GOST 26669-85

INTERSTATE STANDARD

MAT OG SMAKSPRODUKTER

FORBEREDELSE AV PRØVER FOR MIKROBIOLOGISK
ANALYSE

Dato for introduksjon 01.07.86

Denne standarden gjelder for matvarer og smakstilsetninger og spesifiserer forberedelse av prøver for mikrobiologisk analyse.

Begrepene som brukes i standarden og deres forklaringer er angitt i vedlegget.

1. APPARAT, REAGENSER OG MATERIALER

membran filtrering enhet; gass- eller alkoholbrenner i samsvar med GOST 25336;

metall trakter; slag;

flaskeåpningsnøkkel; boks åpner;

saks, skalpell, pinsett i samsvar med GOST 21241, spatel, skje;

sjablonger (mal); prøverør i samsvar med GOST 25336;

* GOST R 51652-2000 er i kraft på den russiske føderasjonens territorium.

70 %; plastposer; vaskemiddel;

pepton for bakteriologiske formål i samsvar med GOST 13805.

Verktøy og overflaten på enheter i direkte kontakt med produktet må steriliseres ved hjelp av en av metodene spesifisert i GOST 26668.

1.2. Tilberedning av pepton saltvannsløsning

Pepton-saltløsning fremstilles som følger: 8,5 g natriumklorid og 1,0 g pepton oppløses i 1 dm 3 destillert vann med langsom oppvarming. Den resulterende løsningen, om nødvendig, filtreres gjennom et papirfilter, pH justeres til 7,0 ± 0,1, helles i kolber, reagensrør eller andre kar, forsegles og steriliseres ved en temperatur på (121 ± 1) ° С i 30 minutter .

Løsningen oppbevares på et mørkt sted ved en temperatur på (4 ± 2) ° С i ikke mer enn 30 dager under forhold som utelukker fuktighetsfordampning.

Temperaturen på pepton-saltoppløsningen bør tilsvare temperaturen til det analyserte produktet.

1.3. Tilberedning av peptonvann

Peptonvann tilberedes på samme måte som pepton-saltoppløsning uten tilsetning av natriumklorid.

2. FORBEREDELSE AV PRØVER FOR ANALYSE

2.1. Prøvepakken inspiseres og matches med inskripsjonen på litografisk trykk eller på etiketten spesifisert i medfølgende dokument.

2.3. Mikrobiologisk analyse av produktprøver med normalt utseende utføres i en boks under aseptiske forhold. Pakken med en prøve av et produkt som er mistenkelig i utseende eller bortskjemt, åpnes i et eget rom.

Bokseforberedelse er beskrevet i vedlegg.

2.2, 2.3. (Modifisert utgave, endring nr. 1).

2.4. Prøver med frosset produkt tines ved en temperatur på (4 ± 2) ° C før den veide porsjonen tilberedes. Prøven tas umiddelbart etter tining, men senest 18 timer fra begynnelse av tining.

Det er tillatt å tine en produktprøve ved en temperatur på 18 - 20 ° C i 1 time.

Prøver av et produkt med jevn konsistens kan tines i en termostat ved 35 ° C, forutsatt at fullstendig tining oppnås på ikke mer enn 15 minutter.

2.5. Åpne pakken med en prøve av produktet

2.5.1. Umiddelbart før åpning av pakken med en prøve av produktet i forbrukerbeholderen, frittflytende eller med flytende fase, bland ved å snu beholderen 10 ganger fra bunnen til lokket eller i en sirkulær bevegelse.

2.6.1. Fra hver prøve av produktet, avhengig av parametrene som skal bestemmes, tas en eller flere veide porsjoner for tilberedning av fortynninger og/eller såing i næringsmedier.

2.6.2. Massen (volum) av en prøve beregnet for såing i næringsmedier og/eller for å tilberede fortynninger av den bør fastsettes i den forskriftsmessige og tekniske dokumentasjonen for en bestemt type produkt eller analysemetoder.

2.6.3. Inokulasjonsprøven tas med gravimetrisk eller volumetrisk metode umiddelbart etter åpning av produktprøven. Obduksjonen utføres under forhold som utelukker kontaminering av produktet med mikroorganismer, i umiddelbar nærhet av brennerflammen med sterile instrumenter.

2.6.4. Den veide delen av produktet tas slik at alle komponentene er representert i det og i samme forhold som i den analyserte prøven.

2.6.5. For fremstilling av fortynninger av den veide delen av produktet brukes en pepton-saltoppløsning.

Det er tillatt å tilberede de første fortynningene av produkter med en massefraksjon av NaCl mer enn 5% ved bruk av peptonvann, de første fortynningene av kjøtt, fisk og meieriprodukter - ved å bruke en fysiologisk løsning.

Massen (volum) av en prøve av produktet beregnet for fremstilling av den første fortynningen eller homogenatet bør være minst (10 ± 0,1) g/cm 3.

Forholdet mellom massen (volum) av prøven av produktet og volumet av pepton-saltvannsoppløsningen for de første og etterfølgende fortynningene er:

1: 9 - for 10 ganger fortynning (for produkter som inneholder en stor mengde fett uten overflateaktive stoffer 1:10);

1: 5 - for 6 ganger fortynning;

1: 3 - for 4 ganger fortynning;

1: 1 - for 2 ganger fortynning.

Hvis det er nødvendig å fortynne en prøve av produkter som inneholder en stor mengde fett, er det tillatt å bruke overflateaktive stoffer (natriumbikarbonat, etc.) som ikke har antimikrobiell aktivitet.

For å forberede en fortynning av en prøve av produkter med høyt osmotisk trykk, er det tillatt å bruke pepton eller destillert vann.

(Endret utgave, endring nr. 1).

2.6.6. Den første fortynningen av den veide delen av produktet tilberedes i samsvar med de aseptiske forholdene på en av følgende måter:

oppløsning av produkter;

fortynning av produkter med en flytende fase;

ved å suspendere pulver, deigaktige produkter og overflaten av mikrobielt kontaminerte produktstykker;

homogenisering av faste produkter.

En del av produktet som er igjen på overflaten av pipetten får renne til tuppen av pipetten. Den resulterende dråpen fjernes ved å berøre den indre veggen av fatet eller forbrukerbeholderen over overflaten av produktet.

Viskøse produkter fjernes fra overflaten av pipetten med en steril vattpinne.

Den veide delen av produktet overføres til en skål med pepton-saltoppløsning for å forberede den innledende fortynningen slik at pipetten ikke berører overflaten av pepton-saltvannsoppløsningen. Bruk en annen steril pipette, bland produktet grundig med pepton-saltvannsløsningen ved å fylle og skyve blandingen ti ganger.

Når du arbeider med tyktflytende produkter, er det tilrådelig å plassere flere glasskuler i en bolle for raskere blanding med pepton-saltløsning.

2.6.8. Det flytende produktet mettet med karbondioksid (CO 2) overføres til en steril konisk kolbe lukket med en bomullstopper eller til en annen beholder og varmes opp under hyppig omrøring i sirkulære bevegelser i vannbad ved en temperatur på 30 til 37 °C til gassbobler vil ikke lenger genereres.

En veid del av produktprøven tas og behandles i henhold til s.

En veid porsjon fra prøver av vannuløselige faste produkter homogeniseres i tilfellene spesifisert i den normative og tekniske dokumentasjonen. Ved homogenisering av produktet bør det totale antall omdreininger av homogenisatoren være 15 - 20 tusen. Antall omdreininger av homogenisatoren bør ikke være mindre enn 8000 og mer enn 45000 omdreininger per minutt.

Hvis en heterogen masse oppnås under homogenisering av produktet, forsvares den i 15 minutter og supernatanten brukes til inokulering og (eller) fremstilling av fortynninger.

Det tillates å homogenisere det usteriliserte produktet ved å male det til en homogen konsistens oppnås i en steril mørtel i samsvar med aseptiske forhold.

(Endret utgave, endring nr. 1).

2.6.12. En veid prøve av deigaktige produkter tas etter grundig blanding med skje eller glassstang og behandles deretter i henhold til s.

2.6.13. En veid porsjon flytende fettprøver tas med en varm pipette oppvarmet ved flamming. Etter å ha fylt pipetten med produktet, fjernes restene fra overflaten av pipetten med en steril vattpinne.

Produktet bringes fra en pipette til en bolle med en malt glasspropp og fortynnes med den nødvendige mengden pepton-saltoppløsning, oppvarmet til 40 - 45 ° C; når du oppdager psykrofile mikroorganismer, bør temperaturen ikke overstige 37 ° C. Det gjenværende fettet som fester seg til pipetten skylles med pepton-saltløsning, som suges flere ganger og tømmes ut av pipetten.

2.6.14. En porsjon av faste fettprøver tas etter å ha kuttet produktet i flere deler med en kniv eller ledning. Fjern om nødvendig topplaget.

En prøve av produktet tas fra overflaten av seksjonene fra forskjellige steder med en skalpell og overføres til en veid skål med lokk.

En viss vekt av prøven overføres til en bredhalset skål med en malt glasspropp. Det gjenværende fettet som fester seg til oppvaskens vegger, skylles i samme tallerken med en viss mengde pepton-saltoppløsning oppvarmet til 40 - 45 ° C, som tilsettes fatet i den nødvendige mengden for å oppnå den første fortynningen.

Fra fast fett kan prøven tas etter volum. Fett smeltes i en bolle med bred hals i et vannbad ved en temperatur som ikke overstiger 45 ° C; når du oppdager psykrofile mikroorganismer, bør temperaturen ikke overstige 37 ° C.

Etter å ha blandet det smeltede fettet, overføres det med en varm pipette til en tallerken med bred hals med et malt glasslokk, som inneholder den nødvendige mengden pepton-saltløsning for å forberede den første fortynningen. Pepton-saltoppløsning forvarmes til 40 - 45 ° C; når psykrofile mikroorganismer oppdages opp til 37 ° C.

2.6.15 Veier fra prøver av piskede produkter eller en grøtaktig konsistens som inneholder en stor mengde fett, etter omrøring med en glassstang, ta en skje i en veid tallerken og tilsett en pepton-saltoppløsning, oppvarmet til 40 - 45 ° C, i den nødvendige mengden for å forberede den første fortynningen.

