I 1 prøve av lett unpasteurisert øl ble BGKP detektert;
- i 1 prøve av fisk x \\ k - overskudd av QMAFAnM;
- i 3 prøver av luft fra kjølekammeret - det ble oppdaget overskytende CFU av mugg - sanitær vurdering "dårlig";
- i 4 prøver av tørket fisk ble det funnet overflødig CFU av mugg;
- i 4 prøver av tørket fisk ble det funnet et overskudd av CMAFAnM;
- I 5 prøver av drikkevann (Artesian vann helles gjennom et nettverk av automatiske maskiner for tapping av vann i en beholder av forbrukere) - overskudd av TBC.

Bestemmelsen av antall mesofile aerobiske og eventuelt anaerobe mikroorganismer (CMAFAnM eller totalt mikrobielt tall, TBC) refererer til estimeringen av antall sanitære indikative mikroorganismer. Som en del av KMAFAnM er ulike taksonomiske grupper av mikroorganismer representert - bakterier, gjær, muggsvampe. Deres totale antall vitner til hygienisk og hygienisk tilstand av produktet, graden av dens forurensning med mikroflora. Den optimale temperaturen for veksten av KMAFanM 35-37oC (under aerobiske forhold); Temperaturgrensen for veksten ligger i området 20-45 ° C. Mesofile mikroorganismer lever i kroppen av varmblodige dyr, og overlever også i jord, vann, luft. Indikatoren KMAFAnM beskriver det totale innholdet av mikroorganismer i produktet. Kontrollen i alle teknologiske faser gjør det mulig å spore hvordan "rene" råvarer leveres til produksjonen, hvordan graden av "renhet" endres etter varmebehandling, og om produktet gjennomgår gjentatt forurensning etter varmebehandling, under emballasje og lagring. KMAFAnM estimeres av antall mesofile aerob og eventuelt anaerobe mikroorganismer dyrket som synlige kolonier på fast næringsmedium etter inkubering ved 37 ° C i 24-48 timer.

QMAFAnM er den vanligste testen for mikrobiell sikkerhet. Denne indikatoren brukes overalt for å vurdere kvaliteten på produktene, med unntak av de i produksjonen der spesielle mikrobielle kulturer brukes (for eksempel øl, kvass, meieriprodukter, etc.). Verdien av KMAFAnM avhenger av mange faktorer. Det viktigste er modusen for varmebehandling av produktet, temperaturregimet i løpet av transport, lagring og salg, produktets fuktighet og luftens relative fuktighet, oksygeninnholdet, produktets surhet og så videre. Økningen i CMAFAnM indikerer multiplikasjon av mikroorganismer, blant hvilke kan være patogener og mikroorganismer som forårsaker skade på produktet (for eksempel mold).

Selv om det totale antall bakterier KMAFanM ikke direkte kan indikere tilstedeværelse eller fravær av patogene bakterier i matvarer, er denne indikatoren mye brukt, for eksempel i meieriindustrien. Indikatoren KMAFAnM (TBC) karakteriserer hygieniske og hygieniske produksjons- og lagringsforhold for meieriprodukter. Produkter som inneholder et stort antall bakterier, ikke-patogene og organoleptiske indikatorer som ikke endrer dem, kan ikke anses som komplette. Det betydelige innholdet av levedyktige bakterieceller i matvarer (med unntak av de som brukes til produksjon av startkulturer) indikerer enten utilstrekkelig effektiv varmebehandling av råmaterialene, dårlig vasking av utstyr eller utilfredsstillende lagringsforhold for produktet. Økt bakteriell forurensning av produktet indikerer også mulig skade.

For forbrukeren karakteriserer indikatoren KMAFAnM (TBC) kvaliteten, friskheten og sikkerheten til maten. Samtidig har vurderingen av kvaliteten på produktet kun for denne indikatoren flere ulemper. For det første er det bare en generell, kvantitativ vurdering av mikroorganismer, siden studien ikke tar hensyn til patogene, betinget patogene, psykofile og termofile mikroorganismer. For det andre er metoden uakseptabel for produkter som inneholder teknologisk og spesifikk mikroflora.

