคโตส นมจะทนความร้อนได้น้อยลง จับตัวเป็นก้อนแย่ลงด้วย rennet และการพัฒนาของแบคทีเรียกรดแลคติกที่เป็นประโยชน์จะช้าลง เป็นไปไม่ได้ที่จะสร้างผลิตภัณฑ์ที่มีคุณภาพจากนมดังกล่าว (ชีส, คอทเทจชีส, โยเกิร์ต, kefir, ฯลฯ ) เซลล์โซมาติกไม่เพียงส่งผลต่อคุณภาพของนมเท่านั้น แต่ยังส่งผลต่อผลผลิตของวัวด้วย

ตั้งแต่วันที่ 1 กรกฎาคม 2017 เนื้อหาของเซลล์โซมาติกในน้ำนมดิบไม่ควรเกิน 7.5 × 10 5 ใน 1 cm3 ในขณะที่น้ำนมดิบสำหรับผลิตอาหารทารก ชีส และนมฆ่าเชื้อ - ไม่เกิน 5 × 10 5 เซลล์ใน 1 cm3

มันสำคัญมากที่จะต้องกำหนดเนื้อหาของเซลล์โซมาติกในนมได้อย่างง่ายดายและรวดเร็ว วิธีการทางตรงและทางอ้อมตามการกำหนดจำนวนเซลล์โซมาติกใช้เพื่อระบุสิ่งเจือปนของนมเต้านมอักเสบในวัตถุดิบที่เตรียมไว้ วิธีการทางอ้อมสำหรับกำหนดจำนวนเซลล์โซมาติกในนมรวมถึงวิธีการตรวจหาเมื่อทำปฏิกิริยากับรีเอเจนต์จำนวนหนึ่ง ปัจจุบันการกำหนดจำนวนเซลล์โซมาติกในนมนั้นควบคุมโดย GOST 23453-2014“ น้ำนมดิบ วิธีการกำหนดเซลล์โซมาติก "และดำเนินการโดยใช้ยาวินิจฉัยเช่น" Mastoprim "โดยวิธีการมองเห็นและการใช้เครื่องวัดความหนืด มาตรฐานนี้ได้รับการพัฒนาโดยสถาบันวิทยาศาสตร์แห่งรัฐ VNIIMS ของสถาบันการเกษตรแห่งรัสเซีย

วิธีการนี้ขึ้นอยู่กับผลของซัลฟานอล (สารลดแรงตึงผิวที่เป็นส่วนหนึ่งของการเตรียม Mastoprim) ต่อเยื่อหุ้มเซลล์ของเซลล์โซมาติก ซึ่งนำไปสู่การละเมิดความสมบูรณ์และการปล่อยเนื้อหาเซลล์ออกสู่สิ่งแวดล้อมภายนอก ในกรณีนี้ความหนืด (ความสม่ำเสมอ) จะเปลี่ยนไปซึ่งถูกบันทึกด้วยสายตาหรือด้วยเครื่องวัดความหนืด สำหรับการวิเคราะห์นั้น เพลต PMK-1 จะใช้กับการประเมินด้วยสายตาในภายหลังหรือเครื่องวัดความหนืดแบบคาปิลลารี ซึ่งปรับเทียบโดยผู้ผลิตอุปกรณ์เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์โซมาติกในน้ำนมดิบ

การประเมินด้วยสายตาทำได้ง่ายมาก แต่ไม่สามารถหาตัวบ่งชี้ทางดิจิทัลเฉพาะเกี่ยวกับจำนวนเซลล์โซมาติกในนมได้ โดยการประเมินด้วยสายตา เราสามารถกำหนดขอบความปลอดภัยตามคำแนะนำสำหรับรีเอเจนต์เท่านั้น

ในห้องปฏิบัติการของเรา กำหนดเนื้อหาของเซลล์โซมาติกในนมโดยใช้เครื่องวัดความหนืด Somatos-V.2K ขั้นตอนการกำหนดมีดังนี้: 5 มล. ของสารละลายของการเตรียม Mastoprim และ 10 มล. ของน้ำนมดิบที่วิเคราะห์แล้วจะถูกถ่ายด้วยปิเปตและนำเข้าไปในขวดของเครื่องวัดความหนืด น้ำนมดิบที่วิเคราะห์แล้วจะต้องผสมให้ละเอียดก่อนสุ่มตัวอย่าง และหากจำเป็น ให้ทำความสะอาดจากสิ่งเจือปนทางกล ผสมส่วนผสมของน้ำนมดิบที่วิเคราะห์แล้วกับสารละลายของการเตรียม Mastoprim ในขวดของเครื่องวัดความหนืด กวนเป็นเวลา (30 ± 10) วินาทีในโหมดแมนนวลหรืออัตโนมัติ ในตอนท้ายของการผสม จำนวนเซลล์โซมาติกในน้ำนมดิบที่วิเคราะห์จะกำหนดโดยเวลาที่ส่วนผสมไหลออกจากเส้นเลือดฝอย ระยะเวลาของการไหลออกจะถูกกำหนดโดยความหนืดของส่วนผสมของน้ำนมดิบกับสารละลายของการเตรียม Mastoprim ซึ่งสัมพันธ์กับเนื้อหาเริ่มต้นของเซลล์ร่างกายในนั้น ช่วงของการกำหนดจำนวนเซลล์โซมาติกเมื่อใช้เครื่องวัดความหนืดของเส้นเลือดฝอยอยู่ที่ 90 ถึง 150,000 ในน้ำนมดิบ 1 cm3 และระยะเวลาของส่วนผสมที่ไหลออกจากเส้นเลือดฝอยมีตั้งแต่ 12 ถึง 58 วินาที