2.6.16 Bestemmelse av mikrobiell forurensning av overflaten av produktprøver utføres ved vask med bomullspinner.

En steril bomullspinne fuktes med pepton-saltløsning og gnis på forskjellige steder på overflaten av forskjellige deler av det analyserte produktet med et totalt areal på 100 cm 2.

Overflatearealet som skal analyseres måles ved hjelp av sterile maler med passende hull.

Pinnen plasseres i et reagensrør som inneholder 10 cm 3 pepton-saltløsning. Innholdet i røret blandes grundig med en pipette. Den resulterende suspensjonen betraktes som den første fortynningen.

(Endret utgave, endring nr. 1).

2.7. Forbereder ti ganger fortynninger

2.7.1. Den første ti ganger fortynningen av den veide porsjonen er den første, den første fortynningen tilberedes i samsvar med s. Påfølgende fortynninger oppnås fra den.

2.7.2. En påfølgende andre fortynning tilberedes fra én del av den opprinnelige fortynningen og ni deler peptonsaltvann ved å blande i et reagensrør.

Hvis en pipette ble brukt til å blande den første fortynningen, tilsettes 1 cm 3 av den opprinnelige fortynningen i 9 cm 3 pepton-saltvannløsning med samme pipette, uten å berøre overflaten av løsningen med pipetten. Fortynningen blandes med en annen pipette ved å suge og blåse ut innholdet i reagensglasset ti ganger.

2.7.3. Den tredje og etterfølgende fortynninger fremstilles på lignende måte.

2.7.4. Intervallet mellom tilberedning av veide porsjoner av produktet, fortynningen av disse og såing i kulturmedier bør ikke overstige 30 minutter.

VEDLEGG 1
Henvisning

BRUKT BRUKT I STANDARDEN OG FORKLARINGER TIL DEN

(Endret utgave, endring nr. 1).

VEDLEGG 2
Henvisning

HERMEDDEFEKER

Defekter ved et hermetisk produkt er:

tegn på utvikling av mikroorganismer som er synlige for det blotte øye: gjæring, mugg, slim, etc.;

sediment på bunnen av boksen eller på kanten av overflaten av produktet med beholderen ("ring");

turbiditet i væskefasen;

koagulasjon;

forsuring;

fremmed lukt og (eller) smak som ikke er typisk for produktet;

fargeendring.

Defekter i utseendet til beholdere med produkter pakket i den vurderes:

tegn på lekkasjer synlige for det blotte øye: hull, gjennom sprekker, flekker eller spor av produkt som strømmer ut av boksen;

bokser med vibrerende ender;

feil utformet søm av blikkbokser (tunger, tenner, underskjæring, falsk søm, rullesøm);

rust, etter fjerning av hvilke skjell gjenstår;

deformasjon av kroppen, ender eller langsgående søm av bokser i form av skarpe kanter og "fugler";

skjeve lokk på glasskrukker, underskjærer korrugeringen av lokkene langs det sammenrullede feltet, utstikkende gummiring ("løkke");

sprekker eller oppsprukket glass ved sømmen, ufullstendig plassering av lokkene i forhold til boksens hals;

deformasjon (innrykk) av lokkene til glasskrukker, noe som forårsaket brudd på sømmen;

en konveks elastisk membran (knapp) på lokket.

VEDLEGG 3
Henvisning

FORBEREDELSE AV BOKSING

Hermetikk åpnes i et boksrom spesielt tilrettelagt for mikrobiologisk analyse. Boksen skal ikke ha overflater som er utilgjengelige for våt desinfisering, og bevegelse av luft skapt av trekk bør utelukkes. Vegger, gulv og tak skal fores med materiale eller males med maling som tåler våt desinfeksjon. For å sterilisere luften er boksen utstyrt med ultrafiolette lamper med en hastighet på 1,5 - 2,5 W per 1 m 3.

Kun mikrobiologen som utfører analysen og om nødvendig en assistent skal være i boksen.

Boksen skal ha bord og krakk. Det skal ikke være unødvendige gjenstander, annet enn de som kreves for analyse av hermetikk.

Tabellen skal inneholde:

spritlampe eller gassbrenner;

en krukke med en malt kork med alkohol;

en krukke lukket med lokk med forhåndstilberedte tette sterile bomullspinner som måler 3 ´ 3 cm eller bomullsringer;

krukker med en desinfiserende løsning (laghøyde 3 cm) for plassering av pipetter eller rør som brukes etter analyse;

et lite metall- eller emaljebrett som de analyserte glassene er plassert på;

sterile pipetter eller rør som prøven tas med.

I skuffen på bordet bør hjelpeutstyr oppbevares: pinsett og en stanse. Punchen skal være i form av et spyd med et diamantformet tverrsnitt med diagonaler på 1 ´ 1,5 cm eller med et tverrsnitt i form av en likebenet trekant.

Når du åpner et stort antall bokser, brukes en stans, festet på et stativ. I dette tilfellet utføres åpningen ved å trykke på stempelet på lokket til boksen ved hjelp av en spak.

Før du åpner boksen, flammes stansen i flammen til en tampong.

Boksen vaskes og desinfiseres umiddelbart før analysen (ikke tidligere enn 24 timer før start) og etter at den er ferdig. Desinfeksjon utføres ved å tørke av alle overflater med klor eller andre desinfeksjonsmidler i henhold til instruksjonene for hvert medikament. 45 minutter før arbeidet påbegynnes i boksen, slås bakteriedrepende lamper på i (30 ± 5) minutter.

For tiden brukes laminære strømningsbokser (beskyttende ultrarene luftkabiner) for mikrobiologiske analyser. Laminære bokser produseres av Uzhgorod-anlegget for medisinsk utstyr "Laminar", bokser av BPV 1200-merket er produsert i Ungarn, bokser av TVG-S II 1.14.1-merket er produsert av Babcock - BSH (Tyskland).

VEDLEGG 2, 3. (Innført i tillegg, endringsforslag nr. 1).

INFORMASJONSDATA

1. UTVIKLET OG INNSENDT av Statens agroindustrielle komité i USSR

2. GODKJENT OG INNFØRT I VIRKNING ved dekret fra USSR State Committee for Standards datert 04.12.85 nr. 3810

3. Standarden samsvarer fullt ut med ST SEV 3014-81

4. Standarden inkluderer internasjonale standarder: ISO 6887-83 (E) og ISO 7218-85

5. BYTT GOST 10444.0-75

6. REFERANSE FORSKRIFTER OG TEKNISKE DOKUMENTER

Målrettet sanitær og bakteriologisk kontroll av matvarer, vask fra miljøgjenstander, vann tillater effektiv implementering av gjeldende sanitær og epidemiologisk overvåking, gir en objektiv vurdering av samsvar med regimet. Hjelper med å belyse måtene for overføring av smitteprinsippet. Feil ved prøvetaking kan føre til feil hygienisk vurdering av prøvene med de mest sensitive og nøyaktige forskningsmetoder, og som følge av mangelfull vurdering av selve gjenstanden.

Derfor er et av de grunnleggende prinsippene for mikrobiologisk forskning riktig prøvetaking, strengt overholdelse av prøvetakingsreglene og deres kvantitative forhold.

Hoveddokumentene for prøvetaking av matvarer for mikrobiologisk forskning er:

GOST R 54004-2010 “Matprodukter. Prøvetakingsmetoder for mikrobiologisk testing "
GOST R 53430-2009 "Melk og melkeprodukter. Mikrobiologiske analysemetoder "
GOST R ISO 707 - 2010 "Melk og meieriprodukter. Sampling Guide "

Funksjoner ved prøvetaking av matvarer i samsvar med GOST R 54004-2010:

1.Før prøvetaking, på grunnlag av visuell inspeksjon, deles emballasjeenheter eller produkter inn i 3 grupper, mens prøvetaking utføres for hver gruppe separat:

Normal i utseende (ingen tegn på mikrobiell ødeleggelse)
- mistenkelig (med tegn på abnormiteter som kan oppstå både som følge av mikrobiell skade og som følge av kjemiske eller biokjemiske reaksjoner i produktet)
- ødelagte produkter under inspeksjonen hvor det ble funnet åpenbare produktdefekter (bombardement, mugg, glatthet, etc.). Produkter med utløpt holdbarhet er ikke valgt for forskning.

2. Prøver tas med sterile instrumenter inn i sterile beholdere, hvis svelg brennes i en brennerflamme (sterile krukker eller sterile poser, sterile plastbeholdere).

Hvis det utføres en rutinemessig prøvetaking og det dannes én prøve, bør prøvetaking for mikrobiologisk analyse gå før prøvetaking for organoleptisk og fysisk-kjemisk forskning, og overholde de aseptiske reglene som utelukker kontaminering på prøvetakingstidspunktet.

3. Volumet (massen) av prøven bestemmes i henhold til NTD for en gitt type produkt. Antall emballasjeenheter er satt av gjeldende standarder, OST, TU, etc. på de tilsvarende produktene.

4. Hvis massen til prøven er lik massen til produktet i forbrukerbeholderen, bruk hele pakken. Hvis massen til prøven er mer enn en pakkeenhet, tas det flere pakker, ellers (ingen pakke) tas prøven ved å ta enkeltprøver fra forskjellige steder.

5. Hvis massen (volum) av produktet ikke er fastslått av NTD, tas minst 1 stykke av en prøve fra produktet i forbrukerbeholderen og opptil 1000 g (cm3) fra produktet i fraktbeholderen ( klumpete, flytende, deigaktig, løs og blandet konsistens). Ved prøvetaking fra klumpprodukter som veier mer enn 1000 g, brukes en av følgende metoder:

• en del av produktet kuttes av eller kuttes ut med en kniv eller annet verktøy, mens for rektangulære produkter gjøres kuttet vinkelrett på lengdeaksen, og for sfæriske - kileformet;
• produktet kuttes på flere steder med en kniv, og deretter tas det nødvendige antall stykker fra snittflaten og fra dybden med en skalpell, som overføres med pinsett til en bredhalset beholder;
• overflatelaget av produktet kuttes av til en tykkelse på 0,5 - 1 cm og produktet presses ut i en vidhalset beholder ved hjelp av en sonde eller et spesialverktøy.