KMAFAnM-indikatoren gjør det også mulig å vurdere nivået på hygieniske og hygieniske forhold i sosial sfære på arbeidsplassen, og det gjør det mulig å oppdage brudd på lagringsmodusene og transporten av produktet.

Ifølge indikatoren KMAFAnM

Men kvalitetsvurderingen for denne indikatoren har flere ulemper:

Anaerobiske mikroorganismer er ikke tatt i betraktning;

Psykrofile og termofile mikroorganismer er ikke tatt i betraktning;

Gir bare en kvantitativ vurdering av mikrobiotaen;

Tar ikke hensyn til patogene mikroorganismer;

Ikke anvendelig for produkter som inneholder teknologisk mikrobiota.

2. Sanitære mikroorganismer:

Bakterier av Enterobacteriaceae familien;

Enterokokker.

Deteksjon av sanitær-indikative mikroorganismer i ethvert objekt indikerer dens forurensning ved human- eller dyrsekretjoner og mulig tilstedeværelse av patogene mikroorganismer epidemiologisk forbundet med det tilsvarende ekskreta.

Påvisning av colibacillus gruppe bakterier (CGV). Deres tilstedeværelse indikerer fekal forurensning av gjenstanden. Kvantitative verdier av denne indikatoren karakteriserer graden av denne forurensningen. I mat kan BGKP få med vann, støv, gjennom skitne hender, bli båret av insekter.

Ved standarder inngår bakterier av familien Enterobacteriaceae i antall sanitære indikative mikroorganismer. Mange arter av ikke-patogene, betinget patogene og patogene mikroorganismer tilhører denne familien, og det er derfor påvist at bakterier av ikke-patogene arter i 1g (cm3) av et produkt som er over 10 2 CFU, viser den potensielle epidemiologiske risikoen.

Tilstedeværelsen av enterokokker i miljøet og maten, og spesielt E. faecalis, indikerer fersk fekal forurensning. Vanligvis viser deres gjenkjenning i ferdige produkter brudd på de teknologiske produksjonsmodi.

3. Ubetingede patogene mikroorganismer:

Escherichia coli;

Staphylococcus aureus;

Bakterier av slekten Proteus;

Bacillus cereus;

Sulfitt-reduserende clostridia;

Vibrio parahaemolyticus.

E. coli (Escherichia coli) har en dobbelt betydning som en hygienisk indikativ og betinget patogen mikroorganisme.

Koagulase-positiv Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) er definert som en potensielt farlig mikroorganisme i varmebehandlede produkter. En økt mengde av det i mat er et tegn på sekundær sådd av sistnevnte. Mikroorganismen går inn i produkter fra forurenset utstyr, inventar, hud, nasopharynx, og også fra syke dyr. Staphylococcus er preget av resistens mot uønskede miljøfaktorer, de multipliserer intensivt ved en temperatur på 18 ÷ 20ºÑ, og sakte - ved 5 ÷ 6ºі. Kan reproducere i konsentrerte sukkeroppløsninger (opptil 60%) og salt (opp til 12-14%). Opprettholde levedyktighet i 6 måneder i tørket tilstand. Reproduksjon av Staphylococcus aureus i matvarer fra 10 6 til 10 9 CFU / g (cm 3), uavhengig av den første forurensningen, fører til akkumulering av enterotoxin.

Av bakteriene av slekten Рroteus er to arter av P. vulgaris og P. mirabilis årsaksmessige midler for toksikosinfeksjoner.

Voksstangen (bacillus cereus) er ekstremt utbredt i naturen, dens jord er dens viktigste habitat. Det finnes også i vannet i åpne reservoarer (opptil 10 3 ÷ 10 4 CFU / cm 3), i kranvann og i luften. Disse anleggene fungerer som en kilde til forurensing av utstyr og apparater fra næringsmiddelindustrien og cateringvirksomheten og sådd av en rekke matvarer. Når B. cereus oppdages i en mengde på mer enn 10 3 CFU / g (cm 3) og i fravær av en patogen mikrobiota, kan denne mikroorganismen betraktes som årsaken til matforgiftning.