ค่า Viscometer ที่อ่านได้น้อยกว่า 90,000 ใน 1 cm3 บ่งบอกถึงการปลอมแปลงน้ำนมดิบทั้งโดยสารเคมีและการสัมผัสกับอุณหภูมิ:

การเพิ่มไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ยูเรียโซดาและสารอื่น ๆ ที่ใช้ในการปลอมแปลงตัวบ่งชี้บางอย่างของน้ำนมดิบเป็นนมทำให้ค่าความหนืดลดลงตามสัดส่วนโดยตรงขึ้นอยู่กับความเข้มข้น

การให้ความร้อนนมจนถึงอุณหภูมิของการให้ความร้อนหรือการพาสเจอร์ไรส์ทำให้เกิดความผิดปกติในการอ่านค่าของอุปกรณ์และเครื่องวัดความหนืดจะแสดงค่าน้อยกว่า 90,000 เซลล์ในนม 1 ซม. 3 โดยไม่คำนึงถึงเนื้อหาที่แท้จริง

ต้องคำนึงถึงคุณสมบัติเหล่านี้เมื่อวิเคราะห์ผลลัพธ์ที่ได้รับ

เนื้อหาของเซลล์ร่างกายเป็นตัวบ่งชี้ทางอ้อมที่สำคัญที่สุดของสุขภาพเต้านมเนื่องจากในระหว่างกระบวนการอักเสบในนมจำนวนเซลล์เม็ดเลือดโดยเฉพาะเม็ดเลือดขาวและนิวโทรฟิลิกแกรนูโลไซต์เพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว กระบวนการอักเสบเป็นสาเหตุของการพัฒนาของโรคเต้านมอักเสบแบบไม่แสดงอาการ ด้วยโรคเต้านมอักเสบแบบไม่แสดงอาการ ไม่พบอาการอักเสบที่มองเห็นได้ในเต้านม แต่เนื้อหาของเซลล์ร่างกายในนมเพิ่มขึ้น ดังนั้นการเปลี่ยนแปลงองค์ประกอบทางเคมีของนมจึงมักเป็นหลักฐานของโรคเต้านมอักเสบชนิดเดียวกัน สาเหตุที่พบบ่อยที่สุดของโรคเต้านมอักเสบแบบไม่แสดงอาการ ได้แก่ สเตรปโทคอกคัสและสแตฟฟิโลคอคซี โรคเต้านมอักเสบแบบไม่แสดงอาการสามารถอยู่ได้นาน ทำให้เกิดอันตรายถาวรต่อสุขภาพของเต้านมและฟาร์ม (ผลผลิตลดลง ราคาของนมลดลง) และยังอาจกลายเป็นโรคเต้านมอักเสบทางคลินิกได้อีกด้วย

นอกจากนี้ยังมีปัจจัยอื่นๆ ที่ส่งผลต่อเนื้อหาของเซลล์โซมาติกในนม เช่น ข้อผิดพลาดระหว่างการรีดนม ข้อบกพร่องในอุปกรณ์รีดนม สุขอนามัยไม่เพียงพอ ข้อผิดพลาดในการรักษา ข้อผิดพลาดในการป้อนนม เป็นต้น

โดยสรุป ฉันต้องการนำเสนอตัวเลขบางส่วน: ตั้งแต่ต้นปีนี้ ห้องปฏิบัติการสัตวแพทย์ของภูมิภาคได้ตรวจสอบตัวอย่างนมวัวดิบจากฟาร์มมากกว่า 1,500 ตัวอย่าง โดยมีเพียง 7 ตัวอย่างเท่านั้นที่ถูกปฏิเสธตาม "KMAFAnM" และ ตัวชี้วัด "เนื้อหาของเซลล์ร่างกาย" สิ่งนี้บ่งบอกถึงคุณภาพที่ดีของนมที่จำหน่ายโดยผู้ผลิตทางการเกษตรในภูมิภาคของเรา