6. Prøver av frosne produkter legges i en isotermisk beholder eller med kjølemedier. Temperaturen på slike prøver under transport bør ikke overstige minus 150C. Prøver av lett bedervelige produkter transporteres ved 50C i kjøleposer med kjølemedier i ikke mer enn 6 timer. I andre tilfeller blir de veiledet av NTD for hver type produkt.

7. Prøvetaking av melk og meieriprodukter utføres i samsvar med: GOST 26809-86 "Melk og meieriprodukter. Akseptregler, prøvetakingsmetoder og klargjøring av prøver for analyse”. Dersom produktene presenteres i forbrukeremballasje, velges 1 enhet forbrukeremballasje. Ved sammenstilling av en kombinert prøve, for eksempel cottage cheese: 3 punktprøver tas fra hver enhet av fraktbeholderen: 1 fra midten, 2 andre i en avstand på 5 cm fra sideveggen. Den valgte massen overføres til en steril skål, og utgjør en kombinert prøve som veier 500 g. Ved bestemmelse av antall bifidobakterier i fermenterte melkeprodukter, tas 3 forbrukerpakningsenheter ved stikkprøver. Mikrobiologiske studier bør startes ikke mer enn 4 timer etter prøvetaking, hvis prøvene ble transportert ved en temperatur ikke høyere enn 6 ° C, og iskremprøver - ikke høyere enn 2 ° C.

8. Prøvetaking av fiskeprodukter - i henhold til GOST 31339-2006, "Fisk, ikke-fiskeobjekter og produkter fra dem"

9. Kjøttprodukter i henhold til GOST R 51447-99 "Kjøtt og kjøttprodukter"

10. Fjærfekjøtt, fjærfebiprodukter og halvfabrikata i henhold til GOST R 50396.0-92 "Fjærfekjøtt, fjærfebiprodukter og halvfabrikata".

9. Ved prøvetaking av produkter på serveringssteder bør man være veiledet av MU nr. 2657 «Om sanitær og bakteriologisk kontroll ved serveringssteder og næringsmiddelhandel».

Hvis en prøve av retten tas i dispenseren, overføres hele delen fra platen til glasset; hvis en prøve tas på kjøkkenet fra en stor masse produkt (fra en kasserolle, fra et stort kjøttstykke), tas en prøve som veier ca. 200 g (flytende retter - etter grundig blanding; tett - fra forskjellige steder i dybden av stykket). Mineral-, alkoholfrie og øldrikker velges i mengden 1 flaske av originalemballasjen eller 200 ml av en drink laget på bedriften.

Når du tar en prøve av et produkt med kompleks konsistens, bør det inkludere alle komponenter i samme forhold som i originalproduktet. Om nødvendig velges hver komponent separat.

Løse produkter blandes grundig før prøvetaking, eller prøven består av punktprøver.

10. Alle prøver leveres med etiketter, hvorpå i tillegg til prøvenummer, produktnavn, skal det angis dato og tidspunkt for prøvetaking, samt dato og tidspunkt for produksjon, produktets holdbarhet. Prøver er forseglet eller forseglet.

11. I prosessen med prøvetaking utarbeides det en protokoll for prøvetaking og en henvisning til forskning som angir årsaken til prøvetakingen (planlagt, ikke-planlagt, epidemiologisk forskning, etc.) og formålet med testen for samsvar er angitt:

Ensartede sanitær-epidemiologiske og hygieniske krav til varer godkjent av 28.05.2010 nr. 299

TR CU 02 \ 2011 "om mattrygghet"

SanPiN 2.3.2.1078-01 "Hygieniske krav til matvarers sikkerhet og ernæringsmessige verdi"

Føderale lov tekniske forskrifter for melk og meieriprodukter nr. 88-FZ datert 12. juni 2008

Føderale lov tekniske forskrifter for fett og oljeprodukter

Føderale lov tekniske forskrifter for frukt- og grønnsaksjuiceprodukter nr. 178-FZ datert 27. oktober 2008

Instruksjon om prosedyre for undersøkelse, regnskap og laboratorieforskning i institusjonene til sanitær og epidemiologisk tjeneste for matforgiftning nr. 1135-73 g

Ensartede sanitære og epidemiologiske og hygieniske krav for varer underlagt sanitært og epidemiologisk tilsyn (kontroll) er utviklet for å implementere bestemmelsene i Tollunionsavtalen om sanitære tiltak av 11. desember 2009.

Vasker.

I følge MU nr. 2657 av 31.12.82 "Om sanitær og bakteriologisk kontroll ved offentlige serverings- og næringsmiddelforetak."

I praktiseringen av det nåværende sanitære tilsynet med cateringfasilitetene til barne-, førskole- og ungdomsbedrifter, så vel som kantinene, er utvaskingsmetoden mye brukt for å kontrollere effektiviteten av rensingen av inventar, utstyr, servise, sanitærklær og hendene til personell. Spylemetoden gjør det mulig å objektivt vurdere det sanitære vedlikeholdet til de undersøkte institusjonene.

Når du utfører vask, rettes spesiell oppmerksomhet til kontrollen av utstyr og apparater som brukes i løpet av den teknologiske prosessen med å tilberede produkter som ikke er utsatt for ytterligere varmebehandling (kjølehus).

Bakteriologisk kontroll med metoden for å vaske av overflatene til inventar, utstyr, hender og sanitærklær til personell kan tjene to formål:

a) for å fastslå effektiviteten av desinfisering, for dette formål utføres vask fra inventar, utstyr, hender og sanitærklær til personell før arbeidet påbegynnes, eller, hvis dette ikke er mulig, i pauser, etter at hender og utstyr er blitt renset, dvs vask er laget av rene gjenstander.

b) å bestemme hvilken rolle utstyr og personell har i bakteriell forurensning av et produkt eller en ferdig rett under den teknologiske produksjonsprosessen, med spesiell oppmerksomhet til produksjon av produkter og ferdigretter som har gjennomgått varmebehandling eller spises uten forbehandling (noen grønnsaker, gastronomiske produkter, salater, vinaigrette, etc.). For å løse dette problemet, samtidig som vaskene tas, tas det gjentatte prøver av matvarer (vaskingen tas fra ubehandlede hender og overflater).

Skylling utføres fra overflaten med en fuktet steril bomullspinne festet på en glass- eller metallholder montert i et bomullsgasrør. Reagensrøret inneholder et sterilt miljø. Umiddelbart før du tar vask, fuktes tampongen ved å dyppe tampongen i væsken. Når du tar vattpinner, bør følgende anbefalinger tas i betraktning:

• Av utstyret bør du være oppmerksom på skjærebrett, kjøttkverner, produksjonstabeller for ferdige produkter.
• Vasker fra hender, sanitærklær, håndklær tas fra arbeidere som omhandler produkter som ikke utsettes for ytterligere varmebehandling.
• Vasker fra stort utstyr tas fra overflaten på 100 kvm. Sjablongen på 25 kv. Cm påføres 4 forskjellige steder på overflaten av det kontrollerte objektet.

Når du tar vattpinner fra små gjenstander, vaskes hele overflaten av. Vasker tas:

• en vattpinne med 3 gjenstander med samme navn (tallerkener, skjeer, etc.). Glassene tørkes fra innsiden og den øvre ytterkanten 2 cm ned.
• Når du tar håndvask, tørk av håndflatene på begge hender med en vattpinne, gni minst 5 ganger på hver håndflate og fingre, og tørk deretter av de interdigitale mellomrommene, neglene og de subunguale områdene.
• Når du tar vask fra sanitærklær, tørk av 4 områder på 25 kvadratcm - den nedre delen av hver hylse og 2 områder fra de øvre og midtre delene av de fremre etasjene. Håndklær - 4 områder på 25 kvm.

Når du tar vattpinner, noter prøvenummeret i rekkefølge, stedet der vattpinnen ble tatt. En handling med å ta vattpinner er utarbeidet i 2 eksemplarer.

Leveringstid - ikke mer enn 2 timer. Med en økning i tid, levering i termiske beholdere.

Vannprøvetaking for mikrobiologisk forskning

Utvelgelse, konservering, lagring og transport av vannprøver utføres:

I følge GOST R 53415-2009 "Vann. Prøvetaking for mikrobiologisk analyse ";

I følge GOST 31942-2012 "Vann. Prøvetaking for mikrobiologisk analyse ";

I følge GOST R 51592-2000 "Vann. Generelle krav til prøvetaking ”, alt vann tas, som leveres til det mikrobiologiske laboratoriet for forskning;

I følge GOST R 51593-2000 "Drikkevann. Prøvetaking ”, gjelder kun tappevann fra sentraliserte vannforsyningssystemer;

I samsvar med kravene til standarder og andre forskriftsdokumenter for bestemmelsesmetoder;

Spesifikke indikatorer og beregnet for visse typer vann.

For eksempel utføres vannprøvetaking fra sentraliserte drikkevannsforsyningssystemer i samsvar med tre regulatoriske dokumenter:

- GOST R 51593-2000 “Drikkevann. Eksempelutvalg",
- MUK 4.2.1018-01 "Sanitær og mikrobiologisk analyse av drikkevann".

Forholdene for vannprøvetaking for mikrobiologisk forskning bør være nær aseptiske, d.v.s. ikke glem å brenne kranen, tøm vannet fra denne kranen i 10 minutter og først deretter samle vann i en steril beholder. Beholderen åpnes umiddelbart før prøvetaking ved å fjerne proppen sammen med den sterile korken. Under prøvetaking må ikke pluggen og kantene på beholderen berøre noe. For tiden brukes engangsvannprøveposer med og uten natriumtiosulfattablett. Ikke skyll oppvasken. Prøven tas direkte fra springen uten gummislanger, vannfordelingsnett eller annet feste. Hvis det er en konstant helling av vann gjennom prøvetakingsventilen, utføres prøvetaking uten foreløpig avfyring, uten å endre vanntrykket og den eksisterende strukturen (i nærvær av silikon- eller gummislanger).

Vannprøver fra sentraliserte og ikke-sentraliserte vannforsyningskilder tas i samsvar med GOST R 51592-2000 "Vann. Generelle krav til prøvetaking”.