Sulfittreduserende clostridier er spordannende anaerobe bakterier, hovedsakelig C. perfringens og C. sporogenes. C. perfringens er stadig tilstede i tarmene hos mennesker og dyr og er en indikator for fekal forurensning. Tilstedeværelsen av sulfittreduserende clostridia i produkter i mengder over 10 2 CFU / g (cm 3) indikerer brudd på hygienisk og hygienisk regime på arbeidsplassen, særlig dårlig forberedelse av utstyr, inntrenging av jord, skittent vann mv. , til mulig trussel om tilstedeværelsen av C.botulinum.

I jorda finnes støv av C. perfringens lokaler i nesten 100% av de undersøkte prøvene, i cateringvirksomhetene i 10-12% av tilfellene, i cateringavdelingsutstyr - i nesten 30% av tilfellene, og i sanitære klær til cateringarbeidere - 11 ÷ 19% av tilfellene . På matvarer C. perfringens finnes spesielt ofte i kjøtt og kjøttprodukter, som er mest involvert i utbrudd av matbårne infeksjoner. I tillegg til in vivo sådd av animalsk vev og organer kan det forekomme forurensning under slakting, kjøtthakking, tilsetning av breading og krydder, ofte med høy grad av sådd. I ferd med kulinarisk behandling overlever C. perfringens sporer og kan spire og formere seg til enorme mengder som kan forårsake matforgiftning. Spores av C. perfringens kan også inneholde urteprodukter. Et kritisk nivå av forurensing av matvarer med C. perfringens sporer anses å være ≥ 10 5 CFU / g (cm 3).

Parahemolytiske eller halofile vibrioer (Vibrio parahaemolyticus) er vidt distribuert i det ytre miljø, hovedsakelig i kystvann, marin fisk og sjømat, i bunnsjøseder. En av representantene til slekten Vibrio, inkludert ca. 45 arter, V. Parahaemolyticus, var årsaken til utbrudd av gastroenteritt i forbindelse med bruk av forurenset sjømat - frossen, saltet, røkt fisk, skalldyr. Sirkulasjonen av denne mikroorganismen i henhold til sjøvann - fisk - mann - kloakk - sjøvannskjema er etablert.

4. Patogene mikroorganismer:

salmonella;

Listeria monocytogenes;

Bakterier av slekten Yersinia.

Bakterier av slekten Salmonella er for tiden anerkjent som indikator for hele gruppen av patogene intestinale bakterier. Dette skyldes for det første tilstedeværelsen av effektive metoder for deres påvisning, og for det andre at deteksjonen av salmonella til en viss grad tilsvarer deteksjon av Shigella i samme gjenstand, som er mye vanskeligere å systematisk identifisere enn Salmonella.

Foreløpig regulerte dokumenter standard mengden av produktet i g (cm 3), hvor forekomsten av bakterier av slekten Salmonella er uakseptabel.

Bakterier av slekten Yersinia, og spesielt Y. sterocolitica, er årsakene til smittsomme sykdommer med en rekke kliniske manifestasjoner. Yersinioses er ofte feilaktig diagnostisert som enterocolitt, mat toxicoinfeksjon, scarlet feber, rubella, hepatitt, blindtarmbetennelse, revmatisme, akutt respiratorisk sykdom, etc.

Muligheten til å multiplisere ved en temperatur på 0 ÷ 5ºї i kjølekamre, grønnsakshus, etc., fører til en økning i antall på forurensede produkter. Yersinia krever ikke miljømessige forhold og reproduserer aktivt i jord og vann. De viktigste bærerne av disse mikroorganismer er vilt gnagere og fugler. Den viktigste metoden for menneskelig infeksjon er mat. Infeksjon overføres via forurenset matvare, oftere med jord og vannforurensning, mindre ofte med dyrsekretjoner. Ofte stammer enkelt sykdommer og gruppeproblemer fra forbruket av smittede meieriprodukter og grønnsaker - kål, gulrøtter, løk, etc.