Vann fra bassengskålen tas i henhold til følgende dokumenter:

GOST R 51592-2000 “Vann. Generelle krav til prøvetaking ",
- SanPiN 2.1.2.1188-03 “Svømmebassenger. Hygieniske krav til apparatet, drift og vannkvalitet. Kvalitetskontroll".

Vannprøver tas for analyse på ikke mindre enn 2 punkter: et overflatelag 0,5 - 1,0 cm tykt og i en dybde på 25 - 30 cm fra overflaten av vannspeilet. Kvalitetskontrollen av vannet i svømmebassengets badekar i henhold til de viktigste mikrobiologiske indikatorene bør utføres 2 ganger i måneden.

Analysen av prøver i laboratoriet bør utføres så snart som mulig fra innsamlingstidspunktet. I fravær av avkjøling utføres analysen senest 2 timer etter prøvetaking, og ved avkjøling til 4-10˚C øker holdbarheten til prøven til 6 timer. Derfor er det nødvendig å transportere prøver til laboratoriet i termiske beholdere (unngå frysing, siden mer enn 99 % av bakteriene dør når prøven fryses).

Siden antallet mikroorganismer i en prøve kan halveres på mindre enn 20 minutter på grunn av virkningen av gjenværende mengder desinfeksjonsmidler (klor - i løpet av sekunder), brukes de i en beholder med natriumtiosulfat (med hastigheten 10 mg per 500 ml vann) for å nøytralisere klorert og bromert vann.

Prøvevolumet settes avhengig av antall bestemte indikatorer og type analyse i henhold til ND for metode for å bestemme indikatorer. For eksempel, når man analyserer springvann og vann fra en brønn, er 350 ml vann nok for indikatormikroorganismer, og 1350 ml for indikatormikroorganismer og patogen flora, er volumet av vannprøver for svømmebasseng 500 ml og 1500 ml, for eksempel .

SanPiN 2.1.4.1116-02 “Drikkevann. Hygieniske krav til kvaliteten på vann pakket i beholdere. Kvalitetskontroll ", MU 2.1.4.1184-03" Retningslinjer for implementering og anvendelse av sanitære og epidemiologiske regler og forskrifter SanPiN 2.1.4.1116-02 "Drikkevann. Hygieniske krav til kvaliteten på vann pakket i beholdere. Kvalitetskontroll"

Drikkevann, pakket i beholdere, tas i et volum på 2,5 liter, fordi kun for bestemmelse av Pseudomonas aeruginosa og kolifager kreves 1,0 liter vann.

Jordprøvetaking utføres i samsvar med GOST 17.4.3.01-83 "Generelle krav til jordprøvetaking", GOST 17.4.4.02-84 "Metoder for prøvetaking og forberedelse av prøver for kjemisk, bakteriologisk, helmitologisk analyse".

Et forsøkssted er en del av studieområdet preget av lignende forhold (avlastning, ensartethet i jordstrukturen og vegetasjonsdekket, arten av økonomisk bruk).

Teststedet bør ligge på et typisk sted for studieområdet. På et areal på 100 m2 legges en prøveplass med en størrelse på 25 m.

Flekkprøve - materiale tatt fra ett sted i horisonten eller ett lag av jordprofilen, typisk for en gitt horisont eller lag.

Punktprøver tas på prøvestedet fra ett eller flere lag eller horisonter ved konvoluttmetoden. Grav et hull på 0,3m x 0,3m og en dybde på 0,2m. Overflaten til en av veggene i gropen rengjøres med en steril kniv. Deretter kuttes en jordprøve fra denne veggen, hvis størrelse bestemmes av en gitt prøve, så hvis det er nødvendig å velge 200 g jord, er prøvestørrelsen 20cm x 3cm x 3cm, 500g - 20cm x 5cm x 3cm .

Flekkprøver tas med kniv, slikkepott eller jordbor.

En samlet prøve lages ved å blande inkrementelle prøver tatt fra samme prøvested.

For bakteriologisk analyse lages 10 samlede prøver fra ett prøvested. Hver kombinert prøve er bygd opp av tre punktprøver som hver veier fra 200 til 250 g, tatt lag for lag fra en dybde på 0 til 5 cm, fra 5 til 20 cm.

Jordprøver beregnet for bakteriologisk analyse, for å forhindre sekundær forurensning, bør tas i samsvar med reglene for asepsis: med sterile instrumenter, rør på en steril overflate og plasser i en steril beholder. Tiden fra prøvetaking til begynnelsen av studien bør ikke overstige 1 dag.

Ved overvåking av den sanitære tilstanden til jord i territoriene til barneinstitusjoner og lekeplasser, utføres prøvetaking separat fra sandkasser og fra et felles område fra en dybde på 0-10 cm.

En samlet prøve tas fra hver sandkasse, som består av 5 punktprøver. Ved behov er det mulig å velge én kombinert prøve fra alle sandkasser i hver aldersgruppe, satt sammen av 8-10 punktprøver.

Jordprøver tas enten fra lekeområdene til hver gruppe (en kombinert fra minst fem punktprøver), eller én samlet prøve fra et felles område fra 10 punkter, mens det tas hensyn til de mest sannsynlige stedene for jordforurensning.

Ved overvåking av jord i området med punktkilder til forurensning (avfallsbrønner, avfallsdunker, etc.), legges testplotter på ikke mer enn 5 x 5 m i forskjellige avstander fra kilden og på et relativt rent sted (kontroll) .

Ved undersøkelse av jordforurensning ved transportveier legges prøveflater på veikantstriper, med hensyn til terreng, vegetasjonsdekke, meteo- og hydrologiske forhold.

Det tas jordprøver fra smale strimler på 200-500 m i en avstand på 0-10, 10-50, 50-100 m fra vegbunnen. En blandingsprøve består av 20-25 punktprøver tatt fra en dybde på 0-10 cm.

Ved vurdering av jorda i jordbruksarealer tas det jordprøver 2 ganger i året (vår, høst) fra 0-25 cm dyp. For hver 0-15 hektar legges det minst 1 tomt med en størrelse på 100-200 m2, avhengig av terreng og arealbruksforhold.

For å forberede en gjennomsnittlig prøve med et volum på 0,5 kg, helles jorden til alle prøvene fra ett område på et sterilt, tykt ark, blandet grundig med en steril slikkepott, steiner og andre faste gjenstander kastes. Deretter spres jorden på arket i et jevnt tynt lag i form av en firkant.

Jorden deles med diagonaler i 4 trekanter, jorda fra to motstående trekanter kastes, og resten blandes igjen, igjen fordeles i et tynt lag og deles med diagonaler til ca 0,5 kg jord gjenstår.

Deretter leveres prøven til laboratoriet med retning og prøvetakingshandling.

1. Inspiser prøvepakken og kontroller samsvar med inskripsjonen på det litografiske trykket eller på etiketten spesifisert i medfølgende dokument.

2. Prøvepakken er renset for forurensning. Hvis hermetisk forseglede produktprøver er sendt inn for analyse, kontrolleres tettheten til beholderen. En hermetisk forseglet glass-, metall- eller polymerbeholder med et produkt vaskes med vann og et vaskemiddel, skylles deretter med rent vann og tørkes. En uforseglet pakke med et produkt tørkes av med en vattpinne fuktet i etylalkohol.

3. Mikrobiologisk analyse av produktprøver med normalt utseende utføres i boks under aseptiske forhold. Pakken med en prøve av et produkt som er mistenkelig i utseende eller bortskjemt, åpnes i et eget rom.

4. Prøver med frossent produkt tines før klargjøring av prøven ved en temperatur på (4 ± 2) o C. Prøven tas umiddelbart etter tining, men senest 18 timer senere. Det er tillatt å tine en prøve av et produkt ved en temperatur på 18-20 ° C i 1 time. Prøver av et produkt med jevn konsistens kan tines i en termostat ved 35 ° C, forutsatt at fullstendig tining oppnås på ingen måte mer enn 15 minutter.

5. Åpne pakken med en prøve av produktet

5.1. Umiddelbart før åpning av pakken med en prøve av produktet i forbrukerbeholderen, blandes bulk- eller flytende produkter ved å snu beholderen 10 ganger fra bunnen til lokket eller i en sirkulær bevegelse.

5.2. Pakken med produktprøven (unntatt hermetikk) tørkes av med en vattpinne dynket i 70 % etylalkohol, alkoholen fjernes deretter ved fri fordampning. Deretter åpnes pakken, avfyres halsen på metall- eller glasskrukker, og massen (volumet) av produktet tas i den nødvendige mengden for tilberedning av en eller flere veide porsjoner.

5.3 Pakken med prøven (poser laget av folie, polymermaterialer eller papir) åpnes på et sted som tidligere er behandlet med en vattpinne fuktet i alkohol. Åpningen av pakken med en prøve av produktet utføres på en slik måte at muligheten for forurensning av produktet og omkringliggende gjenstander er utelukket.

Overflaten på hermetikk som har et normalt utseende behandles med etylalkohol på en av følgende måter:

Overflaten på lokket tørkes av med en alkoholserviett, vattpinnen blir liggende på overflaten og satt i brann før du åpner hermetikk;

Gummihetter og kronhetter, bekelitt- og plastlukker behandles på samme måte, men tampongen er ikke satt i brann;

Metalldekselet (enden), avhengig av formålet med analysen, åpnes eller gjennombores med et stempel 1-4 ganger i umiddelbar nærhet av den brennende vattpinnen. Hullstørrelsen (diameter eller lengde) skal være 1-3 cm.

5.4. Utvalgte, veide porsjoner av produktet inokuleres umiddelbart i næringsmedier eller overføres til pepton-saltoppløsning for å forberede en fortynning.

Før du åpner flasker eller rør med skrukork, skru av den ferdige korken eller bøssingen. Kantene på flasken eller membranen til røret fyres i en brennerflamme; membranen er gjennomboret med en steril skalpell.

Før du åpner flasken, forseglet med en krone eller foliepropp, fyres lukningen i brennerens flamme, korken fjernes med en steril nøkkel, kantene på flasken fyres igjen i brennerens flamme.

Ved åpning av flasker med gummilukking fjernes lukket behandlet med etylalkohol uten foreløpig avfyring, og kantene på flasken fyres med en brennerflamme.

5.5. Hermetikk som er defekt i utseende legges på et metallbrett. Umiddelbart før en prøve av produktet tas, behandles overflaten av lokket (enden) med metoden spesifisert i punkt 5.2, men etylalkohol antennes ikke. Dekk det behandlede lokket (eller enden) med en invertert steril metalltrakt slik at trakten dekker overflaten helt. Gjennom den smale åpningen av trakten, stikk forsiktig gjennom lokket (enden) med et sterilt stempel, og danner et nålehull.

I stedet for en metalltrakt er det lov å bruke en plastpose. Etter å ha behandlet lokket (enden), legges hermetikken i en plastpose som på forhånd er tørket med etylalkohol slik at bunnen av posen dekker overflaten som skal åpnes. Posen er tett knyttet nedenfra. Ved å trykke forsiktig på stansen lages det et hull samtidig i lokket på boksen og i en plastpose som er tett presset mot den.

Etter at gassen og produktet slutter å komme ut av boksen med produktet, fjernes trakten og posen, lokket tørkes igjen med en steril vattpinne, hullet utvides med et stempel, og en prøve av produktet blir umiddelbart tatt fra boksen for inokulering eller for fremstilling av dens fortynninger.

6. Valg av testporsjoner og klargjøring av den første fortynningen

6.1 Fra hver prøve av produktet, avhengig av parametrene som skal bestemmes, tas en eller flere veide porsjoner for tilberedning av fortynninger og/eller inokulering i næringsmedier.

6.2. Massen (volum) av en prøve beregnet for såing i næringsmedier og/eller for å forberede dens fortynning må fastsettes i den forskriftsmessige og tekniske dokumentasjonen for en bestemt type produkt eller analysemetoder, men ikke mindre enn 10 ± 0,1 g (cm 3).

6.3. Inokulasjonsprøven tas med gravimetrisk eller volumetrisk metode umiddelbart etter åpning av produktprøven. Obduksjonen utføres under forhold som utelukker kontaminering av produktet med mikroorganismer, i umiddelbar nærhet av brennerflammen med sterile instrumenter.

6.4. Den veide delen av produktet tas slik at alle komponentene er representert i det og i samme forhold som i den analyserte prøven.

6.5. For fremstilling av fortynninger av den veide delen av produktet brukes en pepton-saltoppløsning. Forholdet mellom massen (volum) av prøven av produktet og volumet av pepton-saltvannsoppløsningen for de første og etterfølgende fortynningene er:

1: 9 - for 10 ganger fortynning (for produkter som inneholder en stor mengde fett uten overflateaktive stoffer 1:10);

1: 5 - for 6 ganger fortynning;

1: 3 - for 4 ganger fortynning;

1: 1 - for 2 ganger fortynning.

Hvis det er nødvendig å fortynne en prøve av produkter som inneholder en stor mengde fett, er det tillatt å bruke overflateaktive stoffer (natriumbikarbonat, etc.) som ikke har antimikrobiell aktivitet.

For å forberede en fortynning av en prøve av produkter med høyt osmotisk trykk, er det tillatt å bruke pepton eller destillert vann.

6.6. Den første fortynningen av den veide delen av produktet tilberedes i samsvar med de aseptiske forholdene på en av følgende måter:

oppløsning av produkter;

fortynning av produkter med en flytende fase;

ved å suspendere pulver, deigaktige produkter og mikrobielt kontaminerte produktstykker; homogenisering av faste produkter.

6.7. Veide porsjoner av en prøve av flytende og viskøse produkter tas med en steril pipette med en bomullstopper ved å føre pipetten inn i dybden av produktet.

En del av produktet som er igjen på overflaten av pipetten får renne til tuppen av pipetten. Den resulterende dråpen fjernes ved å berøre den indre veggen av fatet eller forbrukerbeholderen over overflaten av produktet.

Viskøse produkter fjernes fra overflaten av pipetten med en steril vattpinne.

Den veide delen av produktet overføres til en skål med pepton-saltoppløsning for å forberede den innledende fortynningen slik at pipetten ikke berører overflaten av pepton-saltvannsoppløsningen. Bruk en annen steril pipette, bland produktet grundig med pepton-saltvannsløsningen ved å fylle og skyve blandingen ti ganger.

Når du arbeider med tyktflytende produkter, er det tilrådelig å plassere flere glasskuler i en bolle for raskere blanding med pepton-saltløsning.

6.8. Det flytende produktet mettet med karbondioksid (CO 2) overføres til en steril konisk kolbe forseglet med en bomullstopper eller til en annen beholder og varmes opp under hyppig omrøring i sirkulære bevegelser i et vannbad ved en temperatur på 30 til 37 ° C til gassbobler vil ikke lenger genereres.

En veid del av produktprøven tas og behandles i henhold til punkt 6.7.

6.9. En veid porsjon fra prøver av pulveraktige eller løse produkter tas med en steril skje eller spatel fra forskjellige steder av produktet (om nødvendig, før du tar den veide delen med en steril skje, fjern 2 cm av det øverste laget av produktet), deretter overføres den veide delen til en på forhånd veid steril skål med lokk, veid. Pepton-saltvannsløsning tilsettes til prøven i den mengde som er nødvendig for fremstilling av den første fortynningen. Blandingen omrøres eller ristes 25 ganger i en sirkulær bevegelse med en radius på 30 cm inntil en jevn konsistens av produktet er oppnådd.

Hvis det pulverformige produktet ikke er oppløst i vann, blir den resulterende suspensjonen satt i 10 minutter etter å ha blandet det med pepton-saltoppløsning og ristes kraftig i 1 minutt igjen.

6.10. En veid del av prøver av produkter som svulmer i vann tas og den første fortynningen tilberedes i samsvar med kravene i forskriftsmessig og teknisk dokumentasjon for en bestemt type produkt.

6.11. En veid porsjon fra prøver av faste vannløselige produkter tas med en slikkepott eller skje etter knusing, maling eller maling under aseptiske forhold og behandles deretter i henhold til punkt 6.9.

En veid porsjon fra prøver av vannuløselige faste produkter homogeniseres i tilfellene spesifisert i den normative og tekniske dokumentasjonen. Ved homogenisering av produktet bør det totale antallet omdreininger av homogenisatoren være 15-20 tusen. Antall omdreininger av homogenisatoren bør ikke være mindre enn 8000 og mer enn 45000 omdreininger per minutt.

Det tillates å homogenisere det usteriliserte produktet ved å male det til en homogen konsistens oppnås i en steril mørtel i samsvar med aseptiske forhold.

6.12. En veid del av prøver av deigaktige produkter tas etter grundig blanding med skje eller glassstang og behandles deretter i henhold til punkt 6.9.

6.13. En veid porsjon flytende fettprøver tas med en varm pipette oppvarmet ved flamming. Etter å ha fylt pipetten med produktet, fjernes restene fra overflaten av pipetten med en steril vattpinne.

Produktet pipetteres i en bolle med en malt glasspropp og fortynnes med den nødvendige mengden pepton-saltoppløsning oppvarmet til 40-45 ° C; når du oppdager psykrofile mikroorganismer, bør temperaturen ikke overstige 37 ° C. Det gjenværende fettet som fester seg til pipetten skylles med pepton-saltløsning, som suges flere ganger og tømmes ut av pipetten.

6.14. En porsjon av faste fettprøver tas etter å ha kuttet produktet i flere deler med en kniv eller ledning. Fjern om nødvendig topplaget.

En prøve av produktet tas fra overflaten av seksjonene fra forskjellige steder med en skalpell og overføres til en veid skål med lokk.

En viss vekt av prøven overføres til en bredhalset skål med en malt glasspropp. Resterende fett som fester seg til oppvaskens vegger, skylles i samme tallerken med en viss mengde pepton-saltoppløsning oppvarmet til 40-45 ° C, som tilsettes fatet i den nødvendige mengden for å oppnå den første fortynningen.

Fra fast fett kan prøven tas etter volum. Fett smeltes i en bolle med bred hals i et vannbad ved en temperatur ikke høyere enn 45 ° C; når psykrofile mikroorganismer oppdages, bør temperaturen ikke overstige 37 ° C.

Etter å ha blandet det smeltede fettet, overføres det med en varm pipette til en tallerken med bred hals med et malt glasslokk, som inneholder den nødvendige mengden pepton-saltløsning for å forberede den første fortynningen. Pepton-saltoppløsning forvarmes til 40-45 ° C; når psykrofile mikroorganismer oppdages opp til 37 ° C.

6.15. Prøver av piskede produkter eller en grøtaktig konsistens som inneholder en stor mengde fett, etter omrøring med en glassstang, tas med en skje i en veid tallerken og en pepton-saltoppløsning, oppvarmet til 40-45 ° C, tilsettes i mengde nødvendig for å forberede den første fortynningen.

6.16. Bestemmelse av mikrobiell forurensning av overflaten av produktprøver utføres ved spyling med bomullspinner.

En steril bomullspinne fuktes med pepton-saltløsning og gnis på forskjellige steder på overflaten av forskjellige deler av det analyserte produktet med et totalt areal på 100 cm 2.

Overflatearealet som skal analyseres måles ved hjelp av sterile maler med passende hull.

Tampongen legges i en bolle som inneholder minst 100 cm 3 pepton-saltløsning. Skålene lukkes med en gummipropp og ristes til tamponger faller fra hverandre i individuelle fibre. Den resulterende suspensjonen betraktes som den første fortynningen.

7. Fremstilling av ti ganger fortynninger

7.1. Den første ti ganger fortynningen av prøven er den første, den første fortynningen er forberedt i samsvar med punkt 6. Etterfølgende fortynninger oppnås fra den.

7.2. En påfølgende andre fortynning tilberedes fra én del av den opprinnelige fortynningen og ni deler peptonsaltvann ved å blande i et reagensrør.

Hvis en pipette ble brukt til å blande den første fortynningen, tilsettes 1 cm 3 av den opprinnelige fortynningen i 9 cm 3 pepton-saltvannløsning med samme pipette, uten å berøre overflaten av løsningen med pipetten. Fortynningen blandes med en annen pipette ved å suge og blåse ut innholdet i reagensglasset ti ganger.