Listeria monocytogenes er forårsaket av en farlig smittsom sykdom av zoonotisk natur med en overveiende matrute for overføring. Patogen listeria er vidt distribuert i naturen og kan forurense en rekke produkter - meieri, kjøtt, fisk, egg, sjømat, plantemateriale, etc. Reguleringsdokumenter fastlegger mengden eller volumet av produktet der disse bakteriene skal være fraværende.

5. Forurensnings mikroorganismer inkluderer:

Mold sopp;

Melkesyrebakterier.

Regulatoriske dokumenter fastsatte kvantitative kriterier for innholdet i enkelte matgrupper. Men listen over denne gruppen av mikroorganismer synes å være ufullstendig. Således er betydningen av putrefaktive bakterier av slekten Pseudomonas som forårsakende agenter for ødeleggelse vist. Den mikrobiologiske stabiliteten til mat under lagring må også vurderes ved hjelp av indikatorer som QMAFAnM, termofile og psykofile mikroorganismer, samt spesielle arter (eller slanger) av mikroorganismer som er typiske årsaksmessige midler for ødeleggelse. For eksempel bestemmer i antall produkter som er beregnet til oppbevaring ved en temperatur på mer enn 30 ° C ± 5 ° C antall termofiler; for lagring ved uregulert temperatur på 20ºСº 5ºї КМАФАнМ; for lagring ved lav temperatur - antall psykofiler.

6. Mikroorganismer starter mikrobiota og probiotiske mikroorganismer:

Melkesyre og propionsyrebakterier;

bifidobakterier;

Mikroorganismer av starter mikrobiota og probiotiske mikroorganismer (for produkter med normalisert nivå av bioteknisk mikrobiota) er inkludert i standardindikatorene. Disse indikatorene inkluderer indikatorer for kvantitativt innhold av melkesyre, propionsyrebakterier, gjær, bifidobakterier og andre. Verdiene av disse indikatorene bestemmes av spesifikasjonene for produksjonen av et bestemt produkt og dets formål.

Test spørsmål:

1. Hvilket dokument regulerer kriteriene for matkvalitet og metoder for å bestemme dem?

2. Hva er det grunnleggende prinsippet i HACCP-kvalitetskontrollsystemet?

3. Oppgi hovedbestemmelsene i HACCP-kontrollsystemet.

4. Det grunnleggende prinsippet i det internasjonale systemet for å vurdere kvaliteten på produksjonen i henhold til ISO-standarder?

5. Hvilke farer inngår i listen over obligatoriske? Hvor er de oppført?

Oppfinnelsen vedrører mikrobiologi, nemlig definisjonen av forurensning av mat. Metoden inkluderer å forberede kjøttpeptonagar, spyle den i petriskål, prøve mat, tilberede en suspensjon fra en prøve av mat, forberede desimalfortynninger av testopphenget og plassere desimalfortynninger av testopphenget i petriskål, dyrke og telle antall kolonier i henhold til formelen: x = an × 10, n er graden av fortynning. Videre, for fremstilling av desimalfortynninger av prøvesuspensjonen, anvendes en 0,6-0,8% løsning av kjøttpeptonagar, mens desimalfortynninger av forsøkssuspensjonen plasseres på membranfiltre plassert på overflaten av kjøttpeptonagar i en petriskål. Metoden er original i løsningen, enkel å implementere, informativ, gir statistisk pålitelige resultater; gjør det mulig å redusere forbruket av næringsmedier, sterile bakteriologiske retter og analysetid betydelig; lar deg gi en ekte kvantitativ vurdering av innholdet i mikroorganismer som produserer sammenflyttende vekst og danner svært små kolonier, og lar deg også studere intrapopulasjonsprosesser ved hjelp av lysmikroskopi. 1 ill., 1 fan.

Oppfinnelsen vedrører området veterinær-sanitær undersøkelse, sanitet og mikrobiologi, nemlig definisjonen av forurensning av matvarer og hygienisk tilstand av miljøobjekter.

Det nærmeste er metoden for å bestemme antall mikroorganismer i pølser og kjøttprodukter i vann. En kjent metode for å bestemme mengden mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer i 1 g av produktet er som følger: Fremstilling av en oppløsning for fortynning og kjøttpeptonagar for såing; analyse; regnskapsføring av resultater. 1. Ulempen med den eksisterende metoden er at natriumkloridoppløsningen som brukes (0,85%) til avlprøver, er ubuffert og isotonisk bare med hensyn til pattedyrceller, og en stor mengde næringsmedium, bakteriologiske redskaper og arbeidskostnader brukes til analyse. av tiden. I tillegg tillater denne metoden ikke å gi en reell kvantitativ vurdering av innholdet i mikroorganismer som gir sammenflyttende vekst og danner svært små (rosenkolonier). (Metoder for generell bakteriologi. Redigert av F. Gerhard et al., M.: Mir, 1983, s. 442-512).

Formålet med oppfinnelsen er å redusere mengden næringsmedium, bakteriologiske redskaper og arbeidstid ved å benytte en fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA i stedet for 0,85% natriumkloridoppløsning, etterfulgt av såing en dråpe fortynnet prøvesuspensjon på overflaten av et membranfilter.

Anvendelsen av denne metoden er basert på det faktum at en fysiologisk oppløsning av halvflytende kjøttpeptonagar (0,6-0,8%), bestående av 1 dm 3 destillert vann, 10 g pepton, 5 g natriumklorid, anvendes som en fysiologisk oppløsning for fortynning. 0,3 g vannfritt KH2P04, 0,6 g vannfritt NaH2P04 og 0,6-0,8 g agar-agar; pH på 7,0-7,2, hvoretter dråper påføres på overflaten av membranfiltre.

Brukes som en oppløsning for fortynning (0,6-0,8% av kjøttpepton-halvvæsken agar) etterfulgt av såing en dråpe fortynnet test suspensjon på et membranfilter er originalt i løsningen, enkel å implementere, informativ, gir statistisk pålitelige resultater; gjør det mulig å redusere forbruket av næringsmedier, sterile bakteriologiske retter og analysetid betydelig; lar deg gi en ekte kvantitativ vurdering av innholdet i mikroorganismer som produserer sammenflyttende vekst og danner svært små (Rosinky) kolonier, og lar deg også studere intrapopulasjonsprosesser ved hjelp av lysmikroskopi.

For analyse blir det tatt prøver av matvarer i henhold til gjeldende reguleringsdokumenter (GOST 18963-73. Drikkevann. Metoder for sanitær-bakteriologisk analyse. M., 1986; GOST 9958-81. Pølseprodukter og kjøttprodukter. M., 1982; GOST 7702.2 .1-95. Fjærfe kjøtt, slakting og halvfabrikat fjærfeprodukter (M., 1994).

For å fremstille en suspensjon, plasseres en del matvarer i en steril kolbe (glass) av en homogenisator og en 0,85% oppløsning av natriumklorid tilsettes i en firefoldig mengde. Homogenisering utføres i en elektrisk mikser. For det første blir materialet knust i stykker med en lavere rotasjonshastighet av knivene, deretter ved 15000-200 rpm i 2,5 minutter. Det er tillatt, i fravær av en homogenisator, å fremstille prøvesuspensjonen i en steril porselsmørtel ved å male 20 g produkt fra 2-3 g steril sand og gradvis helles 80 cm sterilt saltoppløsning. For avlinger på næringsmedia med en steril gradert pipette fjernes suspensjonen etter 15 minutters eksponering ved romtemperatur. 1 ml suspensjon inneholder 0,2 g produkt.

Kjøttpepton agar helles i glass eller plast petriskål (9 cm i diameter) og etter at agaret er avkjølt, plasseres 5-6 membranfiltre på overflaten med sterile tang. Diagrammet viser hovedstadiene for å bestemme antall mesofile aerob og valgfrie anaerobe mikroorganismer ved den foreslåtte metoden.