7.3. Den tredje og etterfølgende fortynninger fremstilles på lignende måte.

7.4. Intervallet mellom tilberedning av veide porsjoner av produktet, fortynningen av disse og såing i kulturmedier bør ikke overstige 30 minutter.

skriftstørrelse

METODER FOR MIKROBIOLOGISK KONTROLL AV JORD - METODOLOGISKE ANBEFALINGER (godkjent av den russiske føderasjonens overlege for statlig sanitær ... Faktisk i 2018

4. Prøvetaking for bakteriologisk analyse

Kontroll av jordforurensning i bosetninger utføres under hensyntagen til de funksjonelle sonene i byen. Prøvetakingssteder er foreløpig markert på et skjematisk kart som gjenspeiler strukturen i bylandskapet. Prøvetaking utføres i samsvar med GOST 17.4.4.01-83 "Generelle krav til prøvetaking av jord"; GOST 17.4.4.02-84 "Metoder for prøvetaking og forberedelse av prøver for kjemisk, bakteriologisk, helmintologisk analyse". Det utarbeides en beskrivelse for territoriet som skal overvåkes, med angivelse av adresse, prøvetakingspunkt, generell avlastning av mikrodistriktet, plassering av prøvetakingspunkter og forurensningskilder, vegetasjonsdekke, arealbruksart, grunnvannstand, jordtype og andre data nødvendig for riktig vurdering og tolkning av analyseresultatprøvene.

Prøvetaking for bakteriologisk analyse utføres minst en gang i året på steder hvor mennesker, dyr sannsynligvis vil være, på steder med forurensning med organisk avfall. Når du studerer dynamikken til selvrensing av jord, utføres utvalget ukentlig i løpet av den første måneden, og deretter månedlig i vekstsesongen til slutten av den aktive fasen av selvrensing.

Et forsøkssted er en del av studieområdet preget av lignende forhold (avlastning, ensartethet i jordstrukturen og vegetasjonsdekket, arten av økonomisk bruk).

Teststedet bør ligge på et typisk sted for studieområdet. På et område på 100 kvm. m legges det en prøveplass med størrelse 25 m. Ved heterogenitet i relieffet velges lokalitetene i henhold til relieffelementene.

Flekkprøve - materiale tatt fra ett sted i horisonten eller ett lag av jordprofilen, typisk for en gitt horisont eller lag.

Punktprøver tas på prøvestedet fra ett eller flere lag eller horisonter ved konvoluttmetoden. Det graves ut en grop 0,3 mx 0,3 m og en dybde på 0,2 m. Overflaten på en av gropveggene rengjøres med en steril kniv. Deretter kuttes en jordprøve fra denne veggen, hvis størrelse bestemmes av den gitte prøven, så hvis det er nødvendig å ta 200 g jord, er prøvestørrelsen 20 cm x 3 cm x 3 cm, 500 g - 20 cm x 5 cm x 3 cm.

Flekkprøver tas med kniv, slikkepott eller jordbor.

En samlet prøve lages ved å blande inkrementelle prøver tatt fra samme prøvested.

For bakteriologisk analyse lages 10 samlede prøver fra ett prøvested. Hver kombinert prøve er bygd opp av tre punktprøver som hver veier fra 200 til 250 g, tatt lag for lag fra en dybde på 0 til 5 cm, fra 5 cm til 20 cm.

Jordprøver beregnet for bakteriologisk analyse, for å forhindre sekundær forurensning, bør tas i samsvar med reglene for asepsis: de tas med sterile instrumenter, blandet på en steril overflate, plassert i en steril beholder. Tiden fra prøvetaking til begynnelsen av studien bør ikke overstige 1 dag.

Når man studerer effekten av plantevernmidler og andre kjemikalier på mikrofloraen og selvrensende prosesser i dypere lag av jorda, brukes en grop på opptil 1 m dyp for å ta jordprøver Prøver tas fra gropveggen med et sterilt verktøy pr. 10 cm.

For å kontrollere den sanitære tilstanden til jorda i førskole-, skole- og medisinske institusjoner, lekeplasser og rekreasjonsområder, utføres prøvetaking minst 2 ganger i året - om våren og høsten. Størrelsen på teststedet bør ikke være mer enn 5 x 5 m.

Ved overvåking av den sanitære tilstanden til jord i territoriene til barneinstitusjoner og lekeplasser, utføres prøvetaking separat fra sandkasser og fra et felles område fra en dybde på 0-10 cm.

En samlet prøve tas fra hver sandkasse, som består av 5 punktprøver. Ved behov er det mulig å ta én samlet prøve fra alle sandkasser i hver aldersgruppe, satt sammen av 8 - 10 punkts prøver.

Jordprøver tas enten fra lekeområdene til hver gruppe (en kombinert fra minst fem punktprøver), eller én samlet prøve fra et felles område fra 10 punkter, mens det tas hensyn til de mest sannsynlige stedene for jordforurensning.

Ved overvåking av jord i området med punktkilder til forurensning (brønnbrønner, avfallsbeholdere, etc.), legges prøvefelt med en størrelse på ikke mer enn 5 x 5 m i forskjellige avstander fra kilden og på et relativt rent sted (kontroll).

Ved undersøkelse av jordforurensning ved transportveier legges prøveflater på veikantstriper, med hensyn til terreng, vegetasjonsdekke, meteo- og hydrologiske forhold.

Jordprøver tas fra smale striper 200 - 500 m lange i en avstand på 0 - 10, 10 - 50, 50 - 100 m fra vegbunnen. En blandingsprøve består av 20 - 25 punktprøver tatt fra 0 - 10 cm dyp.

Ved vurdering av jorda i landbruksområder tas jordprøver 2 ganger i året (vår, høst) fra en dybde på 0 - 25 cm For hver 0 - 15 hektar, minst 1 lokalitet med en størrelse på 100 - 200 kvadratmeter er lagt. m, avhengig av terrenget og arealbruksforholdene.

På territoriet til store byer med mange forurensningskilder utføres geokjemisk kartlegging ved hjelp av et testnettverk. For å identifisere forurensningsfokus anbefales en prøvetakingstetthet på 1 - 5 prøver per kvadratmeter. km med en avstand mellom prøvetakingspunktene 400 - 1000 m. For videre tildeling av territoriet med maksimal grad av forurensning, kondenseres testnettverket til 25 - 30 prøver per 1 kvadratkilometer. km med en avstand mellom prøvetakingspunktene på ca 200 m. Prøver tas fra 0 - 5 cm dyp.

Prøvene som tas, skal nummereres og registreres i loggen, og angi følgende data: serienummer og sted for prøvetaking, terreng, jordtype, formål med territoriet, type forurensning, dato for prøvetaking.

Prøver bør ha en etikett som angir sted og dato for prøvetaking, jordseksjonsnummer, jordforskjell, horisont og dybde av prøvetaking, og navnet på undersøkeren.

7. Begrensningen av gyldighetsperioden ble fjernet ved resolusjonen av USSRs statsstandard datert 23.01.91 N 38

8. UTGAVE (april 2010) med endring nr. 1, godkjent i september 1989 (IUS 12-89)


Denne standarden gjelder for matvarer og smakstilsetninger og spesifiserer forberedelse av prøver for mikrobiologisk analyse.

Begrepene som brukes i standarden og forklaringer til dem er angitt i vedlegg 1.

1. APPARAT, REAGENSER OG MATERIALER

1.1. Når du forbereder prøver for analyse, brukes følgende utstyr, reagenser og materialer:

vann bad;

homogenisator, laboratorieblander eller porselensmørtel i henhold til GOST 9147;

membran filtrering enhet;

gass- eller alkoholbrenner i samsvar med GOST 25336;

metall trakter;

slag;

flaskeåpningsnøkkel;

boks åpner;

saks, skalpell, pinsett i samsvar med GOST 21241, spatel, skje;

sjablonger (mal);

prøverør i samsvar med GOST 25336;

kolber i samsvar med GOST 25336;

pipetter i henhold til NTD;

gummi propper;

glasskuler;

rettet etylalkohol i samsvar med GOST 5962 *; 70 %;
________________
* GOST R 51652-2000 er i kraft på den russiske føderasjonens territorium.


plastposer;

vaskemiddel;

natriumklorid i henhold til GOST 4233;

pepton for bakteriologiske formål i samsvar med GOST 13805.

Verktøy og overflaten på enheter i direkte kontakt med produktet må steriliseres ved hjelp av en av metodene spesifisert i GOST 26668.

1.2. Tilberedning av pepton saltvannsløsning

Pepton-saltoppløsningen fremstilles som følger: 8,5 g natriumklorid og 1,0 g pepton oppløses i 1 L destillert vann med langsom oppvarming. Den resulterende løsningen, om nødvendig, filtreres gjennom et papirfilter, pH justeres til 7,0 ± 0,1, helles i kolber, reagensrør eller andre kar, forsegles og steriliseres ved en temperatur på (121 ± 1) ° С i 30 minutter .

Løsningen oppbevares på et mørkt sted ved en temperatur på (4 ± 2) ° С i ikke mer enn 30 dager under forhold som utelukker fuktighetsfordampning.

Temperaturen på pepton-saltoppløsningen bør tilsvare temperaturen til det analyserte produktet.

1.3. Tilberedning av peptonvann

Peptonvann tilberedes på samme måte som pepton-saltoppløsning uten tilsetning av natriumklorid.

2. FORBEREDELSE AV PRØVER FOR ANALYSE

2.1. Prøvepakken inspiseres og matches med inskripsjonen på litografisk trykk eller på etiketten spesifisert i medfølgende dokument.

2.2. Prøvebeholderen renses for forurensning. Hvis hermetisk forseglede produktprøver er sendt inn for analyse, kontrolleres tettheten til beholderen. Tettheten til hermetikk bestemmes i samsvar med GOST 8756.18, tettheten til polymerbeholderen med produktet, samt hermetikk forseglet med lokk med en elastisk membran (knapp) - visuelt. Overflaten på den elastiske membranen skal være konkav innover. En hermetisk forseglet glass-, metall- eller polymerbeholder med et produkt vaskes med vann og et vaskemiddel, skylles deretter med rent vann og tørkes. En uforseglet pakke med et produkt tørkes av med en vattpinne fuktet i etylalkohol.

Hermetikk termostateres umiddelbart før mikrobiologisk analyse.