0,6-0,8% fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA helles i 9 cm3 i sterile rør. Deretter brukes 9 cm 3 fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA for å forberede desimalfortynninger av test suspensjonen. For å gjøre dette, gjør det i første rør med 9 cm 3 halvvannspar agar 1 cm 3 av test suspensjonen, fra første rør, forsiktig blandet 1 cm 3 av test suspensjonen, overfør til den andre, etc. 0,1 ml (1 dråpe) av den fortynnede kulturen påføres på et membranfilter plassert på en MPA i en kopp. I en kopp kan du sette 5-6 dråper agar med forskjellige fortynninger av kulturen. Dråper agar med en fortynnet kulturfrys etter 10-15 minutter. Derefter dyrkes petriskål opp-ned i en termostat ved 37 ° C i 48 timer. For å bestemme antall levedyktige bakterieceller, teller koloniene i dråper agar.

For å bestemme antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer, blir antallet dyrkede kolonier multiplisert med graden av kulturfortynning i henhold til formelen:

hvor x er antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer,

a - antall voksne kolonier,

n er graden av fortynning.

For å kvantifisere innholdet i mikroorganismer som produserer sammenflyttende vekst og danne svært små kolonier (Rosin), samt å studere intrapopulasjonsprosesser ved hjelp av lysmikroskopi, blir kolonier dyrket på membranfiltre rettet i par 25% glutaraldehyd i 30-40 minutter. Deretter påføres membranfilteret på glidens overflate, og noen få dråper propylenoksyd påføres det. Membranfilteret blir gjennomsiktig, og til og med svært små (Rosinky) kolonier kan betraktes i et mikroskop eller forstørrelsesglass og, om nødvendig, mikrofotografering.

Fremgangsmåten er illustrert i de følgende spesifikke utførelser (se tabell).

Legend: metode 1 - nærmeste analog

metode 2 - foreslått

Eksempel 1. Bestemme antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer i kokt pølse. Bestemme antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer ble utført på to måter: metode 1 (prototype) - Til analyse blir kjøttpeptonagar pakket i glass eller plast petriskål (9 cm i diameter). Prøvetaking av matvarer ble utført i henhold til gjeldende reguleringsdokumenter (GOST 9958-81. Korvprodukter og kjøttprodukter. M., 1982). For å fremstille en suspensjon ble en del av maten plassert i en steril kolbe (glass) av en homogenisator og en 0,85% oppløsning av natriumklorid ble tilsatt i fire ganger. Homogenisering ble utført i en elektrisk blander. I utgangspunktet ble materialet knust i stykker med en lavere rotasjonshastighet av knivene, deretter ved 15000-200 rpm i 2,5 minutter. For såing på næringsmedium ble en suspensjon tatt med en steril, gradert pipett etter 15 minutters eksponering ved romtemperatur. 1 ml suspensjon inneholder 0,2 g produkt. Forberedt 3 fortynninger av test suspensjonen i en fysiologisk oppløsning av natriumklorid: en fysiologisk oppløsning av natriumklorid helles i 9 cm3 i sterile rør. Deretter brukes 9 cm 3 fysiologisk oppløsning av natriumklorid til å forberede desimalfortynninger av test suspensjonen. For å gjøre dette, gjør det i første rør med 9 cm 3 natriumklorid 1 cm 3 av forsøkssuspensjonen, fra første rør, forsiktig blandet 1 cm 3 av test suspensjonen, overfør til den andre, etc. og deretter fra hver fortynning ble 0,1 ml påført på en petriskål (3 kopper totalt). Deretter ble petriskålene dyrket opp ned i en inkubator ved 37 ° C i 48 timer. For å bestemme antall levedyktige bakterieceller, ble koloniene telt i dråper agar. For å bestemme antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer, ble antallet dyrkede kolonier multiplisert med graden av kulturfortynning i henhold til formelen:

hvor x er antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer,

a - antall voksne kolonier,

n er graden av fortynning

Metode 2 (foreslått) innebærer fremstilling av en oppløsning for fortynning (0,6-0,8% fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA 0,6-0,8% fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA) og kjøttpeptonagar for såing; analyse; regnskapsføring av resultater.