Hermetikk er underlagt termostatering:

hermetisk forseglet, uten defekter i utseende, designet for å bestemme den industrielle steriliteten til et hermetisk produkt og den mikrobiologiske stabiliteten til hermetikk;

med vibrerende ender og kjeks i en hermetisk forseglet beholder, designet for å identifisere årsakene til disse defektene.

Hermetikk beregnet for påvisning av botulinumtoksiner i dem, bombing, med tegn på mikrobiologisk forringelse og lekker termostatering er ikke gjenstand for.

For manifestasjon av den vitale aktiviteten til mesofile aerobe, fakultative anaerobe og anaerobe mikroorganismer, termostateres hermetikk ved 30-37 ° C i beholdere med en kapasitet på opptil 1 dm3 inkludert i minst 5 dager, i beholdere med en kapasitet på mer enn 1 dm3 - minst 7 dager.

For manifestasjon av den vitale aktiviteten til termofile aerobe, fakultative anaerobe og anaerobe mikroorganismer, termostateres hermetikk i beholdere av enhver kapasitet ved 55-62 ° C i minst 3 dager. Under termostatering inspiseres hermetikk daglig. Umiddelbart etter påvisning fjernes hermetikk med manifesterte beholderdefekter fra termostaten og oppbevares i 24 timer ved romtemperatur, hvoretter beholderens tilstand og, hvis mulig, utseendet til produktet noteres. Hermetikk i en beholder som får et normalt utseende etter avkjøling i romtemperatur anses som feilfri og er fortsatt termostatisert.

Etter termostatering av hermetikk og avkjøling i 24 timer til romtemperatur, noteres beholderens tilstand og om mulig utseendet til produktet.

Defekter på hermetikk er gitt i vedlegg 2.

2.3. Mikrobiologisk analyse av produktprøver med normalt utseende utføres i en boks under aseptiske forhold. Pakken med en prøve av et produkt som er mistenkelig i utseende eller bortskjemt, åpnes i et eget rom.

Bokseforberedelse er beskrevet i vedlegg 3.

2.2, 2.3. (Endret utgave, endring N 1).

2.4. Prøver med frosset produkt tines ved en temperatur på (4 ± 2) ° C før den veide porsjonen tilberedes. Prøven tas umiddelbart etter tining, men senest 18 timer fra begynnelse av tining.

Det er tillatt å tine en produktprøve ved en temperatur på 18-20 ° C i 1 time.

Prøver av et produkt med jevn konsistens kan tines i en termostat ved 35 ° C, forutsatt at fullstendig tining oppnås på ikke mer enn 15 minutter.

2.5. Åpne pakken med en prøve av produktet

2.5.1. Umiddelbart før åpning av pakken med en prøve av produktet i forbrukerbeholderen, frittflytende eller med flytende fase, bland ved å snu beholderen 10 ganger fra bunnen til lokket eller i en sirkulær bevegelse.

2.5.2. Pakken med produktprøven (unntatt hermetikk) tørkes av med en vattpinne dynket i 70 % etylalkohol, alkoholen brennes eller fjernes ved fri fordampning. Deretter åpnes pakken, avfyres halsen på metall- eller glasskrukker, og massen (volumet) av produktet tas i den nødvendige mengden for tilberedning av en eller flere veide porsjoner.

2.5.3. Pakken med prøven (poser laget av folie, polymermaterialer eller papir) åpnes på et sted som tidligere er behandlet med en vattpinne fuktet i alkohol. Åpningen av pakken med en prøve av produktet utføres på en slik måte at muligheten for forurensning av produktet, omkringliggende gjenstander og miljø er utelukket.

2.5.4. Før åpning behandles overflaten av hermetikk som har et normalt utseende med etylalkohol på en av følgende måter:

for glasskrukker behandles lokket, for metallbokser enden motsatt av den merkede.

Tørk overflaten av lokket med en alkoholserviett, la vattpinnen ligge på overflaten og tenn den før du åpner hermetikken;

gummihetter og kronehetter, bekelitt- og plastlukkinger behandles også, men tampongen er ikke tent;

metalldekselet (enden), avhengig av formålet med analysen, åpnes eller gjennombores med et stempel 1-4 ganger i umiddelbar nærhet av den brennende vattpinnen. Hullstørrelsen (diameter eller lengde) skal være 1-3 cm.

Utvalgte, veide porsjoner av produktet sås umiddelbart i næringsmedier eller overføres til pepton-saltoppløsning for å forberede en fortynning;

før du åpner flasker eller rør med skrukork, skru av den ferdige korken eller bøssingen. Kantene på flasken eller membranen til røret fyres i en brennerflamme; membranen er gjennomboret med en steril skalpell.

Før du åpner flasken, forseglet med en krone eller foliepropp, fyres lukningen i brennerens flamme, korken fjernes med en steril nøkkel, kantene på flasken fyres igjen i brennerens flamme.

Ved åpning av flasker med gummilukking fjernes lukket behandlet med etylalkohol uten foreløpig avfyring og kantene på flasken fyres med en brennerflamme.

2.5.5. Hermetikk som er defekt i utseende legges på et metallbrett. Umiddelbart før prøvetaking av produktet behandles overflaten av lokket (enden) på den måten som er angitt i punkt 2.5.2, men etylalkohol antennes ikke. Dekk det behandlede lokket (eller enden) med en invertert steril metalltrakt slik at trakten dekker overflaten helt. Gjennom den smale åpningen av trakten, stikk forsiktig gjennom lokket (enden) med et sterilt stempel, og danner et nålehull.

I stedet for en metalltrakt er det lov å bruke en plastpose. Etter å ha behandlet lokket (enden), legges hermetikken i en plastpose som på forhånd er tørket med etylalkohol slik at bunnen av posen dekker overflaten som skal åpnes. Posen er tett knyttet nedenfra. Ved å trykke forsiktig på stansen lages det et hull samtidig i lokket på boksen og i en plastpose som er tett presset mot den.

Etter at gassen og produktet slutter å komme ut av boksen med produktet, fjernes trakten og posen, lokket tørkes igjen med en steril vattpinne, hullet utvides med et stempel, og en prøve av produktet blir umiddelbart tatt fra boksen for inokulering eller for fremstilling av dens fortynninger.

2.6. Valg av veide porsjoner og klargjøring av initialfortynning

2.6.1. Fra hver prøve av produktet, avhengig av parametrene som skal bestemmes, tas en eller flere veide porsjoner for tilberedning av fortynninger og/eller såing i næringsmedier.

2.6.2. Massen (volum) av en prøve beregnet for såing i næringsmedier og/eller for å tilberede fortynninger av den bør fastsettes i den forskriftsmessige og tekniske dokumentasjonen for en bestemt type produkt eller analysemetoder.

2.6.3. Inokulasjonsprøven tas med gravimetrisk eller volumetrisk metode umiddelbart etter åpning av produktprøven. Obduksjonen utføres under forhold som utelukker kontaminering av produktet med mikroorganismer, i umiddelbar nærhet av brennerflammen med sterile instrumenter.

2.6.4. Den veide delen av produktet tas slik at alle komponentene er representert i det og i samme forhold som i den analyserte prøven.

2.6.5. For fremstilling av fortynninger av den veide delen av produktet brukes en pepton-saltoppløsning.

Det er tillatt å tilberede de første fortynningene av produkter med en massefraksjon av NaCl mer enn 5% ved bruk av peptonvann, de første fortynningene av kjøtt, fisk og meieriprodukter - ved å bruke en fysiologisk løsning.

Massen (volum) av en prøve av produktet beregnet på tilberedning av den første fortynningen eller homogenatet må være minst (10 ± 0,1) g/cm3.

Forholdet mellom massen (volum) av prøven av produktet og volumet av pepton-saltvannsoppløsningen for de første og etterfølgende fortynningene er:

1: 9 - for 10 ganger fortynning (for produkter som inneholder en stor mengde fett uten overflateaktive stoffer 1:10);

1: 5 - for 6 ganger fortynning;

1: 3 - for 4 ganger fortynning;

1: 1 - for 2 ganger fortynning.

Hvis det er nødvendig å fortynne en prøve av produkter som inneholder en stor mengde fett, er det tillatt å bruke overflateaktive stoffer (natriumbikarbonat, etc.) som ikke har antimikrobiell aktivitet.

For å forberede en fortynning av en prøve av produkter med høyt osmotisk trykk, er det tillatt å bruke pepton eller destillert vann.

(Endret utgave, endring N 1).

2.6.6. Den første fortynningen av den veide delen av produktet tilberedes i samsvar med de aseptiske forholdene på en av følgende måter:

oppløsning av produkter;

fortynning av produkter med en flytende fase;

ved å suspendere pulver, deigaktige produkter og overflaten av mikrobielt kontaminerte produktstykker;

homogenisering av faste produkter.

2.6.7. Veide porsjoner av en prøve av flytende og viskøse produkter tas med en steril pipette med en bomullstopper ved å føre pipetten inn i dybden av produktet.

En del av produktet som er igjen på overflaten av pipetten får renne til tuppen av pipetten. Den resulterende dråpen fjernes ved å berøre den indre veggen av fatet eller forbrukerbeholderen over overflaten av produktet.

Viskøse produkter fjernes fra overflaten av pipetten med en steril vattpinne.

Den veide delen av produktet overføres til en skål med pepton-saltoppløsning for å forberede den innledende fortynningen slik at pipetten ikke berører overflaten av pepton-saltvannsoppløsningen. Bruk en annen steril pipette, bland produktet grundig med pepton-saltvannsløsningen ved å fylle og skyve blandingen ti ganger.

Når du arbeider med tyktflytende produkter, er det tilrådelig å plassere flere glasskuler i en bolle for raskere blanding med pepton-saltløsning.

2.6.8. Det flytende produktet mettet med karbondioksid (CO) overføres til en steril konisk kolbe forseglet med en bomullstopper eller til en annen beholder og varmes opp under hyppig omrøring i en sirkulær bevegelse i et vannbad ved en temperatur på 30 til 37 ° C til ingen flere gassbobler utvikles.

En del av produktprøven tas og behandles i henhold til punkt 2.6.7.

2.6.9. En veid porsjon fra prøver av pulveraktige eller løse produkter tas med en steril skje eller spatel fra forskjellige steder av produktet (om nødvendig, før du tar den veide delen med en steril skje, fjern 2 cm av det øverste laget av produktet), deretter overføres den veide delen til en på forhånd veid steril skål med lokk, veid. Pepton-saltvannsløsning tilsettes til prøven i den mengde som er nødvendig for fremstilling av den første fortynningen. Blandingen omrøres eller ristes 25 ganger i en sirkulær bevegelse med en radius på 30 cm inntil en jevn konsistens av produktet er oppnådd.

Hvis det pulverformige produktet er uoppløselig i vann, blir den resulterende suspensjonen satt i 10 minutter etter å ha blandet det med pepton-saltvannsoppløsning og ristes igjen kraftig i 1 minutt.

2.6.10. En veid del av prøver av produkter som svulmer i vann tas og den første fortynningen tilberedes i samsvar med kravene i forskriftsmessig og teknisk dokumentasjon for en bestemt type produkt.

2.6.11. En veid del av prøver av faste vannløselige produkter tas med en slikkepott eller skje, etter knusing, maling eller maling under aseptiske forhold og deretter behandlet i henhold til punkt 2.6.9.

En veid porsjon fra prøver av vannuløselige faste produkter homogeniseres i tilfellene spesifisert i den normative og tekniske dokumentasjonen. Ved homogenisering av produktet bør det totale antallet omdreininger av homogenisatoren være 15-20 tusen. Antall omdreininger av homogenisatoren bør ikke være mindre enn 8000 og mer enn 45000 omdreininger per minutt.

Hvis en heterogen masse oppnås under homogenisering av produktet, forsvares den i 15 minutter og supernatanten brukes til inokulering og (eller) fremstilling av fortynninger.

Det tillates å homogenisere det usteriliserte produktet ved å male det til en homogen konsistens oppnås i en steril mørtel i samsvar med aseptiske forhold.

(Endret utgave, endring N 1).

2.6.12. En veid prøve av deigaktige produkter tas etter grundig blanding med skje eller glassstang og behandles deretter i henhold til punkt 2.6.9.

2.6.13. En veid porsjon flytende fettprøver tas med en varm pipette oppvarmet ved flamming. Etter å ha fylt pipetten med produktet, fjernes restene fra overflaten av pipetten med en steril vattpinne.

Produktet pipetteres i en bolle med en malt glasspropp og fortynnes med den nødvendige mengden pepton-saltoppløsning oppvarmet til 40-45 ° C; når du oppdager psykrofile mikroorganismer, bør temperaturen ikke overstige 37 ° C. Det gjenværende fettet som fester seg til pipetten skylles med pepton-saltløsning, som suges flere ganger og tømmes ut av pipetten.

2.6.14. En porsjon av faste fettprøver tas etter å ha kuttet produktet i flere deler med en kniv eller ledning. Fjern om nødvendig topplaget.

En prøve av produktet tas fra overflaten av seksjonene fra forskjellige steder med en skalpell og overføres til en veid skål med lokk.

En viss vekt av prøven overføres til en bredhalset skål med en malt glasspropp. Resterende fett som fester seg til oppvaskens vegger, skylles i samme tallerken med en viss mengde pepton-saltoppløsning oppvarmet til 40-45 ° C, som tilsettes fatet i den nødvendige mengden for å oppnå den første fortynningen.

Fra fast fett kan prøven tas etter volum. Fett smeltes i en bolle med bred hals i et vannbad ved en temperatur som ikke overstiger 45 ° C; når du oppdager psykrofile mikroorganismer, bør temperaturen ikke overstige 37 ° C.

Etter å ha blandet det smeltede fettet, overføres det med en varm pipette til en tallerken med bred hals med et malt glasslokk, som inneholder den nødvendige mengden pepton-saltløsning for å forberede den første fortynningen. Pepton-saltoppløsning forvarmes til 40-45 ° C; når psykrofile mikroorganismer oppdages opp til 37 ° C.

2.6.15. Prøver av piskede produkter eller en grøtaktig konsistens som inneholder en stor mengde fett, etter omrøring med en glassstang, tas med en skje i en veid tallerken og en pepton-saltoppløsning, oppvarmet til 40-45 ° C, tilsettes i mengde nødvendig for å forberede den første fortynningen.

2.6.16. Bestemmelse av mikrobiell forurensning av overflaten av produktprøver utføres ved spyling med bomullspinner.

En steril bomullspinne fuktes med pepton-saltløsning og gnis på forskjellige steder på overflaten av forskjellige deler av det analyserte produktet med et totalt areal på 100 cm.

Overflatearealet som skal analyseres måles ved hjelp av sterile maler med passende hull.

Pinnen plasseres i et reagensglass som inneholder 10 ml pepton-saltvannsløsning. Innholdet i røret blandes grundig med en pipette. Den resulterende suspensjonen betraktes som den første fortynningen.

(Endret utgave, endring N 1).

2.7. Forbereder ti ganger fortynninger

2.7.1. Den første ti ganger fortynningen av prøven er den initiale, den første fortynningen er forberedt i samsvar med punkt 2.6. Påfølgende fortynninger oppnås fra den.

2.7.2. En påfølgende andre fortynning tilberedes fra én del av den opprinnelige fortynningen og ni deler peptonsaltvann ved å blande i et reagensrør.

Hvis en pipette ble brukt til å blande den innledende fortynningen, tilsettes 1 cm av den opprinnelige fortynningen i 9 cm pepton-saltvannløsning med samme pipette, uten å berøre overflaten av løsningen med pipetten. Fortynningen blandes med en annen pipette ved å suge og blåse ut innholdet i reagensglasset ti ganger.

2.7.3. Den tredje og etterfølgende fortynninger fremstilles på lignende måte.

2.7.4. Intervallet mellom tilberedning av veide porsjoner av produktet, fortynningen av disse og såing i kulturmedier bør ikke overstige 30 minutter.

VEDLEGG 1 (referanse). Term brukt i standarden og forklaringer til den

VEDLEGG 1
Henvisning

(Endret utgave, endring N 1).

VEDLEGG 2 (referanse). HERMEDDEFEKER

VEDLEGG 2
Henvisning

Defekter ved et hermetisk produkt er:

tegn på utvikling av mikroorganismer som er synlige for det blotte øye: gjæring, mugg, slim, etc.;

sediment på bunnen av boksen eller på kanten av overflaten av produktet med beholderen ("ring");

turbiditet i væskefasen;

koagulasjon;

forsuring;

fremmed lukt og (eller) smak som ikke er typisk for produktet;

fargeendring.

Defekter i utseendet til beholdere med produkter pakket i den vurderes:

tegn på lekkasjer synlige for det blotte øye: hull, gjennom sprekker, flekker eller spor av produkt som strømmer ut av boksen;

bombing;

kjeks;

bokser med vibrerende ender;

feil utformet søm av blikkbokser (tunger, tenner, underskjæring, falsk søm, rullesøm);

rust, etter fjerning av hvilke skjell gjenstår;

deformasjon av kroppen, ender eller langsgående søm av bokser i form av skarpe kanter og "fugler";

skjeve lokk på glasskrukker, underskjærer korrugeringen av lokkene langs det sammenrullede feltet, utstikkende gummiring ("løkke");

sprekker eller oppsprukket glass ved sømmen, ufullstendig plassering av lokkene i forhold til boksens hals;

deformasjon (innrykk) av lokkene til glasskrukker, noe som forårsaket brudd på sømmen;

en konveks elastisk membran (knapp) på lokket.

VEDLEGG 3 (referanse). FORBEREDELSE AV BOKSING

VEDLEGG 3
Henvisning

Hermetikk åpnes i et boksrom spesielt tilrettelagt for mikrobiologisk analyse. Boksen skal ikke ha overflater som er utilgjengelige for våt desinfisering, og bevegelse av luft skapt av trekk bør utelukkes. Vegger, gulv og tak skal fores med materiale eller males med maling som tåler våt desinfeksjon. For å sterilisere luften er boksen utstyrt med ultrafiolette lamper med en hastighet på 1,5-2,5 W per 1 m.

Kun mikrobiologen som utfører analysen og om nødvendig en assistent skal være i boksen.

Boksen skal ha bord og krakk. Det skal ikke være unødvendige gjenstander, annet enn de som kreves for analyse av hermetikk.

Tabellen skal inneholde:

spritlampe eller gassbrenner;

en krukke med en malt kork med alkohol;

en krukke lukket med lokk med forhåndstilberedte tette sterile bomullspinner som måler 3x3 cm eller bomullsringer;

krukker med en desinfiserende løsning (laghøyde 3 cm) for plassering av pipetter eller rør som brukes etter analyse;

et lite metall- eller emaljebrett som de analyserte glassene er plassert på;

sterile pipetter eller rør som prøven tas med.

I skuffen på bordet bør hjelpeutstyr oppbevares: pinsett og en stanse. Punchen skal ha form som et spyd med et tverrsnitt i form av en rombe med diagonaler på 1x1,5 cm eller med en seksjon i form av en likebenet trekant.

Når du åpner et stort antall bokser, brukes en stans, festet på et stativ. I dette tilfellet utføres åpningen ved å trykke på stempelet på lokket til boksen ved hjelp av en spak.

Før du åpner boksen, flammes stansen i flammen til en tampong.

Boksen vaskes og desinfiseres umiddelbart før analysen (ikke tidligere enn 24 timer før start) og etter at den er ferdig. Desinfeksjon utføres ved å tørke av alle overflater med klor eller andre desinfeksjonsmidler i henhold til instruksjonene for hvert medikament. 45 minutter før arbeidet påbegynnes i boksen, slås bakteriedrepende lamper på i (30 ± 5) minutter.

For tiden brukes laminære strømningsbokser (beskyttende ultrarene luftkabiner) for mikrobiologiske analyser. Laminære bokser produseres av Uzhgorod-anlegget for medisinsk utstyr "Laminar", bokser av BPV 1200-merket er produsert i Ungarn, bokser av TVG-S II 1.14.1-merket er produsert av Babcock - BSH (Tyskland).


VEDLEGG 2, 3. (Introdusert i tillegg, Rev. N 1).

Elektronisk tekst til dokumentet
utarbeidet av JSC "Kodeks" og verifisert av:
offisiell publikasjon
Matvarer, hermetikk.
Mikrobiologiske analysemetoder:

Lør. GOSTs. - M .: Standardinform, 2010