Til analyse blir kjøttpepton agar hellet i glass eller plast petriskål (9 cm i diameter), etter at agaret er avkjølt, plasseres opptil 6 membranfiltre på overflaten med sterile pincet. Prøvetaking av matvarer ble utført i henhold til gjeldende reguleringsdokumenter (GOST 9958-81. Korvprodukter og kjøttprodukter. M., 1982). For å fremstille en suspensjon ble en del av maten plassert i en steril kolbe (glass) av en homogenisator og en 0,85% oppløsning av natriumklorid ble tilsatt i fire ganger. Homogenisering ble utført i en elektrisk blander. I utgangspunktet ble materialet knust i stykker med en lavere rotasjonshastighet av knivene, deretter ved 15000-200 rpm i 2,5 minutter. For såing på næringsmedium ble en suspensjon tatt med en steril, gradert pipett etter 15 minutters eksponering ved romtemperatur. 1 ml suspensjon inneholder 0,2 g produkt. Forberedelse av 3 fortynninger av prøvesuspensjonen i MPA fysiologisk oppløsning: 0,6-0,8% fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA helles i 9 cm3 i sterile rør. Deretter, i 9 cm 3 av en fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA, blir desimalfortynninger av test suspensjonen utarbeidet. For å gjøre dette, gjør det i første rør med 9 cm 3 halvvannspar agar 1 cm 3 av test suspensjonen, fra første rør, forsiktig blandet 1 cm 3 av test suspensjonen, overfør til den andre, etc. og deretter fra hver fortynning ble 0,1 ml påført på overflaten av et membranfilter plassert på en MPA i en petriskål. Dessuten ble 3 fortynninger plassert i en Petriskål. Deretter ble petriskålene dyrket opp ned i en inkubator ved 37 ° C i 48 timer. For å bestemme antall levedyktige bakterieceller, ble koloniene telt i dråper agar. For å bestemme antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer, ble antallet dyrkede kolonier multiplisert med graden av kulturfortynning i henhold til formelen:

hvor x er antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer,

a - antall voksne kolonier,

n er graden av fortynning.

Antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer, bestemt ved metode 1 - (9 x 10 2) og ved metode 2 - (10 x 10 2), var ikke signifikant forskjellig.

Eksempel 2. Bestemme antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer i kjøtt. Bestemme antall mesofile aerobe og fakultative anaerobe mikroorganismer ble utført på to måter: metode 1 (prototype) - Til analyse blir kjøttpeptonagar pakket i glass eller plast petriskål (9 cm i diameter). Prøvetaking av matvarer ble utført i henhold til gjeldende reguleringsdokumenter (GOST 9958-81. Korvprodukter og kjøttprodukter. M., 1982). For å fremstille en suspensjon ble en del av maten plassert i en steril kolbe (glass) av en homogenisator og en 0,85% oppløsning av natriumklorid ble tilsatt i fire ganger. Homogenisering ble utført i en elektrisk blander. I utgangspunktet ble materialet knust i stykker med en lavere rotasjonshastighet av knivene, deretter ved 15000-200 rpm i 2,5 minutter. For såing på næringsmedium ble en suspensjon tatt med en steril, gradert pipett etter 15 minutters eksponering ved romtemperatur. 1 ml suspensjon inneholder 0,2 g produkt. Tilberedte 6 fortynninger av test suspensjonen i en fysiologisk oppløsning av natriumklorid: en fysiologisk oppløsning av natriumklorid helles i 9 cm3 i sterile rør. Deretter brukes 9 cm 3 fysiologisk oppløsning av natriumklorid til å forberede desimalfortynninger av test suspensjonen. For å gjøre dette, gjør det i første rør med 9 cm 3 natriumklorid 1 cm 3 av forsøkssuspensjonen, fra første rør, forsiktig blandet 1 cm 3 av test suspensjonen, overfør til den andre, etc. og deretter fra hver fortynning ble 0,1 ml påført på en petriskål (totalt 6 kopper). Deretter ble petriskålene dyrket opp ned i en inkubator ved 37 ° C i 48 timer. For å bestemme antall levedyktige bakterieceller, ble koloniene telt i dråper agar. For å bestemme antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer, ble antallet dyrkede kolonier multiplisert med graden av kulturfortynning i henhold til formelen:

hvor x er antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer,

a - antall voksne kolonier,

n er graden av fortynning.

Metode 2 (foreslått), inkludert fremstilling av en oppløsning for fortynning (0,6-0,8% fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA og 0,6-0,8% fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA) og kjøttpeptonagar for såing; analyse; regnskapsføring av resultater.

Til analyse blir kjøttpepton agar hellet i glass eller plast petriskål (9 cm i diameter), og etter at agaret er avkjølt, plasseres 5-6 membranfiltre på overflaten med sterile pincet. Prøvetaking av matvarer ble utført i henhold til gjeldende reguleringsdokumenter (GOST 9958-81. Korvprodukter og kjøttprodukter. M., 1982). For å fremstille en suspensjon ble en del av maten plassert i en steril kolbe (glass) av en homogenisator og en 0,85% oppløsning av natriumklorid ble tilsatt i fire ganger. Homogenisering ble utført i en elektrisk blander. I utgangspunktet ble materialet knust i stykker med en lavere rotasjonshastighet av knivene, deretter ved 15000-200 rpm i 2,5 minutter. For såing på næringsmedium ble en suspensjon tatt med en steril, gradert pipett etter 15 minutters eksponering ved romtemperatur. 1 ml suspensjon inneholder 0,2 g produkt. Forberedte 6 fortynninger av forsøkssuspensjonen i MPA fysiologisk oppløsning: 0,6-0,8% fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA helles i 9 cm3 i sterile rør. Deretter brukes 9 cm 3 fysiologisk oppløsning av halvflytende MPA for å forberede desimalfortynninger av test suspensjonen. For å gjøre dette, gjør det i første rør med 9 cm 3 halvvannspar agar 1 cm 3 av test suspensjonen, fra første rør, forsiktig blandet 1 cm 3 av test suspensjonen, overfør til den andre, etc. og deretter fra hver fortynning ble 0,1 ml påført på overflaten av et membranfilter plassert på en MPA i en petriskål. Videre ble 6 fortynninger plassert i to petriskål. Deretter ble petriskålene dyrket opp ned i en inkubator ved 37 ° C i 48 timer. For å bestemme antall levedyktige bakterieceller, ble koloniene telt i dråper agar. For å bestemme antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer, ble antallet dyrkede kolonier multiplisert med graden av kulturfortynning i henhold til formelen:

hvor x er antall mesofile aerobiske og fakultative anaerobe mikroorganismer,

a - antall voksne kolonier,

n er graden av fortynning.

Etter dyrking i petriskål ved 37 ° C i 48 timer var antall mesofile aerob og valgfrie anaerobe mikroorganismer, bestemt ved metode 1 - (8 × 10 5) og ved metode 2 - (7 × 105), ikke signifikant forskjellig.

Fra de ovennevnte eksempler kan det ses at i en sammenlignende vurdering av de to metodene, var antallet CFU bestemt ved den foreslåtte metoden ikke signifikant forskjellig fra det ved bestemmelsen ved den allment aksepterte metoden. Samtidig har den utviklede metoden flere fordeler. Så, for å bestemme antall levedyktige celler for de fem prøvetyper var: i henhold til eksisterende - 98 min; i henhold til den foreslåtte metoden - 48 min. Kostnaden for næringsmediet var prototypen - 420 ml; ved den foreslåtte metoden - 135 ml. Antallet Petri-retter gjorde opp prototypen - 28 stykker; på den foreslåtte metoden - 9 stk.